高效液相色谱法测定小儿复方麻黄碱桔梗糖浆中盐酸麻黄碱含量

陆仕华，李丹凤，黄兴振

（1.广西壮族自治区食品药品审评查验中心，广西南宁　530029；2.广西壮族自治区食品药品检验所，广西南宁　530021；3.广西医科大学药学院，广西南宁　530021）



高效液相色谱法测定小儿复方麻黄碱桔梗糖浆中盐酸麻黄碱含量

陆仕华1，李丹凤2，黄兴振3

（1.广西壮族自治区食品药品审评查验中心，广西南宁530029；2.广西壮族自治区食品药品检验所，广西南宁530021；3.广西医科大学药学院，广西南宁530021）

摘要：目的建立测定小儿复方麻黄碱桔梗糖浆中盐酸麻黄碱含量的高效液相色谱（HPLC）法。方法色谱柱采用Inertsil ODS-3 C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为乙腈-含0.1%三乙胺的0.1%磷酸溶液（10∶90），流速1.0 mL/min，检测波长205 nm，柱温30℃，进样量20 μL。结果盐酸麻黄碱质量浓度在5.715 0～57.150 0 μg/mL范围内与峰面积呈良好线性关系（r=0.999 8），平均加样回收率为100.08%，RSD为0.76%（n=9）。结论该法简便准确、灵敏度高、结果可靠，重复性好，可作为小儿复方麻黄碱桔梗糖浆的质量控制方法。

关键词：高效液相色谱法；小儿复方麻黄碱桔梗糖浆；盐酸麻黄碱；含量测定

小儿复方麻黄碱桔梗糖浆是由盐酸麻黄碱、桔梗、氯化铵、枸橼酸钠、枸橼酸、薄荷脑、苯甲酸、茴香水、乙醇、蔗糖与水制成的糖浆剂，主要用于小儿感冒、支气管炎引起的咳嗽、多痰等［1］。原质量标准采用紫外分光光度法对含量进行测定，准确度不够高，专属性不够强［2-3］。为更好、更精确地控制药品质量，笔者采用高效液相色谱（HPLC）法测定方中盐酸麻黄碱的含量。现报道如下。

1　仪器与试药

Waters 2695-2998型高效液相色谱仪（DAD检测器，Empower色谱工作站）；XD205DU型电子天平（瑞士梅特勒公司）。盐酸麻黄碱对照品（中国食品药品检定研究院，批号为171241-201007，供含量测定用）；小儿复方麻黄碱桔梗糖浆（厂家A，批号为40901，40902，40903）；乙腈为色谱纯，水为超纯水，其余试剂均为分析纯。

2　方法与结果

2.1色谱条件及系统适用性试验［4-5］

图1　高效液相色谱图

色谱柱：Inertsil ODS-3 C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；检测波长：205 nm；流动相：乙腈-含0.1%三乙胺的0.1%磷酸溶液（10∶90）；流速：1.0 mL/min；进样量：20 μL；柱温：30℃。在上述色谱条件分别测定供试品溶液、对照品溶液、阴性对照品溶液，色谱见图1。对照品溶液与供试品溶液色谱中盐酸麻黄碱的保留时间基本一致，阴性对照品溶液色谱在相应位置无相应峰出现，与其他组分分离完全，按盐酸麻黄碱峰计算理论板数应不低于3 000。

2.2溶液制备

称取盐酸麻黄碱对照品10 mg，精密称定，置100 mL容量瓶中，加0.1 mol/L盐酸溶液适量，振摇使溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每1 mL中含盐酸麻黄碱0.1 mg的对照品贮备液。精密量取对照品贮备液5 mL，置25 mL容量瓶中，加0.1 mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，制成1 mL中含盐酸麻黄碱20 μg的对照品溶液。精密量取样品2.5 mL，置100 mL容量瓶中，加0.1 mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，得供试品溶液。将桔梗粉碎成粗粉，加常水煎煮2次，第1次2 h，第2次1 h，合并煎液，趁热加入苯甲酸溶解，静置24 h，滤取上清液，加蔗糖400 g制成糖浆；另取氯化铵15 g、枸橼酸2 g、枸橼酸钠15 g加水溶解后，加入糖浆中，再将薄荷脑0.15 g溶于乙醇、氯仿混合液中，与茴香水4 mL混合后，缓缓加入上述糖浆中，随加随搅拌，最后加适量超纯水使成1 000 mL，搅匀，滤过，分装，即得阴性对照品溶液。

2.3方法学考察

线性关系与定量限考察：精密量取对照品贮备液0.5，1.0，2.0，4.0，5.0 mL，分别置10 mL容量瓶中，加0.1 mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，制成不同质量浓度的对照品溶液，按2.1项下色谱条件进样测定，记录峰面积。以峰面积（A）对其质量浓度（C）作线性回归，得回归方程A=42 186 C-52 818（r=0.999 9）。结果表明，盐酸麻黄碱质量浓度在5.715 0～57.150 0 μg/mL范围内与峰面积线性关系良好。以信噪比为10计算，得出盐酸麻黄碱定量限为15.33 ng/mL。

精密度试验：取同一对照品溶液20 μL注入液相色谱仪，连续进样6次，记录色谱图。结果盐酸麻黄碱峰面积的RSD为0.59%（n=6），表仪器明精密度较好。

重复性试验：取同批样品（批号为140901）6份，依法制成供试品溶液，进样20 μL，分别测定每份样品的含量。结果盐酸麻黄碱的平均含量为0.83 g/L，RSD为0.42%（n=6），表明方法的重复性较好。

稳定性试验：取同一供试品（批号为140901）溶液，依法分别于0，1，2，4，6，8，10 h时进样20 μL测定。结果盐酸麻黄碱的峰面积RSD为0.65%（n=7），表明供试品溶液在10 h内稳定。

加样回收试验：取已知含量的同批样品（批号140901），按20 μg/mL质量浓度1/2的80%，100%，120%共3个梯度分别加入对照品贮备液8.0，10.0，12.0 mL，每个质量浓度平行配制3份，加0.1 mol/L盐酸溶液溶解并稀释至刻度，进样20 μL测定，计算回收率。结果见表1。

表1　盐酸麻黄碱加样回收试验结果（n=9）

2.4样品含量测定

取3批样品，按2.2项下方法制成供试品溶液，按2.1项下色谱条件进样测定，以外标法通过峰面积计算含量。结果批号为140901，140902，140903的3批样品中盐酸麻黄碱的含量分别为0.83，0.81，0.82 g/L。

3　讨论

目前，小儿复方麻黄碱桔梗糖浆中盐酸麻黄碱的含量测定主要是采用分光光度法中的紫外吸收系数测定法进行测定［6-7］。因复方制剂成分非常复杂，文献［8］报道，紫外吸收系数测定法测定时会有吸收系数和供试品溶液吸光度引起的不确定度，后者有吸收度测定重复性的不确定度，其中包括吸收度测定结果的不确定度和由证书给出吸收度重复性的不确定度，故吸光度引起的不确定度占主导，与所使用的紫外分光光度计有关。笔者采用HPLC法测定小儿复方麻黄碱桔梗糖浆中盐酸麻黄碱的含量，避免了因吸光度引起的不确定度，提高了检验的专属性。

对盐酸麻黄碱对照品溶液进行紫外全波段扫描，发现205 nm波长处的吸收强度最大，为近紫外光区，故选择检测波长为205 nm。

根据文献［9-11］报道，本试验中对流动相进行了比较筛选，首先考察了乙腈-含0.1%三乙胺的0.1%磷酸溶液（5∶95），峰形对称性不好，分离度一般。在此基础上调整流动相比例为乙腈-含0.1%三乙胺的0.1%磷酸溶液（10∶90），结果显示，杂质峰和色谱峰分离度良好，色谱峰对称，基线平稳，不用进行复杂的梯度洗脱进行分离。

参考文献：

［1］王帅，余锦煌，张笑颜.顶空气相色谱法测定小儿复方麻黄碱桔梗糖浆中薄荷脑的含量［J］.中国药师，2014，17（9）：1 592-1 594.

［2］国家药典委员会.关于勘误“小儿复方麻黄碱桔梗糖浆”药品标准中有关内容的函［J］.中国药品标准，2006，7（6）：9.

［3］张晓燕，孙雪.高效液相色谱法测定复方桔梗麻黄碱糖浆中盐酸麻黄碱的含量［J］.中国药业，2014，23（18）：56-57.

［4］许勇，毛丹，陆继伟，等.复方桔梗麻黄碱糖浆（Ⅱ）的质量标准研究［J］.齐鲁药事，2012，31（10）：574-576.

［5］毛丹，许勇，陆继伟，等.复方桔梗麻黄碱糖浆质量标准研究［J］.中成药，2012，34（18）：1 518-1 522.

［6］WS-10001-（HD-1474）-2003，化学药品地方标准上升国家标准（第十五册）［S］.

［7］国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）［M］.北京：中国医药科技出版社，2010：附录Ⅳ23-附录Ⅳ24.

［8］腾南雁，刘向红，桑彤.紫外吸收系数法测定小儿氨酚黄那敏颗粒含量的不确定度评定［J］.中国药师，2011，14（3）：426-428.

［9］王戈，赵培敬.HPLC法测定宣清止咳糖浆中盐酸麻黄碱的含量［J］.齐鲁药事，2012，14（31）：577-578.

［10］马玉，肖禾，焦小珂，等.小儿解表止咳口服液中盐酸麻黄碱含量测定［J］.中国药业，2014，23（6）：37-38.

［11］冯国.HPLC法测定复方愈酚麻黄糖浆中四种成分的含量［J］.中国药事，2014，5（28）：474-478.

Content Determination of Ephedrine Hydrochloride in Child Compound Ephedrine Jiegeng Syrup by HPLC

Lu Shihua1，Li Danfeng2Huang Xingzhen1
（1.Guagnxi Food and Drug Evaiuation & Inspection Center，Nanning，Guangxi，China 530029；2.Guangxi Zhuang Autonomous Region Institute for Food and Drug Control，Nanning，Guangxi，China 530021；3.Pharmaceutical College Guangxi Medical University，Nanning，Guangxi，China 530021）

Abstract：Objective To establish an HPLC method for the determination of ephedrine hydrochloride in Child Compound Ephedrine Jiegeng Syrup.Methods The HPLC method was adopted on the Inertsil ODS-3 C18column（250 mm×4.6 mm，5 μm）with acetonitrile 0.1%phosphoric acid solution（containing 0.1%triethylamine）（10∶90）as the mobile phase.The flow rate was 1.0 mL/min and the column temperature was 30℃.The wavelength was 205 nm.Results The sample size of ephedrine hydrochloride in the range of 5.715 0-57.150 0 μg/mL showed the good linear relationship with the peak area（r=0.999 8），The average recovery rate was 100.08%（RSD=0.76%，n=9）.Conclusion This method is simple and rapid with good reproducibility，and can be used as one of the quality control standard for Child Compound Ephedrine Jiegeng Syrup.

Key words：HPLC；Child Compound Ephedrine Jiegeng Syrup；ephedrine hydrochloride；content determination

中图分类号：R284.1；R286.0

文献标识码：A

文章编号：1006-4931（2016）05-0056-03

作者简介：陆仕华，男，硕士研究生，药师，主要从事药物新制剂研究工作，（电子信箱）lushihua2318@163.com；黄兴振，男，硕士研究生，药师，主要从事药物新制剂研究工作，本文通讯作者，（电子信箱）huangxingzhen@163.com。

收稿日期：（2015-07-13）