●黄莉娜 雷水兰 朱俏琳 陈越 杨纲
灰毡毛忍冬对小鼠胆汁分泌的影响
●黄莉娜 雷水兰 朱俏琳 陈越 杨纲
目的:比较灰毡毛忍和蒸馏水对小鼠胆汁分泌的影响,为灰毡毛忍的在临床和生活中的运用提供实验依据。方法:将12只小鼠随机分为4组。空白对照组给予蒸馏水 ,绿原酸高、中、低剂量组分别给予绿原酸14,7,3.5 mg.kg-1。采用在体胆汁引流法,观察给予蒸馏水和不同浓度的绿原酸对小鼠胆汁分泌的影响。结果:绿原酸各剂量组给药后30-90min时段小鼠胆汁分泌量高于空白对照组,说明灰毡毛忍冬具有显著促进胆汁分泌的作用。背景:灰毡毛忍冬(LoniceramacranthoidesHand Mazz)俗称大花忍冬, 系商品金银花的主流 品种。灰毡毛忍冬全株均可入药,其中花蕾为常用入药部位。其花蕾药食两用,具有较强的抗菌、清热、防暑功效。除用于治病外,大量用于食物和化工原料。现已研究出忍冬糖果、金银花露等副产品,还可以直接用于煮粥、炖鸡和炒菜【1】。在对灰毡毛忍冬花蕾的化学成分研究中发现,其所含的化学成分主要为黄酮类、挥发油类、皂苷类和绿原酸类这四大类。其中,绿原酸(Chlorogenic acid, CA),又名咖啡鞣酸,是由咖啡酸(eafeic acid)与奎尼酸(quinic acid)形成的缩酸【2】。据相关报道称,灰毡毛忍冬中的绿原酸有着促进胆汁分泌的功能,具有利胆保肝的作用。
灰毡毛忍冬;绿原酸;保肝利胆;胆汁分泌
目的:结合相关临床试验,进一步研究灰毡毛忍冬在胆汁分泌中所起的作用。
绿原酸 分子式C16H18O9,分子量:354.31,EINECS:206-325-6
实验内容:
健康小鼠12只(重量相当)
灰毡毛忍冬(湖南省隆回县和新宁县产) 蒸馏水
灰毡毛忍冬提纯制备:
用乙醇提取,将提取液真空浓缩制成浸膏,再加水转溶,然后加铅沉淀,过滤沉淀物,加20%的硫酸溶解沉淀,析出绿原酸,用乙酸乙酯萃取,浓缩析出粗品,重结晶得到纯品。【3】
3.1 实验分组
将12只小鼠随机分为4组。空白对照组给予蒸馏水 ,绿原酸高、中、低剂量组分别给予绿原酸14,7,3.5 mg.kg-1。
3.2 给药途径:
十二指肠和胃的交界处分别给药
3.3 手术操作及导管的安置
将小鼠依次称重,编号,25%乌拉坦(0.75g/kg)麻醉后,固定,腰背部垫一小枕使上腹部抬高以利于手术中暴露,剖腹,在十二指肠降部显示胆总管,穿三根线,先结扎中间一根作为牵引线,在紧靠结扎部位的上方将胆总管剪一小口,循向肝侧插入塑料管以引流胆汁,结扎固定,收集胆汁。术后用止血钳夹闭腹壁,盐水纱布覆盖,先收集20min 作为给药前的基线,然后每组小鼠分别给药。
3.4 测定方法及观察指标
给药后每20min收集胆汁1次,共3次,记录数据,为避免实验误差每次记录人员为同一人。
3.5 统计学方法
用SPSS10.0统计软件包建立数据库,并进行数据的处理分析。
绿原酸14,7,3.5 mg.kg-1剂量组给药后30-90min时段小鼠胆汁分泌量高于空白对照组,表明灰毡毛忍冬提纯品可促进小鼠胆汁的分泌,但绿原酸个浓度组间无明显差异。
灰毡毛忍冬具有显著促进胆汁分泌的作用,主要与其所含的绿原酸成分有关,与文献报道一致。为灰毡毛忍冬在胆道疾病的治疗提供实验依据,也为灰毡毛忍冬药物精制提供药效基础。
(作者单位:长沙医学院口腔医学院)
[1]王凤, 陈兴福, 杨文钰,等. 川中丘陵区灰毡毛忍冬氨基酸组分及营养价值分析[J]. 食品与发酵工业, 2012, 38(09):156-162.
[2]孟伟, 温亚男, 魏永巨. 金银花中绿原酸含量的荧光法测定[C]//全国原子光谱学术会议. 2009:211-211.
[3]黄绍重,绿原酸的提取及应用[J]. 应用化工, 2006, 35(06):467-469.
[4]陈奇,中药药理研究方向学[M]北京:人民卫生出版社,1994:442-446.
杨纲