迈瑞BC5390血液分析仪实验室性能验证

韦永琼，沈　伟，刘成桂，曹登成，杨　炼

(成都市妇女儿童中心医院检验科，四川成都 610031)



·论著·

迈瑞BC5390血液分析仪实验室性能验证

韦永琼，沈伟，刘成桂，曹登成，杨炼

(成都市妇女儿童中心医院检验科，四川成都 610031)

摘要:目的对迈瑞BC5390血液分析仪的主要性能进行实验室验证。方法依据美国临床和实验室标准化协会(CLSI)系列文件和相关文献，结合该实验室实际工作，对迈瑞BC5390(编号SM-45000421)的精密度、准确度、线性、临床可报告范围及携带污染率进行测定。结果迈瑞BC5390的本底计数均达到厂商设计规定的要求，检测WBC、RBC、PLT、Hb、HCT、MCV 6项精密度、准确度、线性范围良好，携带污染率低。白细胞分类与人工镜检分类相比，除嗜碱性粒细胞外，均有良好的相关性(r2>0.95)。结论迈瑞BC5390全自动血细胞分析仪的各项性能良好，精密度及准确度高，线性范围宽，携带污染率低，能较好地满足临床血液常规检查的要求。

关键词:血液分析仪；性能验证；精密度；准确度

全自动血细胞分析仪因其用血量少、结果准确度高及可报告参数多、同时操作简便易于标准化，因而极大地提高了血细胞检测的效率与质量，现已基本取代手工显微镜检查(形态学检验除外)。迈瑞BC5390是一款具有双通道白细胞五分类及异常细胞筛选功能的全自动血细胞分析仪，可用静脉全血、微量全血、预稀释血三种模式进行检测，因其末梢血模式用血量少，仅需20 μL，现已成为目前妇女儿童医院检验科不可缺少的仪器。但若未按标准对仪器进行性能评价，不了解其具体性能就盲目应用，检测结果的误差将大大超过手工操作，而检验结果准确性的高低直接影响到医生对患者病情的判断及疾病的诊疗，因此实验室对新安装的仪器必须进行性能验证，以保证检验结果准确、可靠。为了解本科室2014年8月新投入使用的迈瑞BC5390全血细胞分析仪的性能，本文参考美国临床和实验室标准化协会(CLSI)系列文件及相关文献对其精密度、准确度、线性、携带污染及白细胞分类相关性进行测定[1-2]，以验证新仪器BC5390的性能指标是否满足实验室需要。

1资料与方法

1.1标本来源批间精密度的评价采用高、低2个浓度水平的全血室内质控品作为检测标本；批内精密度、线性及携带污染率的评价使用2014年7～8月本院门诊及住院患者的EDTA-K2抗凝新鲜全血作为检测标本。

1.2仪器与试剂迈瑞BC5390全自动血细胞分析仪和相关配套试剂、校准品、质控品；日本奥林巴斯显微镜；珠海瑞氏-吉姆萨染液[3]。

1.3方法

1.3.1BC5390本底(空白)检测用仪器配套稀释液作为标本，在仪器选定的检测模式下计数，测得结果为该种检测模式当前状态下的空白计数结果。本底计数要求在厂家标示的范围内，若开机本底未达到要求者，不能做余下相关试验，必须经厂家售后服务工程师检修合格后再次测试。

1.3.2精密度分析根据EP15-A文件[4]，对BC5390进行精密度评价。批间精密度：取高、低两个水平质控品，每天测定2次，每次检测之间相隔2 h，连续测定10 d，一共收集20个数据，计算变异系数(CV)，标准差(s)。批内精密度：取高、中、低3个水平的新鲜全血，连续重复测定20次，计算CV，s；将实验所得的CV值与卫生部临检中心所要求的进行比较，若小于临检中心所要求的，说明该仪器的精密度指标符合要求。

1.3.3准确度分析参照CLSI的EP9-A2[5-7]文件以及国家食品药品监督管理局体外诊断试剂分析性能评估系列指导原则，采用对比试验进行准确度的验证。每天准备8份新鲜全血样本，浓度覆盖生物参考区间，分别在BC5390和基准仪器BC6900(SPA46151115)上进行测定，共5 d，收集40个数据进行分析。计算比对仪器和基准仪器之间的直线回归、相关系数(r)及相对偏差。判断标准为两仪器间r2>0.95及偏差在规定范围内为合格，即WBC：≤5%，RBC：≤2%，血红蛋白(Hb)：≤2%，平均红细胞体积(MCV)：≤3%，血小板(PLT)：≤5%，血细胞比容(HCT)：≤2%。

1.3.4线性范围验证参照EP6-A2[8]文件，选取接近预期上限的高值全血标本(H)1份，分别按100%、80%、60%、40%、20%的比例进行稀释，每个稀释度重复测定2次，计算的均值作为实测值。将实测值与理论值进行比较，并计算直线回归方程Y=bX+a和r，验证线性范围。判断标准：r≥0.975，b值在1±0.05范围内为合格。临床可报告范围：要求偏差在1/3CLIA′88之内的最大稀释度，为本室可接受的最大稀释度，临床可报告范围=最大稀释倍数×线性范围上限，偏差值=(Y实测值-X理论值)/X理论值。

1.3.5携带污染率测定取高浓度全血标本，连续测定3次，测定值分别为H1、H2、H3；再取低浓度全血标本，连续测定3次，测定值分别为L1、L2、L3。按公式计算携带污染率。携带污染率=(L1-L3)/(H3-L3)×100%。携带污染率值小于1.0%为合格。

1.3.6生物参考区间验证收集20份健康男性和20份健康女性新鲜EDTA-K2抗凝全血标本，连续上机检测，对现有的生物参考区间进行验证。验证所有提供参考范围的报告参数(如有性别或年龄划分，则按要求填入)。

1.3.7白细胞五分类的验证取20份非血液科非肿瘤科住院患者的EDTA-K2抗凝血，每份标本重复测定2次，取五分类均值。同时每份标本制备血片2张，分别由2位具备资格的检验人员在油镜下选择体尾交界处，分类计数200个白细胞，共400个，取均值与BC5390仪器五分类均值结果进行相关性分析[9]。

1.3.8质量控制验证前使用配套校准液、质控品对仪器进行校准以及室内质控检测，确保仪器状态良好。

1.4统计学处理采用Excel 2003软件进行数据分析，对各指标的检测结果分别计算算术平均值、s及相对偏差，可比性和线性验证计算回归方程Y=bX+a和r。

2结果

2.1BC5390本底检测BC5390本底检测结果显示每次本底计数均在厂家标示的范围内。

2.2精密度验证WBC、RBC、PLT、Hb、HCT、MCV的批间、批内精密度验证结果均低于判定标准，见表1，满足卫生部临检中心的要求。

表1　　迈瑞BC5390全血细胞分析仪精密度验证结果

表2　　迈瑞BC5390全血细胞分析仪的准确度验证

2.3准确度验证通过对比试验，迈瑞BC5390与参比仪器进行相关性分析，两台仪器r2>0.95以及误差均在允许范围内，仪器BC5390的准确度指标符合标准。见表2。

2.4线性验证WBC、RBC、Hb、HCT和PLT线性方程及线性范围见表3，各检测项目的线性验证结果均符合合格的判定标准。

表3　　迈瑞BC5390全血细胞分析仪线性验证结果

2.5携带污染率迈瑞BC5390全血细胞分析仪测定WBC、RBC、Hb、HCT和PLT的携带污染率均远低于判定标准的1%，满足临检中心的要求，见表4。

表4　　迈瑞BC5390全血细胞分析仪携带污率的计算

2.6生物参考区间验证检测男、女各20例健康志愿者全血标本，5项指标检测结果均至少有95%的检测值分布在实验室使用的生物参考区间范围内。

2.6白细胞五分类验证将20例非血液科患者的血细胞分析仪五分类百分比结果与手工显微镜分类结果进行比对分析，计算出回归方程和r，结果中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞的r分别为0.980、0.990、0.983、0.976、0.386，表明除嗜碱性粒细胞百分比外均有良好的相关性(r>0.975)。

3讨论

迈瑞BC5390是一款具有双通道白细胞五分类及异常细胞筛选功能的全自动血细胞分析仪，有多种不同的操作模式及多种项目组合检测，能满足不同的检测需求，仪器在不同模式下使用一根进样针检测，减少了因不同进样针而造成的结果差异。该仪器可对静脉血、末梢血进行定量分析，手动模式中还有标本足量时的封闭模式及量少时的开盖模式。因其开盖模式用血量少，仅需20 μL，已成为目前许多临床实验室特别是儿童医院检验科不可缺少的仪器。任何全自动分析仪在使用时都首先要保证该仪器的系统误差在临床可接受范围内，因此要求仪器在新安装和投入临床使用前，要显示有能力达到所需的性能且还须满足与检测相关的规格[7,10]。美国颁布的“临床实验室修正法规的最终法规”也明确要求：每个实验室在引入未作修改的、FDA认可或批准的检测系统时，在向临床报告患者检验报告前必须作性能指标的验证[9]。故本文对本院临床实验室新投入使用的迈瑞BC5390(编号SM-45000421)全血细胞分析仪实验室性能进行验证。

检测系统性能验证是临床实验室质量管理的重要内容，系统性能良好是保证患者检验报告准确、可靠的前提。其最主要的性能包括精密度、准确度、线性及携带污染率等。精密度是检测仪器在校准状态下，对同一份标本检测结果一致性的能力，良好的精密度是验证其他各项指标的基础[11]，卫生部临检中心要求批内和批间精密度应分别小于1/4和1/3CLIA′88允许范围。本研究中，迈瑞BC5390全自动血细胞分析仪批内、批间精密度CV%均小于判定标准，表明本仪器重复性良好，满足临床和患者的要求。通过与基准仪器的比对结果表，BC5390仪器准确度指标符合要求，结果稳定可靠，其检测出来的数据可信性高，可以放心出具报告。线性范围的验证是确定临床可报告范围的基础，当仪器检测结果超出线性范围时，该结果应视为不准确的测定值。本文表3中斜率b在1±0.05之内，r2均不低于0.95，检测浓度与稀释倍数呈线性相关线性，表明仪器检测的线性范围很宽，仪器对于临床标本的可报告范围上限较高，完全能满足临床上不同标本的准确定量分析。携带污染率是体现检测标本之间相互污染的程度，是判定高浓度标本是否影响低浓度标本测定结果的指标，其大小应符合仪器制造商的要求。表4结果显示，仪器BC5390携带污染率均远远小于标准要求的1%，表明冲洗功能良好，不同标本间的交叉污染小，对于结果的可信性也有很大的提高。

在白细胞五分类验证中，与显微镜手工分类相比，除嗜碱性粒细胞外，均有良好的相关性(r2>0.95)。嗜碱性粒细胞相关性不好，可能是由于嗜碱性粒细胞数量少，在血液中的绝对值相对低以及在血片中分布不均，数据变异较大所致，这也是目前全血细胞分析仪普遍存在的一个问题。面对这个问题，要求检验人员在日常工作中，应根据相应的复检标准并结合本实验室的实际工作，制订完善的复检规则，严格按照要求，做好人工显微镜复检的工作[12]，可做到基本不影响临床医师对检测结果的正常分析。

综上所述，迈瑞BC539全自动血细胞仪准确度及精密度良好，携带污染率低，线性范围覆盖临床可能遇到的水平，是一台性能良好的血细胞分析仪，可用于检验科的日常工作，基本能满足临床患者血液标本分析的需要。但仪器五分类结果需根据仪器散点图及报警提示，必要时进行显微镜复检后发出报告。

参考文献

[1]耿伏生．迈瑞BC5600血细胞分析仪实验室性能验证[J]．国际检验医学杂志，2013，34(24)：3393-3394．

[2]Beutler E,Blume KG,Kaplan JC,et al.International committee for standardization in haematology:recommended methods for red-cell enzyme analysis[J].Br J Haematol,1977,35(2):331-340.

[3]叶应妩，王毓三，申子瑜，全国临床检验操作规程[M].3版.南京：东南大学出版社，2006:123.

[4]National Committee for Clinical Laboratory Standards.EP15-A User demonstration of performance for precision and accuracy[S].Wayne,PA,USA:CLSI,2001:1-15.

[5]Clinical and Laboratory Standards Institute.EP15-A2 User verification of performance for precision and trueness:approved guideline[S].2nd ed.Wayne,PA,USA:CLSI,2005.

[6]Clinical and Laboratory Standards Institute.EP9-A2 Method comparision and bias estimation using patient samples:approved guideline[S].Wayne,PA,USA:CLSI,2002.

[7]杨平，郭靖澜，杨梅．SysmexXT-2000i全血细胞分析仪的性能验证[J]．国际检验医学杂志，2014，35(24)：3413-3414．

[8]National Committee for Clinical Laboratory Standards.EP6-A2 Evaluation of the linearity of quantitative measurement procedures:a statitical approach[J].Wayne,PA,USA:NCCLS,2002.

[9]马学斌，杨明，贾晶媛，等．应用CLSI系列文件对XE-2100全自动血细胞分析仪进行性能验证及评价[J]．国际检验医学杂志，2013，34(18)：2417-2418．

[10]王治国．临床检验方法确认与性能验证[M]．北京：人民卫生出版社，2009．

[11]曾张琴，董家书．Sysmex xs-800i血液分析仪性能验证[J]．检验医学与临床，2013，10(9)：1153-1154．

[12]朱晓辉，何菊英，朱忠勇．应用血液分析仪后复查血片的内容和方法及程序[J]．中华检验医学杂志，2003，26(12)：785-787．

Evaluation verification of Mindary BC5390 hematology analyzer

WeiYongqiong，ShenWei，LiuChenggui，CaoDengcheng，YangLian

(DepartmentofClinicalLaboratory,ChengduWomen′sandChildren′sCentralHospital,Chengdu,Sichuan610031,China)

Abstract:ObjectiveTo evaluate the performance verification of Mindary BC5390 hematology analyzer.MethodsAccording to requirement of CLSI documents,the precision,accuracy,linearity,carryover were evaluated.ResultsThe background counts all met the designed requirements of manufacturer.Precision,accuracy,linearity of the WBC,RBC,PLT,Hb,HCT,MCV were good and the contamination carrying rates were low.Except for basophils,the classification of leukocyte was well correlated with the artificial microscopy classification(r2>0.95).ConclusionThe BC5390 is a ideal automated hematology analyzer which has high precision and accuracy,wide linearity，low contamination carrying rate，and it can be used for the blood samples analysis.

Key words:hematology analyzer；performance qualification；precision；accuracy

(收稿日期：2015-11-06)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.08.013

文献标识码：A

文章编号：1673-4130(2016)08-1046-03

作者简介：韦永琼，女，检验技师，主要从事临床血液学与检验的研究。