缺血修饰蛋白与急性脑梗死体积的临床研究

苏宏图　张春荣　石小晶　杨文军　王帅　李霜梅

066000 河北省秦皇岛市海港医院神经内科[苏宏图(通信作者)　张春荣　石小晶　杨文军　王帅　李霜梅]



缺血修饰蛋白与急性脑梗死体积的临床研究

苏宏图张春荣石小晶杨文军王帅李霜梅

066000 河北省秦皇岛市海港医院神经内科[苏宏图(通信作者)张春荣石小晶杨文军王帅李霜梅]

【摘要】目的探讨急性脑梗死患者缺血修饰蛋白(IMA)水平与脑梗死体积的关系。方法选择发病24h急性脑梗死患者116例，按照脑梗死体积分为4组，分别为0～5 cm3组(35例)；5～10 cm3组(32例)；10～15 cm3组(28例)；(15 cm3组(21例)；选取同期来本院体检的20例健康者为对照组。运用ACB 比色法来测定血清 IMA水平。结果0～5 cm3组、5～10 cm3组、10～15 cm3组、(15 cm3组缺血修饰蛋白水平存在显著差异(P<0.01)，急性脑梗死组血清IMA水平(除(15 cm3组)与脑梗死体积呈线性正相关(<0.01)。结论急性性脑梗死患者血清IMA水平均高于对照组，IMA可以作为脑组织缺血敏感的非特异性生化指标，并且急性脑梗死患者血清IMA水平随脑梗死体积增加而增高。可能作为辅助手段预测病情进展。

【关键词】缺血修饰蛋白脑梗死体积脑梗死相关性

【DOI】10.3969/j.issn.1007-0478.2016.02.017

缺血修饰蛋白(ischemia modified albumin，IMA)是美国学者Bar 于上世纪90年代发现的一种被降解修饰的人血清白蛋白(Human Serum Albumin，HAS)，IMA是在发生缺血/再灌注时由于自由基等破坏了血清白蛋白的氨基酸序列，使白蛋白与过渡金属的结合能力发生改变，即因缺血而产生与过渡金属如钴、铜和镍等结合能力发生改变的白蛋白[1]。其可以在急性缺血性事件的早期诊断中作为新的生化指标，美国食品和药物管理局(U.S. Food and Drug Administration ，FDA )将IMA批准为第一个心肌缺血诊断生化标志物[2-3]。目前，国内外对IMA在缺血性脑血管病领域的研究相对较少，但国外研究已表明血清IMA水平与急性脑梗死患者的脑梗死体积之间存在相关性，目前这方面研究较少，本研究将运用白蛋白结合钴试验(Albumin Cobalt Binding test，ACB 试验)并以比色法测定血清IMA 水平，以探讨发病24 h的急性脑梗死患者血清IMA水平与脑梗死体积的相关性，以判断血清IMA水平是否可以作为评价脑梗死病情程度的生化指标。

1资料与方法

1.1一般资料

选择2011年1月～2015年1月收治的发病24 h急性脑梗死患者116例，按照脑梗死体积分为3组，分别为0～5 cm3组(35例)，5～10 cm3组(32例)，10～15 cm3组(28例)，(15 cm3组(21例)。选同期来本院体检的20例健康者为对照组，所有入选者近2周内未服用任何药物。各组一般情况的构成(表1)。1.2入选标准：所有患者均符合1955年全国第四届全国脑血管会议修订的诊断标准，根据临床症状、体征及头颅CT、MRI 检查选入病例入组。各组患者在发病前均无特殊用药史。发病时间的计算：从患者最后尚正常的时间算起，出现脑卒中症状或体征的时间。脑梗死体积是按照头颅MRI的DWI像，按照长×宽×层面数/2(cm3)。

1.3排除标准：(1)严重肝肾功能衰竭者；(2)近期(半年内)有冠状动脉血栓性疾病者；(3)发病之前1个月有重大手术或创伤史者；(4)慢性感染性疾病者；(5)妊娠者。

1.4IMA水平检测

采用ACB比色法测定，取待测血清试样200 μL，加入0.1%氯化钴水溶液50 μ，混合后静置10 min；然后加入1.5 g/L 二巯苏糖醇水溶液50 μL，2 min后再加入0. 9%氯化钠溶液1.0 mL；利用分光光度计在470 nm处测定吸光度值，空白管除不加二巯苏糖醇外，其余步骤想通过，即可得出IMA水平且以吸光度为单位(U/mL)，IMA与反应显色强度呈正相关。即血清中白蛋白与钴离子结合后剩余的游离钴离子与有机显色物反应生成红褐色产物，在470 nm的波长下比色，其吸光度与钴离子水平呈正比。也就是说，ACB值越小，与钴离子结合能力越低，IMA水平越高。单位(U/ml)定义：每mL血清中的白蛋白在470 nm波长下吸附1ug的钴离子为1个单位。

表1　急性脑梗死组与对照组一般资料比较

1.5统计学处理

2结果

各组IMA水平比较(表2)。

表2　各组IMA水平比较

注：与对照组比较，▲P<0.01；与0～5 cm3组比较，▼P<0.01；与5～10 cm3组比较，△P<0.01；与 10～15 cm3组比较，*P<0.01。

急性脑梗死组血清IMA水平与脑梗死体积的相关分析(见表3)。

表3　发病24 h脑梗死血清IMA水平(U/mL)

0～5 cm3组、5～10 cm3组、10～15 cm3组，血清IMA水平与脑梗死体积呈正相关(P<0.01)；但>15 cm3组，血清IMA水平与脑梗死体积无明显相关(P>0.01)。

3讨论

1992年Bar-Or等[2]建立的ACB试验检测IMA水平[4]，且以吸光度为单位[2,5]，脑缺血患者血清中含有较多的修饰白蛋白(IMA)，加入同样水平的氯化钴溶液后由于IMA与Co2+结合的能力很低，使溶液中游离Co2+的水平较高；加入二巯苏糖醇，其可与游离钴发生颜色反应，用分光光度法测定其吸光度，即可推测IMA水平。IMA与反应显色强度呈正相关[6]。脑组织的缺血、低氧后造成的能量代谢障碍-兴奋性神经介质释放-钙离子过量内流-自由基反应-细胞死亡等缺血性连锁反应，而HAS易受羟基自由基的损害[7]，使N末端序列的2～4个氨基酸发生乙酰化或缺失1～2个氨基酸[8-9]，从而形成IMA。2006年Abboud等[10]首先进行了IMA水平与急性脑血管病的相关研究发现，脑梗死、脑出血患者IMA水平显著高于短暂性脑缺血发作(Transient Ischemic Attack，TIA)组，且脑梗死组患者24 h内IMA水平逐渐升高。同时，Abboud 还推测血清IMA水平与脑梗死患者病灶大小及神经功能缺损程度呈正相关。2011年国内唐晓斌等[11]也做了急性脑血管病24 h缺血修饰蛋白变化观察，结果提示急性脑梗死与急性脑出血患者在发病6、12 h的血清IMA水平存在显著差异，IMA可以作为缺血脑组织敏感的非特异性生化指标。2010年陈家强等[12]研究发现，所有急性脑梗死患者的梗死体积与IMA和IL-6水平有密切关系，IMA和IL-6水平能反映脑梗死体积，对临床评估缺血性脑卒中脑组织的损害程度有一定意义。本研究结果显示发病24 h急性脑梗死患者血清IMA水平与梗死体积呈正相关，IMA可作为一种评价急性脑梗死病情轻重的重要指标，能够客观反映患者病情轻重情况，从而为早期诊断、治疗提供依据。

有研究报道神经功能缺损程度与多种因素等有关，而且梗死病灶部位的不同，临床神经功能损害程度相差较多。对于神经纤维密集的部位，小的梗死灶可造成严重的神经功能损害，而在神经纤维比较稀疏的部位，大梗死灶可能产生相对比较轻的临床神经功能缺损。本研究的脑梗死体积的计算包括多发急性脑梗死，体积是每一处梗死体积之和，可能对实验结果产生影响，导致本研究>15 cm3组中的IMA水平与梗死体积无明显相关的可能。因此，关于IMA水平与脑梗死严重程度之间的关系比较复杂，还有待进一步的研究。

参考文献

[1]肖倩.缺血修饰白蛋白的研究进展和临床应用[J].实用中西医结合临床,2005,5(5):85-87.

[2]Bar-Or D,Lau E,Winkler JV.A novel assay for cobalt-albumin in binding and its potential as a marker for myocardial ischemia a preliminary report[J].Emerg Med，2000,19(4):3112-3150.

[3]Collinson PO,Gaze DC.Biomarkers of cardiovascular damage and dysfunction-an overview[J].Heart Lung Circ,2007,16(Suppl 3):S71-S82.

[4]Bar-Or D,Curt is G，Rao N,et al.Characterization of the Co2+and Ni2+binding amino-acid residues of the N terminus of human albumin.An in sight into the mechanism of a new assay for myocardial is chemia Eur[J]. Biochem,2001,268(1):42-47.

[5]Bhagavan NV,Lai EM,Rios PA,et al.Evaluation of human serum albumin Cobalt binding assay for the assessment of myocardial ischemia and myocardial infarction[J].Clin Chem,2003,49(4):581-585.

[6]易凯,李龙平,张华,等.缺血修饰白蛋白研究进展[J].检验医学教育,2007,14(4):37-40.

[7]Chan B,Dodsworth N,Woodrow J,et al.Site-specific N-terminal auto-degradation of human serum albumin[J].Eur J Biochem,1995,227(1/2):524-528.

[8]Abboud H,LabreucheJ,MeseguerE,Lavallee PC,et al.Ischemia-modified albumin in acute stroke[J].Cerebrovasc Dis,2007,23(2/3):216-220.

[9]唐晓斌,刘庆国,王英侠,等.急性脑血管病24小时内缺血修饰白蛋白变化观察[J].中国医药导报,2011,8(25):159-161.

[10]陈家强,龚道元,李炜煊,等.IMA、IL-6与缺血性脑卒中脑梗死体积的相关研究[J].医学检验与临床,2010,21(4):43-45.

(2015-10-19收稿)

【中图分类号】R743

【文献标识码】A

【文章编号】1007-0478(2016)02-0132-03