星状神经节阻滞对多器官功能障碍综合征家兔血浆SP和CGRP的影响*＊?

吴德丹，毛冬梅，张忠杰，姚　旌＊＊

(1.贵州医科大学研究生院，贵州贵阳　550004; 2.贵州医科大学附院疼痛科，贵州贵阳　550004)



星状神经节阻滞对多器官功能障碍综合征家兔血浆SP和CGRP的影响*＊?

吴德丹1，毛冬梅1，张忠杰2，姚旌2＊＊

(1.贵州医科大学研究生院，贵州贵阳550004; 2.贵州医科大学附院疼痛科，贵州贵阳550004)

［摘要］目的:观察星状神经节阻滞(SGB)对多器官功能障碍综合征(MODS)家兔血浆P物质(SP)和降钙素基因相关肽(CGRP)水平的影响。方法:成年健康家兔30只，分为MODS组、SGB组和对照组，每组10只; 3组家兔麻醉后分离右侧星状神经节，术后第8天MODS组和SGB组采用“二次打击”和腹腔注射内毒素制作家兔MODS模型，SGB组家兔注射内毒素1 h后立即行右侧SGB，对照组家兔仅腹腔注射等剂量生理盐水;分别于失血性休克前(T0)、注射LPS后12 h时(T1)、24 h时(T2)、36 h时(T3)及48 h时(T4)用放射免疫法检测血浆SP、CGRP含量。结果: MODS组和SGB组各时间点血浆SP含量较对照组增加(P＜0.05)，且MODS组较SGB组升高更明显(P＜0.05) ; MODS组和SGB组各时间点血浆CGRP含量较对照组增加(P＜0.05)，且MODS组较SGB组升高更明显(P＜0.05)。结论: MODS家兔血浆中SP、CGRP增加，SGB能调节SP、CGRP表达，提示SGB 对MODS有一定的积极意义。

［关键词］星状神经节;神经传导阻滞;多器官功能障碍; P物质;降钙素基因相关肽

＊＊通信作者E-mail: gyfyyaoj@163.com

网络出版时间: 2016－02－23网络出版地址: http: / /www.cnki.net/kcms/detail/52.5012.R.20160223.2007.030.html

多器官功能障碍综合征(MODS)是外科ICU的首位死因，其发病机制可能是抗炎和促炎反应失调，炎性介质P物质(SP)及降钙素基因相关肽(CGRP)是MODS重要和敏感的标志指标。星状神经节阻滞(SGB)能使植物神经系统、内分泌系统、免疫系统等保持稳定功能。本实验通过观察SGB对MODS家兔血浆SP及CGRP含量的影响，探讨SGB治疗MODS的可能机制。

1　材料与方法

1.1动物准备及分组

30只健康6月龄大耳白家兔由贵州医科大学实验动物中心提供，雌雄不限，体重(2.5±0.2) kg。所有家兔耳缘静脉注射3%戊巴比妥(1 mL/kg)麻醉后，仰卧固定，暴露右侧星状神经节，硬膜外导管剪去头端侧孔置于星状神经节处，另一端自颈前向后引出并固定。术中及术后应用抗生素预防感染。于术后第8天随机将30只家兔分为MODS组、SGB组和对照组，每组10只。MODS组根据“二次打击”学说［1－2］复制家兔失血性休克并内毒素诱发MODS模型: 3%戊巴比妥(1 mL/kg)耳缘静脉注射麻醉，分离右侧股动脉并插管，监测血压正常后，在15 min内快速抽血(肝素化后室温保存)至使家兔平均动脉压降至40 mmHg左右，维持60 min，随后回输全部血液(回输时间＞30 min) ;监测家兔血压正常平稳后，腹腔注射内毒素(LPS) (10 μg/kg)，诱发全身炎症反应综合征(SIRS)。SGB组10只家兔先按上述方法建立MODS模型，注射LPS后1 h时行右侧SGB，于留置导管推入0.25%布比卡因注射液0.5 mL，出现Horner综合征(SGB侧瞳孔缩小、结膜充血、眼球下陷、眼睑下垂等)为阻滞成功。对照组家兔仅腹腔注射生理盐水20 mL，1 h后自留置导管推入生理盐水0.5 mL。所有家兔处理完后均放回笼中自由饮水和进食。

1.2观察指标

观察3组家兔精神、饮食、活动、呼吸、心率、肛温等一般情况。MODS组和SGB组分别于失血性休克前(T0)、注射LPS后12 h(T1)、24 h(T2)、36 h (T3)及48 h(T4)时间点留取血浆，采用酶联免疫法检测血浆SP、CGRP含量;对照组于腹腔注射生理盐水之前(T0)、注射生理盐水后12 h(T1)、24 h (T2)、36 h(T3)及48 h(T4)时间点留取血浆，用酶联免疫法检测血浆SP、CGRP含量。标本留取完毕后，取3组家兔肝脏左叶、肺左下叶以及小肠组织作细胞形态检查。

1.3统计学方法

应用SPSS 22.0软件包进行数据处理，计量指标用均数±标准差(±s)表示，组间比较用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1一般情况

MODS组和SGB组家兔在注射LPS后24～48 h均有不同程度的精神萎靡、进食量减少、活动减少、呼吸浅快、心率增快、肛温升高或降低，少尿甚至无尿，MODS组较SGB组更明显，对照组家兔实验过程中一般情况较好。

2.2血浆SP

与T0比较，MODS组和SGB组在T1时点SP水平显著升高(P＜0.01)，T2～T4时点持续升高，对照组各时点SP水平变化无统计学意义(P＞0.05) ;与对照组比较，MODS组和SGB组在T1时点SP水平显著升高(P＜0.01)，MODS组较SGB组升高更明显(P＜0.05)。见表1。

2.3血浆CGRP

与T0比较，MODS组和SGB组在T1时点CGRP水平显著升高(P＜0.01)，T2～T4时点持续升高，对照组各时点CGRP水平变化无统计学意义(P＞0.05) ;与对照组比较，MODS组和SGB组在T1时点CGRP水平显著升高(P＜0.01)，MODS组较SGB组升高更明显(P＜0.05)。见表2。

2.4病理学检查

肉眼观察: MODS组和SGB组家兔肺组织均有不同程度体积变大，表面瘀斑、出血，肺切面实变;肝体积增大，表面有出血点;肠黏膜可见瘀斑、出血、溃疡形成等;其中肺组织病变较为严重。MODS组和SGB组比较，MODS组变化更明显。组织学切片: MODS组肺组织肺泡壁破坏严重，肺间质及肺泡腔有渗出和出血，大量粒细胞浸润，肺泡腔内透明膜形成;肝细胞明显水肿，肝血窦扩张，汇管区可见大量中性粒细胞及枯否氏细胞，部分肝细胞坏死。小肠黏膜上皮细胞变性、坏死、脱落，黏膜腺体萎缩，固有膜有中性粒细胞浸润。SGB组肺、肝、肠均有不同程度的以上病理变化，但较MODS组变化轻微，对照组肺、肝、肠为正常组织。

表1　3组家兔血浆SP水平(±s)Tab.1　Changes of plasma SP content of three groups

表1　3组家兔血浆SP水平(±s)Tab.1　Changes of plasma SP content of three groups

(1)与T0比，P＜0.01;(2)与对照组比，P＜0.01;(3)与SGB组比，P＜0.05

组别各时点血浆SP(ng/L) T0　T1　T2　T3　T4MODS组　181.49±6.43　 245.58±34.70(1) (2) (3)268.32±43.42(1) (2) (3)280.16±36.31(1) (2) (3)293.50±36.28(1) (2) (3)180.36±5.07　180.84±5.19 SGB组　184.33±4.12　 236.88±19.36(1) (2)　249.88±24.44(1) (2)　261.14±30.98(1) (2)　264.22±37.22(1) (2)对照组　179.76±6.69　 180.05±4.10　180.22±4.90

表2　3组家兔血浆CGRP水平(±s)Tab.2 Changes of plasma CGRP content of three groups

表2　3组家兔血浆CGRP水平(±s)Tab.2 Changes of plasma CGRP content of three groups

(1)与T0比，P＜0.01;(2)与对照组比，P＜0.01;(3)与SGB组比，P＜0.05

组别　　各时点血浆CGRP(ng/L) T0　T1　T2　T3　T4MODS组　29.95±2.11　 86.67±38.96(1) (2) (3)98.80±33.73(1) (2) (3)124.95±36.77(1) (2) (3)　113.10±38.94(1) (2) (3)1.76±2.10　32.31±2.12 SGB组　31.76±2.54　 70.14±19.55(1) (2)　81.76±19.34(1) (2)　82.35±17.10(1) (2)　82.96±18.76(1) (2)对照组　31.66±2.76　 32.10±2.31　31.47±2.26　3

3　讨论

星状神经节由颈下神经节和胸1神经节融合而成，属于全身交感神经系统的一部分。将局麻药注射至星状神经节周围的结缔组织，即为SGB。临床工作中，常应用SGB治疗头、面、颈及上肢的疼痛。本研究旨在探讨通过SGB对全身各系统的调节作用而达到治疗MODS的目的。首先，本实验观察SGB对MODS家兔一般情况的影响，结果显示SGB组较MODS组SIRS的症状较轻，一般情况较好，而对照组一般情况接近正常家兔，排除SGB置管及腹腔注射等操作对实验结果的干扰。从直观上表明SGB可以改善MODS的症状，对MODS起到一定的保护作用。再次，本实验还观察了各组家兔重要脏器的病理改变，结果显示MODS组重要脏器的病理变化符合MODS的诊断标准，且组织病理改变出现时间较早，程度较重，符合临床MODS的变化规律，说明本实验造模成功。而SGB组重要脏器的虽然也呈现不同程度变性坏死的病理改变，但总体变化程度较MODS组轻，故从病理层面说明SGB对MODS脏器起到保护作用。

MODS的发病机制极为复杂，目前普遍认可的观点是抗炎和促炎反应失调。严重创伤触发最初的炎性反应，机体产生大量的炎症介质、细胞因子形成“瀑布效应”，一旦这种全身炎症得不到控制，将推进MODS的进一步发展，导致死亡。SP及CGRP作为重要的致炎因子参与MODS的形成和发展。研究表明，SP可作为炎性因子参与急性胰腺炎引起的肺损伤［3］及肝损伤［4］，SP在肠道内毒素移位中有一定的促进作用［5］，并参与内毒素引起的发热［6］，参与急腹症、脑源性引起的MODS形成过程［7－8］，Dahiya P等［9］报道，在烧伤导致的多器官衰竭的疾病发展中，SP和其他炎性介质如TNF-α，IL-1β，IL-6，IL-2一起介导了器官功能进一步损伤。CGRP是目前已知最强的内源性血管舒张物质之一，CGRP与炎症细胞、免疫细胞、炎症介质等相互作用。实验表明，CGRP能够使IL-1β、IL-6、TNF-α释放增加，且呈时间－剂量依懒性，同时，这些炎症介质又可以促进CGRP的释放［10］。王宪等［11－12］关于CGRP的一系列研究表明，内毒素休克动物模型和败血症病人导致的MODS中，患者血浆中CGRP显著升高。本实验表明，多器官功能衰竭早期即有SP、CGRP释放增加，明显高于对照组(P＜0.01)，SGB组血浆SP、CGRP含量低于MODS组，提示SGB能够通过调节SP、CGRP的含量，抑制MODS的炎症反应及其可能导致的多器官功能进一步损害。SGB可抑制交感神经系统活性增高，恢复交感－迷走神经间的平衡，减轻应激反应，减少SP、CGRP的释放。SGB可通过增加免疫细胞活性、调节炎症因子含量等达到调节全身免疫系统的作用。SGB还可稳定细胞膜，对抗SP、CGRP引起的炎症反应。

综上，SGB能够调节血浆中SP、CGRP的含量，可能逆转MODS的炎性反应，为临床治疗MODS提供新的思路。

4　参考文献

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(2015－08－25收稿，2015－12－30修回)

中文编辑:戚璐;英文编辑:赵毅

Effects of Stellate Ganglion Block on the Plasma Contents of Substance P and Calcitonion Gene-Related Peptide in Rabit Model of Multiple Organ Dysfunction Syndrome

WU Dedan1，MAO Dongmei1，ZHANG Zhongjie2，YAO Jing2
(1.Graduate College，Guizhou Medical University，Guiyang 550004，Chian; 2.Department of Pain Management，Affiliated Hospital of Guizhou Medical University，Guiyang 550004，China)

［Abstract］Objective: To investigate the effects of stellate ganglion block (SGB) on plasma contents of substance P (SP) and calcitonion gene-related peptide (CGRP) in rabbits with multiple organ dysfunction syndrome (MODS).Methods: Thirty rabbits were divided into three groups: MODS model group，SGB treatment group and control group with 10 in each; the right stellate ganglion of three groups rabbits were separated after anesthesia，Second-Strike were adopted on MODS group and SGB group on 8D after operation，and endotoxin intraperitoneal injection was applied to produce rabbits MODS model; rabbits of SGB group were performed with right SGB right after 1 h of endotoxin injection，RIA was adopted to test plasma SP and CGRP content before hemorrhagic shock (TO)，12 h after LPS injection (T1)，24 h (T2)，36 h (T3) and 48 h (T4).Results: Plasma SP content increased at each time point in MODS and SGB groups compared with control group (P＜0.05)，the contents of plasma SP in MODS group increased significantly than SGB group(P＜0.05) ; plasma CGRP content increased at each time point in MODS and SGB groups compared with control group (P＜0.05).Conclusion: The content of SP and CGRP increased in rabbits plasma with MODS，the SGB could regulatebook=183,ebook=64expression of SP and CGRP，it is suggested that SGB may play an active role in treatment of MODS.［Key words］stellate ganglion block; nerve block; multiple organ dysfunction; P matters; calcitonion gene-related peptide

*［基金项目］贵州省科技支撑计划项目(S2011SP00203679449)

［中图分类号］R458

［文献标识码］A

［文章编号］1000-2707(2016) 02-0182-03