PCR检验法用于细菌检验的效果评价

王琦

【摘要】 目的 探讨分析PCR检验法对于细菌检验的效果， 为临床实践提供可靠依据。方法 86例阴道炎患者， 按照随机数表法分成对照组和试验组， 各43例。对照组患者的阴道分泌物接受细菌培养法， 试验组接受PCR检验， 对比两组患者的检查结果。结果 试验组的阳性检出率为86.0%， 明显高于对照组的67.4%， 差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 PCR检验法能明显提高阴道细菌的检验效果， 结果更可靠， 具有广泛推广的临床价值。

【关键词】 细菌检验；PCR检验；细菌培养法；阴道炎

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.10.069

在临床妇科的范畴内， 阴道炎作为一种发病缓慢的疾病， 不易被患者察觉与重视[1]。主要致病因素是阴道感染细菌， 主要临床症状是白带分泌异常、产生异味以及瘙痒， 严重时可能侵犯患者的盆腔与腹部， 甚至导致不孕或者异位妊娠， 因此， 对于阴道炎患者临床上应及时给予诊断与治疗[2]。诊断的方式主要是检查阴道分泌物， 能够有效直接的反应被检者的感染菌种、感染情况与病情发展。常用的检查方式为细菌培养法与PCR检验法。本文围绕这两种方法的检查效果开展研究， 取得了较为满意的结果， 现具体报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 随机选取本院2013年2月～2015年9月收治的86例阴道炎患者， 均对本研究知情， 且均处于育龄期。按照随机数表法分成对照组和试验组， 各43例。对照组年龄20～46岁， 平均年龄（30.6±6.1）岁；试验组年龄21～48岁， 平均年龄（31.5±5.9）岁。所有患者临床症状均表现为白带分泌异常、出现异味、瘙痒等。两组患者年龄、病程等一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 纳入及排除标准

1. 2. 1 纳入标准 所有患者均符合中华妇科学会制定的阴道炎诊断标准， 经妇科检查、病理检查等一系列相关检查后确诊为阴道炎。

1. 2. 2 排除标准 哺乳期与妊娠期妇女， 最近一次同房在3 d之内， 处于例假期间， 严重心、肝、肾器官功能不全的患者以及半月内接受过抗菌治疗的患者。

1. 3 方法

1. 3. 1 对照组 用棉签蘸取患者阴道穹窿处的分泌物， 保存于生理盐水中， 对照组患者的阴道分泌物接受细菌培养法， 从生理盐水中取出患者的阴道分泌物， 置于培养基内， 在CO2恒温培养箱中的培养。2 d后， 在培养基中选出菌群中呈光滑灰色半透明雨滴状的菌落， 送于检验科检验。

1. 3. 2 试验组 用棉签蘸取患者阴道穹窿处的分泌物， 保存于生理盐水中， 试验组患者的阴道分泌物接受PCR检验法， 具体方法如下：离心含分泌物的生理盐水， 转速为1200 r/min， 时长15 min。离心后， 取上清液往其中添加组织裂解液， 水浴15 min， 温度为60℃。随后再离心， 转速为1200 r/min， 时长10 min。取离心后的上清液加入PCR试剂进行DNA模板的扩增， 同时设置空白对照组， 即不含有DNA模板， 其他条件相同， 加入双蒸馏水、引物、缓冲液、模板。均置于PCR仪中。

1. 4 观察指标 对比记录两组患者细菌培养结果中菌类数。

1. 5 评价标准[3] 满足以下条件即可视为阳性：①边缘整齐， 有≤1 mm的条带；②条带符合期望的碱基， 若在这范围之外， 则作为人工假象处理， 不计数；③背景没有出现SMEARS与引物二聚体。

1. 6 统计学方法 采用SPSS17.0统计学软件对数据进行统计分析。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验；计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

两组患者在经细菌检验后， 试验组患者阳性37例， 检出率为86.0%， 包括5例肠球菌， 23例戛纳杆菌， 9例棒状杆菌；对照组患者阳性29例， 检出率为67.4%， 包括5例肠球菌， 18例戛纳杆菌， 6例棒状杆菌。试验组的阳性检出率明显高于对照组， 差异具有统计学意义（P<0.05）。见表1。

3 讨论

随着现代生活节奏的加快、妇女不良的生活习惯等个人因素普遍化， 阴道炎等妇科疾病的发病率逐年上升。阴道炎因病程发展缓慢、症状普通， 易被育龄期妇女忽视， 但随着发展的严重化， 可导致患者的盆腔与腹部遭受感染， 甚至出现异位妊娠与不孕的情况。临床上常对阴道分泌物进行检验来诊断此病， 常以白带来间接反应妇女的阴道健康状况， 当白带分泌出现异常时应到医院进行检查， 防止可能存在的疾病恶化， 从而影响到日常的生活质量。

阴道炎的主要致病因素是菌群平衡被打乱， 在健康的状态下， 各菌群相互制约， 分泌的各种物质能够得到一个平衡状态， 从而共同维护阴道环境。若这一平衡状态被打破， 大量杆菌死亡， 致病菌大量繁殖， 导致阴道上皮细胞死亡， 失去原有的保护屏障[4]。诊断阴道炎的关键在于菌群的检验， 只有高准确率才能对患者的病情做出准确有效的判断。常用的临床检验方法主要为细菌培养法与PCR检验法。PCR检验的主要原理是在体外经体外酶对细菌DNA进行复制， 快速简便， 灵敏特异。细菌培养法对培养的条件较为苛刻， 而具有和细菌培养法相同结果的PCR检验， 操作条件较为简便， 且检测结果更有效， 阳性检出率较高， 提高了阴道炎诊断的效率， 为患者下一步治疗提供了方便。本文研究结果显示， 两组患者在经细菌检验后， 试验组患者阳性37例， 检出率为86.0%， 对照组患者阳性29例， 检出率为67.4%， 试验组的阳性检出率明显高于对照组， 差异具有统计学意义（P<0.05）。与王一叶[5]学者研究结果一致。

综上所述， PCR检验法能明显提高阴道细菌检验的效果， 结果更可靠， 具有广泛推广的临床价值。

参考文献

[1] 欧志方.三种不同检验方法用于阴道细菌检验的比较分析.中外医疗， 2013， 32（7）：171-172.

[2] 姚虹， 吕治， 阎东辉.实时荧光定量PCR检测阴道加德纳菌的方法及其临床应用.中国医刊， 2013， 48（11）：70-72.

[3] 乐杰.妇产科学.北京：人民卫生出版社， 2008：241.

[4] 张洁.阴道分泌物常规检验的临床探析.中外医学研究， 2014， 12（3）：65-66.

[5] 王一叶.比较PCR 检验法和细菌培养法用于阴道细菌检验的效果.中外医疗， 2013， 32（24）：192-193.

[收稿日期：2015-11-16]