抗凝剂对C反应蛋白检测结果的影响研究

方　伟

(首都医科大学附属北京地坛医院检验科，北京 100015)



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抗凝剂对C反应蛋白检测结果的影响研究

方伟

(首都医科大学附属北京地坛医院检验科，北京 100015)

摘要:目的分析抗凝剂种类对C反应蛋白(CRP)检测结果的影响。方法随机选取门诊和住院患者120例，同时采集患者肝素和乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝标本，在相同条件下，采用迈瑞BC-5390分析仪进行两种全血标本CRP浓度检测，比较检测结果间的差异。结果两种抗凝标本CRP检测结果具有相关性，但肝素抗凝标本对CRP低、中、高值标本的检测结果均低于EDTA-K2抗凝标本(P<0.05)。结论肝素抗凝标本不适用于迈瑞BC-5390分析仪CRP检测。

关键词:乙二胺四乙酸盐；肝素；C反应蛋白

C反应蛋白(CRP)属于急性时相反应蛋白之一，对微生物具有直接及辅助清除作用，是用于细菌感染早期诊断和鉴别诊断的主要指标[1]。在临床检验中抗凝剂的使用非常普遍，且不同检测系统及项目都有与之相应的抗凝剂，而不同抗凝剂对检测项目的影响不同[2]。CRP检测标本多以肝素作为抗凝剂，血液学检测标本则多以乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)作为抗凝剂。在日常工作中，经常出现1份标本加做项目和抗凝剂使用混淆的情况。本研究以肝素和EDTA-K2抗凝标本分别进行CRP检测，并对检测结果进行比较分析，旨在探讨两种抗凝剂抗凝标本对CRP检测结果的影响，评价不同抗凝标本能否通用。

1材料与方法

1.1标本来源随机选取2015年5～6月门诊和住院患者120例，男58例，女62例，均采集晨起空腹静脉血标本，分别采用肝素及EDTA-K2抗凝。

1.2方法标本采集后2 h内，采用迈瑞BC-5390分析仪及配套试剂对采集的肝素及EDTA-K2抗凝全血标本进行CRP检测，严格按仪器、试剂盒说明书操作。参照美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP9-A2文件的要求，在室内质控在控、仪器正常运转和试剂在效期内的条件下进行检测[3]。每份标本平行检测3次，计算均值。本研究采用的迈瑞BC-5390分析仪参加卫计委临床检验中心CRP检测室间质评，结果准确可靠，可以接受。

2结果

120例标本中，检出CRP异常值标本78例，正常值标本42例。按CRP浓度分为低、中、高值标本。统计学分析结果显示，在CRP各浓度范围内，与EDTA-K2抗凝标本相比，肝素抗凝标本CRP检测结果降低，且比较差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。以肝素抗凝标本结果为Y轴，以EDTA-K2抗凝标本检测结果为X轴，绘制回归直线，并计算回归方程。直线回归方程及相关性，见图1～3。

表1　　不同抗凝标本CRP检测结果比较

图1　　　低值标本CRP检测结果相关性(Y=0.926 8X-

图2　　　中值标本CRP检测结果相关性(Y=0.999 8X-

图3　　　高值标本CRP检测结果相关性(Y=0.990 5X-

3讨论

对于CRP低值标本而言，肝素与EDTA-K2抗凝标本检测结果偏倚较大，随着CRP浓度增大，偏倚逐渐降低[4-5]。这是因为低浓度时，检测结果较小，很小的差异即可导致较大的偏倚，随着浓度增大，数值增大，差异所占比例相对降低，偏倚降低。本研究结果显示，在其他条件相同的情况下，同一患者肝素抗凝全血标本CRP检测结果低于EDTA-K2抗凝标本检测结果，呈负偏倚倾向，表明采用迈瑞BC-5390分析仪进行肝素抗凝全血标本CRP检测可能存在系统误差。临床通常以CRP<8 mg/L作为正常参考值。在低浓度范围，肝素抗凝全血标本易出现CRP假阴性结果[6-7]。虽然两种抗凝标本CRP检测结果相关性良好，但为了保证结果可靠性，笔者不建议在采用迈瑞BC-5390分析仪进行肝素抗凝全血标本CRP检测。

迈瑞BC-5390分析仪采用胶乳试剂免疫比浊法的原理检测CRP，通过红细胞压积、白细胞压积和血小板压积的实测值校正CRP检测结果[计算公式为：CRP=CRP定标曲线计算值/(1-BCT%)，BCT为白细胞压积、红细胞压积、血小板压积之和]，以确保全血与血清标本CRP检测结果一致，提高了结果准确性，优于床旁检验(POCT)分析仪。

进行血常规检测时，不同抗凝剂对白细胞计数结果几乎无影响，对红细胞压积检测结果也影响较小[8-9]。目前血常规检测广泛使用的抗凝剂是国际血液学标准化学会(ICSH)推荐的EDTA-K2。EDTA-K2可有效结合血液中的钙离子，通过膜离子通道进入血小板内[10-11]。ETDA-K2对钙离子的螯合作用强于枸橼酸钠，能更好地防止血小板受各种因素影响而发生的凝集，对血小板计数影响较小，有较好的稳定性[12-13]。此外，EDTA-K2血细胞有很好的保护作用[14]。因此，采用迈瑞BC-5390分析仪检测EDTA-K2抗凝全血标本CRP水平，结果更加准确。肝素主要通过抑制凝血活酶与凝血酶的形成[15]，同时激活纤溶酶而发挥抗凝作用。肝素可引起血小板聚集及肿胀，肝素过量可破坏血小板，对血小板检测结果影响较大[16-17]。因此，采用校正公式进行计算时，肝素抗凝全血标本CRP检测结果低于EDTA-K2抗凝标本检测结果，出现系统误差和假阴性结果。

本研究证实，迈瑞BC-5390分析仪对不同抗凝剂抗凝标本的CRP检测结果有所差异。因此，在开展新项目、使用新仪器时，应注意抗凝剂的选择，避免因仪器和方法学的改变而用错抗凝剂。护士在采集外周血标本时，应根据检验项目使用正确的抗凝管，做好分析前质量控制工作。在具体工作中，更应严格根据检测系统的要求使用相应的抗凝标本，不能交叉使用或者一管多用，以保证检测结果的准确性。

综上所述，EDTA-K2与肝素的抗凝机制不同，对血细胞的影响不同，导致迈瑞BC-5390分析仪对不同抗凝剂抗凝标本的CRP检测结果存在差异。采用肝素抗凝全血标本对迈瑞BC-5390分析仪CRP检测结果影响较大。不同的仪器、方法学、检测项目应根据各自的要求使用相应的抗凝剂，不能随意更换抗凝剂种类，以保证检测结果的准确性。

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(收稿日期：2015-12-13)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.06.052

文献标识码：B

文章编号：1673-4130(2016)06-0829-03