同型半胱氨酸及C677T基因多态性与妊娠期糖尿病关系分析*1

程立子，王冬娥，叶贵诚，袁春雷，彭建明

(广东省中山市博爱医院：1.生殖中心；2.检验中心，广东中山 528403)



·论著·

同型半胱氨酸及C677T基因多态性与妊娠期糖尿病关系分析*1

程立子1，王冬娥2，叶贵诚2，袁春雷2，彭建明2

(广东省中山市博爱医院：1.生殖中心；2.检验中心，广东中山 528403)

摘要:目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)及亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T位点多态性与妊娠期糖尿病(GDM)的相关性。方法以91例GDM孕妇为GDM组，123例正常妊娠孕妇为对照组，检测MTHFR C677T基因多态性及血清Hcy、血糖水平。结果GDM组Hcy水平高于对照组，Hcy水平与空腹血糖水平呈正相关(P<0.05)。GDM组与对照组MTHFR C677T多态性基因CC、CT、TT分布频率比较差异有统计学意义(P<0.05)。GDM组TT型基因携带者Hcy水平高于CC型基因携带者(P<0.05)。结论Hcy与GDM的发生、发展密切相关。MTHFR C677T基因多态性可能通过影响Hcy水平而影响GDM的发生、发展。

关键词:同型半胱氨酸；亚甲基四氢叶酸还原酶；基因多态性；妊娠期糖尿病

妊娠期糖尿病(GDM)是指在妊娠期间首次发现或发生的糖代谢紊乱，是妊娠期常见的并发症，严重影响胎儿发育和母亲健康，其病因尚不明确。有研究显示GDM患者同型半胱氨酸(Hcy)水平高于正常妊娠者，提示Hcy可能与GDM发生、发展有关，但尚存较大争议[1]。Hcy浓度除受营养因素影响外，还受遗传因素的影响。亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)是调节叶酸代谢的关键酶，C677T是其常见的突变位点，基因多态性改变可降低酶活性而导致Hcy水平升高。C677T多态性改变是否可增加GDM发病风险，暂未见报道。本研究分析了血清Hcy水平及MTHFR C677T基因型分布情况，探讨了其与GDM的关系，旨在为GDM的防治提供依据。

1资料与方法

1.1一般资料选择2013年于广东省中山市博爱医院接受产检的孕妇214例，孕24～28周，排除妊娠前糖尿病、高血压、肝肾疾病等病史。GDM诊断参照国际糖尿病与妊娠关系研究协会2011年发布的相关标准：空腹血糖5.1 mmol/L，服用75 g葡萄糖后1 h血糖10.0 mmol/L，2 h血糖8.5 mmol/L，符合任意一项即诊断为GDM。214例孕妇分为GDM组91例，年龄(28.59±4.50)岁，正常妊娠孕妇(对照组)123例，年龄(28.15±4.09)岁。

1.2方法

1.2.1基因检测采用棉拭子采集受检者口腔黏膜上皮细胞，DNA提取采用硅胶吸附法，基因多态性检测采用荧光定量聚合酶链反应，仪器及试剂购自美国ABI公司。

1.2.2Hcy及血糖检测受试对象禁食12 h后次晨空腹采集静脉血2 mL用于检测血清Hcy和空腹血糖；服用75 g葡萄糖后，分别于1、2 h采集静脉血检测血糖水平；所有检测在抽血后1 h内完成。检测仪器采用德国西门子公司ADVIA2400全自动生化分析仪。Hcy检测采用酶循环法，试剂购自浙江伊利康公司。血糖检测采用己糖激酶法，试剂购自上海科华公司。

2结果

2.1GDM组与对照组Hcy水平比较GDM组、对照组Hcy水平分别为(8.93±1.54)、(4.35±1.64)μmol/L，GDM组Hcy水平高于对照组(t=7.244，P<0.05)

2.2Hcy与空腹血糖相关性分析Hcy与空腹血糖呈正相关，相关系数为0.488(P<0.05)。

2.3MTHFR C677T基因频率及等位基因频率分布比较两组间基因型频率比较差异有统计学意义(P<0.05)，等位基因频率比较差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

表1　　MTHFR C677T基因频率及等位基因

-：表示无数据。

2.4不同基因型患者Hcy水平比较TT型基因携带者Hcy水平为(9.69±0.94)μmol/L，高于CC型基因携带者(8.69±1.51)μmol/L，t=2.733，P<0.05；CT型基因携带者Hcy水平为(9.10±1.67)μmol/L，与CC型基因携带者比较差异无统计学意义(t=1.089，P>0.05)。

3讨论

3.1Hcy与GDM相关性Hcy是蛋氨酸代谢的中间产物，在体内主要有3种代谢途径。(1)再甲基化途径：Hcy接受5-甲基四氢叶酸提供的甲基，重新合成蛋氨酸，该过程需叶酸和维生素B12的辅助。(2)转硫化途径：Hcy在维生素B6辅助下，转化为半胱氨酸，最终形成丙酮酸、硫酸和水。(3)细胞内Hcy释放到细胞外：细胞内蛋氨酸水平过高时，Hcy可直接释放到血液循环中。

过往研究表明，Hcy可能与GDM的发病有关，但结论仍颇有争议。Aroni等[2]发现，糖尿病患者Hcy水平明显升高；孙亚惠[3]的研究证实，GDM患者Hcy水平明显高于正常妊娠者。本研究结果显示，GDM患者Hcy水平高于正常妊娠者，且Hcy水平与空腹血糖水平呈正相关(P<0.05)，与上述研究结果相符，说明血清Hcy水平与GDM关系密切，Hcy可作为GDM病情监测的指标，反映血糖控制情况。也有学者持不同观点。黄翠波[4]的研究显示，GDM患者Hcy水平与正常妊娠者比较差异无统计学意义(P>0.05)。各研究结论不一致，可能与样本数量、环境和遗传因素等有关，尚待进一步证实。

GDM患者Hcy水平升高的原因尚不明确，可能为：(1)GDM患者血糖升高，引起过度排尿，使得叶酸、维生素B12和维生素B6等排泄增多，影响Hcy代谢，Hcy在体内蓄积；(2)妊娠期母体和胎盘分泌抗胰岛素激素增加，胰岛素抵抗引起Hcy水平升高，而Hcy水平升高又通过抑制B细胞分泌胰岛素而导致血糖水平升高。两者互为因果，互相影响，因此Hcy水平升高可能是促进GDM发生、发展的病理基础[5-6]。Hcy水平升高可导致妊娠高血压、神经管畸形、唐氏综合征等妊娠相关疾病发病率增加[7]。补充叶酸是降低Hcy水平的有效方法[8]。因此，GDM患者除应及早进行血糖干预外，还应补充叶酸以降低Hcy水平，避免不良妊娠结局的发生。

3.2C677T基因多态性与Hcy及GDM相关性Hcy水平主要受营养和遗传两方面因素的影响。MTHFR基因突变引起的基因缺陷或酶活性降低是导致Hcy升高的重要原因[9]。MTHFR是参与Hcy代谢的关键酶，可催化5，10-亚甲基四氢叶酸转化为5-甲基四氢叶酸，后者可促进Hcy转化为蛋氨酸。MTHFR基因有多种突变类型，以C677位点突变最为多见。James等[10]以分娩过唐氏综合征患儿的女性和50例未生育过唐氏综合征患儿的女性为研究对象进行了研究，结果显示C677基因CT杂合型突变可使酶活性下降35%，TT纯合型突变更可使酶活性下降70%。酶活性降低可导致Hcy向蛋氨酸转化受阻，使Hcy在体内蓄积而升高[11]。本研究发现，GDM患者与正常妊娠者C677T基因型分布差异有统计学意义(P<0.05)，提示C677T多态性可能是GDM遗传危险因素。进一步分析显示，TT型基因携带者Hcy水平明显高于CC型基因携带者(P<0.05)，证实基因多态性改变可显著影响Hcy水平，MTHFR C677T基因多态性可通过影响血清Hcy水平而与GDM相关。

综上所述，Hcy与GDM密切相关，MTHFR C677T基因多态性可能通过影响Hcy水平而影响GDM的发生、发展。因此，检测MTHFR C677T基因多态性有助于早期个性化干预Hcy水平，进而干预GDM的病程进展。

参考文献

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[3]孙亚惠．妊娠期糖尿病患者同型半胱氨酸水平与脂联素水平的关系[J]．中国妇产科临床杂志，2014，15(3)：247-248．

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Association between homocystine and C677T polymorphism with gestational diabetes mellitus*1

ChengLizi1，WangDonge2，YeGuicheng2，YuanChunlei2，PengJianming2

(1.ReproductiveMedicalCenter;2.DepartmentofMedicalLaboratory，Bo′aiHospital，Zhongshan，Guangdong528403，China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the relationship between homocystine (Hcy)，methylenetetra hydrofolate reductase(MTHFR) C677T and gestational diabetes mellitus (GDM).MethodsA total of 91 GDM cases(GDM group) and 123 cases with normal pregnancy(control group) were detected for the C677T polymorphism of MTHFR and serum levels of Hcy and glucose.ResultsSerum Hcy level in GDM group was remarkable higher than that of control group(P<0.05).Hcy level was positively correlated with fasting plasma glucose(P<0.05).The genotype frequencies(CC，CT，TT) of MTHFR C677T in GDM group and control group were with significantly difference(P<0.05).Hcy was significantly higher in women with C677T TT genotype than those with CC genotype(P<0.05) .ConclusionHcy could be related to GDM.The mutation of MTHFR might affect serum Hcy level,and be involved in the occurrence and development of GDM.

Key words:homocystine;methylenetetra hydrofolate reductase;polymorphism;gestational diabetes mellitus

(收稿日期：2015-12-28)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.06.007

文献标识码：A

文章编号：1673-4130(2016)06-0736-02

基金项目：广东省中山市科技计划资助项目(20102A131)。

作者简介：程立子，女，主管技师，主要从事辅助生殖及生殖医学实验研究。