温州地区767例腹泻患儿A群轮状病毒感染分析

陈　韩　　李小龙　　王薇薇　　郑文静　　王金果　　余方友▲.温州医科大学附属第一医院检验科，浙江温州　35000；.浙江省温州市人民医院检验科，浙江温州　35000



温州地区767例腹泻患儿A群轮状病毒感染分析

陈韩1李小龙1王薇薇1郑文静2王金果1余方友1▲
1.温州医科大学附属第一医院检验科，浙江温州325000；2.浙江省温州市人民医院检验科，浙江温州325000

[摘要]目的分析浙江温州地区腹泻患儿A群轮状病毒感染情况。方法收集2013年9月～2014年9月门诊及住院767例腹泻患儿粪便标本，采用胶体金免疫层析法检测，检测结果应用SPSS 19.0统计软件进行统计分析。结果767例腹泻患儿中，有156例检出轮状病毒阳性，阳性率为20.3％。其中，0～6个月、6个月～1岁、1～2岁、2～3岁、＞3岁患儿RV阳性率分别为11.1％、22.3％、35.4％、42.9％、5.6％，而1～2岁、2～3岁这两个年龄段的腹泻患儿RV感染阳性率明显高于其他年龄段的患儿，差异有统计学意义（P＜0.01）；男性患儿与女性患儿间的阳性率分别为18.6％和22.8％，差异无统计学意义（χ2=2.056，P＞0.05）；秋冬季10月、11月、12月以及次年的1月是RV感染高峰，其阳性率分别为39.2％、43.3％、43.1％、32.1％，不同月份之间阳性率差异有统计学意义（χ2=107.439，P＜0.01）。结论1～3岁儿童是A群轮状病毒感染高发年龄段群体，每年秋冬季节高发。

[关键词]A群轮状病毒（RV）；胶体金免疫层析法；腹泻；感染；粪便标本

轮状病毒（rotavirus，RV）是一种双链核糖核酸病毒，属于呼肠孤病毒科，轮状病毒属，根据VP6抗原性的不同，将RV划分为A～G 7个群，但只有A、B、C 这3个群能感染人类，B群和成人腹泻有关，C群较少见，其中A群最为常见，在RV感染中高达90％以上，常导致婴幼儿重症腹泻，因此人们关注的重点仍是A群轮状病毒[1]。纵观全球2008年间，在5岁以下的患儿中，由于感染轮状病毒引起腹泻而导致死亡的共计453 000例，其中，有些国家如埃塞俄比亚、印度和尼日利亚等国死亡人数中超过半数是由于感染轮状病毒[2]。我国也是轮状病毒危害严重的国家，资料显示每年轮状病毒感染的患儿约1700万，死亡近4万例，占5岁以下腹泻住院婴幼儿的31. 6％～52.9％[3]。为了解浙江温州地区腹泻患儿RV感染的流行情况，对本院2013年9月～2014年9月收集的767例腹泻患儿的粪便标本进行RV检测，现报道如下。

1　资料与方法

1.1临床资料

收集2013年9月～2014年9月从温州医科大学附属第一医院收治的767例腹泻患儿粪便标本，其中男442例,女325例，男女性别比1.36∶1，所有患儿中0～6个月271例（35.3％），6个月～1岁309例（40.3％），1～2岁130例（16.9％），2～3岁21例（2.7％），＞3岁36例（4.7％）。收集腹泻患儿新鲜粪便标本于干净容器中，1 h内完成检测并记录结果。

1.2试剂与仪器

本法采用免疫层析双抗体夹心法，胶体金免疫层析法检测采用北京万泰生物药业股份有限公司提供的胶体金A组轮状病毒检测试剂盒。严格按照说明书进行实验操作及结果判定。

1.3检测方法

取一勺新鲜粪便标本（约100 g），放入装有相应稀释液的滴管中，振荡混匀并静置1～2 min。如果标本中含较大颗粒，5 min/3000r离心，取上清液备用。在加样孔垂直滴加2～3滴标本，室温平置，5～10 min内判定结果。

1.4统计学处理

采用SPSS19.0统计学软件进行统计分析，两组计数资料以率（％）表示，率的比较采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1腹泻患儿年龄构成

以0～6个月、6个月～1岁和1～2岁为主，分别占总数35.3％（271/767）、40.3％（309/767）和16.9％（130/ 767）。结果表明，不同年龄段之间的腹泻率差异有统计学意义（χ2=44.717，P＜0.01），经χ2检验，1～2岁、2～3岁这两个年龄段的腹泻患儿轮状病毒感染阳性率明显高于其他年龄段的患儿，差异有统计学意义（P＜0.01），不同年龄组中，2～3岁RV阳性率最高，为42.9％，而＞3岁最低，为5.6％，见表1。

表1　不同年龄组患儿轮状病毒检测结果

2.2不同性别腹泻患儿病毒检出率

结果显示，男性患儿与女性患儿间的阳性率差异无统计学意义（χ2=2.056，P＞0.05），见表2。

表2　不同性别患儿轮状病毒检测结果

2.3不同月份腹泻患儿A群轮状病毒感染情况

A群轮状病毒阳性检出率高峰集中在每年秋冬季10月、11月、12月以及次年的1月，分别为39.2％、43.3％、43.1％、32.1％，其中每年11月份最高，其次为2月、3月及4月，阳性率较低的月份为5～9月，经χ2检验，不同月份RV感染阳性率差异有统计学意义（χ2= 107.439，P＜0.01），见图1。

图1　2013～2014年温州地区A群轮状病毒季节分布

3　讨论

腹泻病（diarrhea disease）是一类多病因临床综合征，可导致婴幼儿营养不良、发育迟缓，严重者可致死。有研究表明，腹泻病主要与病毒、细菌感染有关，其中，轮状病毒是引起婴幼儿腹泻的主要病原体之一，且各个地区发病年龄和感染状况均不同。

1973年，轮状病毒是由澳大利亚学者Ruth Bishop等首先发现的，形似车轮状而得名[4]，其致病机制主要是由于RV进入人体后，可在小肠上部2/3的绒毛细胞质中进行RNA的复制及结构和非结构蛋白的合成，并产生肠毒素，使绒毛细胞发生空泡变性和坏死，并可伴随坏死脱落的细胞随粪便排出体外，绒毛细胞被大量破坏后，导致水分吸收障碍，会引起渗透性急性腹泻，集体流失水分及电解质，严重者可出现酸中毒、脱水和休克等临床症状[5]，近年也有研究提示，轮状病毒非结构蛋白NSP4可能影响小肠绒毛细胞骨架蛋白的分布状况以及肌动蛋白和微管素细胞骨架等方面的改变，绒毛缺血和细胞旁通透性的改变同样在腹泻的发病进程中发挥作用。此外，肠神经系统（ENS）受到刺激也起到明显作用[6]。如果治疗不当或治疗不及时，后果严重者将导致患儿死亡。此外，轮状病毒感染除了造成肠道的损伤外，还引起全身多个其他系统如神经系统、呼吸系统的损伤。近年来，研究者们发现轮状病毒还有引起心肌损伤的趋势[7]。而且研究表明，患儿还存在一定程度的体液免疫功能紊乱[8]，导致患儿免疫功能方面缺陷。因此，RV已慢慢成为全世界医学界研究的重点，及时准确的RV快速检测和对症治疗，对临床具有重要意义。

本研究结果显示，腹泻患儿主要以0～2岁婴幼儿为主，而1～2岁、2～3岁这两个年龄段的腹泻患儿RV感染阳性率则明显高于其他年龄段的患儿，这可能与患儿肠道免疫功能发育尚不完善、缺乏相应抗体、过早断乳以及患儿肠黏膜屏障功能低、抵御病毒入侵能力不足有关[9]。3岁以后RV感染阳性率大幅度下降，其可能原因：一是幼儿免疫系统随着年龄增长而逐渐完善；二是抵抗力慢慢增强；三是自然感染后血清和肠道分泌的特异性免疫球蛋白起到预防作用[10]；四是卫生意识增强，因此阳性率相对较低。而0～6个月龄患儿常为母乳喂养，母乳中的脂肪小球膜表面亲脂性糖蛋白乳凝集素（lactadherin），是母乳中与RV交联最强和抗病毒特异性最高的成分，其与分泌性IgA起到竞争性抑制RV结合到宿主小肠黏膜上的作用，避免细胞损伤，有效预防和缓解病情[11]。因此，6个月龄内患儿对RV感染有一定免疫力，一般不易感染，即使感染，症状也较轻微[12]。

767例腹泻患儿中，A群轮状病毒检测阳性率为20.3％，低于潘以韵等[13]报道的2007年上海市部分地区儿童轮状病毒感染率（42.5％），与陈平等[14]报道的浙江省急性腹泻患儿中RV阳性率（25.52％）接近，原因可能在于随着社会进步，人们对轮状病毒的认知逐渐加深、在生活中提前预防以及疫苗的使用等。本研究中男女患儿阳性率分别为18.6％和22.8％，两者阳性率比较差异无统计学意义（P＞0.05），与国内报道一致[10-15]，说明RV感染在性别上并无显著性差异。

在温带地区，轮状病毒感染症主要发生于冬季，但是在热带地区全年都会发生，但有明显的季节性，20℃左右气温较适宜。虽然各个国家和地区流行季节稍有不同，但总体上以每年秋冬季10月、11月、12月以及次年的1月高发[16]，说明RV和温度及湿度有明显关系[17]。夏季发病最少，夏秋交接和秋冬交接时期尤其要注意，早晚气温变化较大，而婴幼儿抵抗力较弱，容易被病毒入侵。本研究结果显示，温州地区腹泻患儿轮状病毒感染高峰期为秋冬季，与文献报道一致[18]。

综上所述，A群轮状病毒主要通过粪-口途径传播[19]，具有明显的流行季节性，目前临床上对RV感染并无特效药，治疗以对症为主，关键在于预防，首先，最好实行母乳喂养；其次，应注意个人卫生、食品卫生和饮水卫生，培养健康的生活习惯；再次，隔离住院患儿，加强医疗器械等物品的消毒；最后，免疫接种是有效的预防手段，减毒活疫苗可有效地减少或减轻腹泻等症状，降低发病率[20，21]，但是疫苗也有增加肠套叠的风险[22]，因此，我们应该积极研究出能够防治轮状病毒感染的新方法。

综上所述，本文回顾性研究温州地区轮状病毒感染的致病情况及流行病学特点，为临床诊断提供初步依据。因此，秋冬季节，对有腹泻症状、粪便呈蛋花汤样或稀水样便，尤其是1～3岁的婴幼儿，应开展A群轮状病毒常规检查，以便早期发现，正确治疗，避免盲目使用抗生素，从而有效降低患儿死亡率。

[参考文献]

[1] Dennehy PH. Rotavirus vaccines:An update[J]. Vaccine，2007，25（16）：3137-3141.

[2] Tate JE，Burton AH，Boschi-Pinto C，et al. 2008 estimate of worldwide rotavirus -associated mortality in children younger than 5 years before the introduction of universal rotavirus vaccination programmes：A systematic review and meta-analysis[J]. Lancet Infectious Diseases，2012，12（2）：136-141.

[3]中国疾病预防控制中心.中国重点传染病和病媒生物监测报告[R].北京：中国疾病预防控制中心，2010.

[4] Bishop RF，Davidson GP，Holmes IH，et al. Virus particles in epithelial cells of duodenal mucosa from children with acute nonbacterial gastroenteritis[J]. Lancet，1973，2（7841）：1281-1283.

[5]施前锋，潘新娣，邵伟芳，等.金标免疫层析法检测儿童腹泻粪便标本轮状病毒及结果分析[J].中华全科医学，2014，12（6）：982-983.

[6]黄敏，黄英.轮状病毒腹泻研究进展[J].华西医学，2014，29（4）：780-782.

[7]梁琰，李瑞丽.小儿轮状病毒腹泻心肌酶谱改变的临床研究[J].中国实用医药，2013，（8）：114.

[8]陈治中，王琳，王晓蓓，等.人T细胞免疫球蛋白黏蛋白1基因及其融合蛋白真核表达载体的构建和生物信息学分析[J].中华肾脏病杂志，2011，27（8）：615-617.

[9]陈艳萍，魏涛，刘慧，等．婴幼儿轮状病毒性肠炎与母乳喂养的相关性研究[J].放射免疫学杂志，2005，18（6）：503-505．

[10]龙聪，祝成亮，杨章元，等．腹泻患儿轮状病毒感染分析[J]．中华医院感染学杂志，2014，24（7）：1771-1773.

[11]杨凌云，张光萍，刘秀珍，等．武汉市住院婴幼儿医院感染轮状病毒现状及危险因素分析[J]．中华医院感染学杂志，2012，22（9）：1796-1798.

[12]熊彪，汪培勤，饶福光，等.婴幼儿轮状病毒肠炎合并多器管损害临床分析[J].西部医学，2014，26（5）：561-563.

[13]潘以韵，黄瑛，朱启镕.上海部分地区小于5岁儿童轮状病毒及星状病毒性腹泻的临床分析[J].微生物与感染，2008，3（3）：138-142.

[14]陈平，许志良，崔大伟，等.浙江省急性腹泻患儿中肠道病毒检测分析研究[J].中国现代医生，2013，51（12）：109-113.

[15]傅金可，甄国东，王清平，等．绍兴西部地区急性腹泻患儿A群轮状病毒感染分析[J]．中国卫生检验杂志，2014，24（7）：970-971.

[16]任敏，李莉．病毒性腹泻研究概况[J]．现代预防医学，2009，36（1）：152-156.

[17]任端平．襄阳地区2011年夏季婴幼儿轮状病毒增多的原因分析[J]．国际检验医学杂志，2012，33（21）：2610-2611．

[18]魏孔福，刘新凤，刘东鹏，等.甘肃武威地区腹泻住院患儿A组轮状病毒和诺如病毒流行情况调查[J].中国病毒病杂志，2014，4（2）：137-140.

[19]黄卫彤，王宗杰，黄高飞，等. 6812例腹泻病婴幼儿感染轮状病毒和腺病毒检测结果分析[J].国际检验医学杂志，2014，35（12）：1629-1630.

[20]王文安.口服轮状病毒疫苗在防治婴幼儿腹泻中的效果研究[J].中国现代药物应用，2014，7（3）：68-69.

[21]张磊.口服轮状病毒疫苗在防治婴幼儿腹泻中的效果研究[J].世界最新医学信息文摘，2015，20（6）：68-69.

[22]任江萍，陈恩富.轮状病毒流行病学与疫苗研究进展[J].浙江预防医学，2015，27（8）：801-804.

Analysis of group A rotavirus infection among 767 children with diarrhea in Wenzhou

CHEN Han1LI Xiaolong1WANG Weiwei1ZHENG Wenjing2WANG Jin'guo1YU Fangyou1
1.Department of Laboratory Medicine, the First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University, Wenzhou 325000, China; 2.Department of Laboratory Medicine, Wenzhou People’s Hospital in Zhejiang Province, Wenzhou 325000, China

[Abstract]Objective To investigate the prevalence of group A rotavirus infection among children with diarrhea of Wenzhou Area in Zhejiang Province. Methods A total of 767 stool samples from outpatient and hospitalized children with diarrhea were collected from September 2013 to September 2014. Group A rotavirus was detected by GICA test. The software of SPSS 19.0 was used for statistical analysis. Results 156 cases（20.3％）were positive for group A rotavirus in all the 767 cases. The positive rates of group A rotavirus among 0 to 6 months, 6 months to 1 year, 1 to 2 years, 2 to 3 years and above 3 years old were 11.1％, 22.3％, 35.4％, 42.9％and 5.6％, respectively, the positive rates among the children of 1 to 2 and 2 to 3 years old were significantly higher than the other children（P＜0.01）. There was no significant difference in the positive rates of group A rotavirus between male（18.6％）and female（22.8％）（χ2=2.056, P＞0.05）. The positive rates of group A rotavirus among children during January, October, November and December were 32.1％, 39.2％, 43.3％and 43.1％, respectively, which were significantly difference among them（χ2=107.439, P＜0.01）. Conclusion 1 to 3 years old of children are much easier infected by group A rotavirus and especially during autumn and winter.

[Key words]Group A rotavirus（RV）; GICA test; Diarrhea; Infections; Stool samples

收稿日期：（2015-11-11）

[基金项目]国家自然科学基金资助项目（81271906）▲通讯作者

[中图分类号]R725.1

[文献标识码]B

[文章编号]1673-9701（2016）02-0115-04