葡萄糖酸钠对肉鸡屠宰性能及免疫性能的影响

■陈洪影　周长海　段晓翔　张丽明　冯　腾　廖先东　李　亮　于航宇　刘博学

（吉林大学动物科学学院，吉林长春130062）



葡萄糖酸钠对肉鸡屠宰性能及免疫性能的影响

■陈洪影周长海段晓翔张丽明冯腾廖先东李亮于航宇刘博学

（吉林大学动物科学学院，吉林长春130062）

摘要：试验通过将葡萄糖酸钠添加到肉鸡饲料中，研究其对AA+肉鸡屠宰性能以及免疫性能的影响。试验选取AA+肉鸡1日龄健康肉鸡240只，随机分为A、B、C、D四个处理组，每组60只，组内6个重复，每个重复10只。试验分为试验前期（0～21日龄）、试验后期（22～42日龄）2个阶段。其中对照组（A组）饲喂基础日粮，试验组B、C、D组在基础日粮的基础上分别添加0.1%、0.2%、0.3%的葡萄糖酸钠。结果表明：在日粮中添加葡萄糖酸钠，21日龄精肉率，对照组（A组）与D组相比，差异显著（P< 0.05），且D组高于A组；42日龄精肉率，对照组(A组)与试验C组相比，差异显著（P<0.05）；在日粮中添加葡萄糖酸钠可以有效提高肉鸡脾脏系数，其中B组最高，且显著高于对照组（A组）；在日粮中添加葡萄糖酸钠可以有效提高肉鸡脾脏中IL-2 mRNA的表达量，B组、C组、D组均高于A组，其中B组最高，显著高于对照组（A组）。由此可见，在日粮中添加葡萄糖酸钠可以改善肉鸡精肉率，提高屠宰性能；葡萄糖酸钠可以提高肉鸡的免疫性能，且日粮中添加0.1%葡萄糖酸钠效果最佳。

关键词：葡萄糖酸钠；AA+肉鸡；屠宰性能；免疫性能

20世纪50年代开始，科学家们发现，在饲料中添加一定浓度的抗生素对预防动物疾病、促进动物生长、提高饲料利用率等方面起到了积极的作用，饲料抗生素被世界各国广泛使用[1]。但是，长期使用抗生素，容易引起畜禽机体产生依赖性，限制了体内免疫细胞机能的发挥，使机体免疫功能下降，抵抗疾病能力降低[2]；使用抗生素有可能使动物产生基因突变、畸形、致癌；抗生素大量排出动物体外，也可能造成环境污染[3]。鉴于抗生素产生的副作用，2006年1月，欧盟全面禁止食品动物使用抗生素促生长饲料添加剂[4]。因此，饲用抗生素替代物的研制与开发是各国畜牧业迫切需要解决的问题[4]。葡萄糖酸钠是广泛用于工业中的一种有机酸盐，价格低廉、性质稳定，作为一种新型饲料添加剂，不被动物肠道吸收利用，可以被某些有益微生物利用的特点，近年来受到广泛关注。周长海等报道，葡萄糖酸钠具有促进仔猪生长发育、改善仔猪饲料报酬、预防仔猪腹泻的效果,有望作为抗生素促生长剂的替代品应用在断乳仔猪饲料中,作为仔猪非抗生素促生长剂的新型添加剂[5]。本试验以AA+肉鸡为研究对象，通过在基础日粮中添加适量葡萄糖酸钠，研究其对肉鸡屠宰性能、免疫性能的影响，旨在研究葡萄糖酸钠是否可以作为新型抗生素替代物添加在肉鸡配合饲料中并确定其最适添加量。

1　材料与方法

1.1试验材料与地点

饲料级葡萄糖酸钠，又名五羟基乙酸钠，其分子式为C6H11O7Na，相对分子质量为218.14，外观为白色或浅黄色的粉末，纯度100%。

试验动物为肉鸡初生雏鸡，品种为AA+肉鸡，购于吉林农业大学孵化场。

1.2试验设计及日粮

试验选择AA+肉鸡出生雏240只，随机分为A、B、C、D 4个处理组，每组60只，组内6个重复，每个重复10只。A组饲喂基础日粮(基础日粮组成及营养水平见表1)，不添加葡萄糖酸钠，B、C、D组分别在基础日粮基础上添加0.1%、0.2%、0.3%的葡萄糖酸钠。试验分为两个阶段：试验前期(1～21 d)、试验后期(22～42 d)。

1.3饲养管理

本试验采用的饲养方式是前期育雏室笼养，后期平面饲养，自由采食和自由饮水，舍内温度、湿度、光照、通风等饲养管理条件均保持一致，常规免疫。

1.4测试指标及方法

1.4.1屠宰性能指标测定

在试验的21日龄和42日龄，每组所有鸡先称重，然后在每组各重复取出一只与该重复平均体重相近的鸡进行屠宰，取肝脏、胸肉、腿肉，并称重，最后计算胸肉率、腿肉率和肝脏比例、脾脏系数。

活重:指在屠宰前禁食12 h后的重量(g)；

胸肉率（%）=胸肉重/活体重×100；

腿肉率（%）=腿肉重/活体重×100；

精肉率（%）=（胸肉率+腿肉率）×100；

肝脏比例（%）=肝脏重/活体重×100；

脾脏系数（%）=脾脏重/活体重×100。

表1　基础饲粮组成及营养水平（风干基础）

1.4.2脾脏中IL-2mRNA相对表达量的测定目的基因相对表达量按以下公式计算：

ΔCt=Ct目的基因-Ct参考基因；

-ΔΔCt=ΔCt试验组-ΔCt对照组；

目的基因相对表达量= 2^(-ΔΔCt)（Ct为阈值循环）。

1.4.2.1总RNA的提取及cDNA的合成

每组随机取6个脾脏样本提取总RNA，RNA提取所用的离心管、枪头等均用0.1%DEPC水处理过夜后，高压灭菌。提取步骤按照RNA(试剂盒)动物组织总RNA提取试剂盒（invitrogen）操作说明进行，并利用紫外分光光度计检测其浓度和纯度。

取2 μg总RNA按cDNA第一链合成试剂盒（invi⁃trogen）操作说明反转录得到cDNA。

1.4.2.2引物的设计与合成

在GenBank上查找到鸡的IL-2基因以及内参基因β-actin的mRNA序列，使用Primer3.0设计引物。引物由华大科技合成，引物详细信息见表2。

表2　引物序列及参数

1.4.2.3IL-2 mRNA荧光定量PCR检测

采用SYBR Green染料法在实时荧光定量PCR扩增仪上进行扩增。反应体系为：

SYBR Green 10 μl；Primer Forward 0.4 μl；Primer Reverse 0.4 μl；cDNA 2 μl；ddH2O 7.2 μl；Total 20 μl。

反应程序：95℃15 min，1个循环；95℃10 s，60℃30 s，40个循环。反应结束后进行熔解曲线分析，判定引物的特异性。采用上述反应体系和条件对各样本进行实时荧光定量PCR扩增。

1.5数据处理与分析

运用Excel 2010对试验数据进行初步的统计分析，利用SPSS13.0统计软件中ANOVA进行方差分析，表中试验数据用“平均值±标准误”表示，以P<0.05作为显著性判断标准。

2　结果与分析

2.1葡萄糖酸钠对AA+肉鸡屠宰性能的影响(见表3、表4)

表3　试验各组AA+肉鸡21日龄屠宰性能（%）

表4　试验各组AA+肉鸡42日龄屠宰性能（%）

由表3可见，21日龄精肉率，对照组（A组）与试验组D组相比，差异显著（P<0.05），且D组精肉率明显高于A组。21日龄胸肉率、腿肉率以及肝脏比例，对照组与试验组相比差异不显著（P>0.05）。

由表4可见，42日龄精肉率，对照组(A组)与试验组C组相比，差异显著（P<0.05），且C组精肉率明显高于A组。42日龄胸肉率、腿肉率以及肝脏比例，对照组与试验组相比差异不显著（P>0.05）。

2.2葡萄糖酸钠对免疫性能的影响(见图1、图2)

2.2.1葡萄糖酸钠对肉鸡脾脏系数的影响

由图1可见，与对照组(A组)相比，试验组B组脾脏系数明显提高，且差异显著（P<0.05）；试验组C组、D组中脾脏系数亦高于A组，但是差异不显著（P>0.05），其中添加葡萄糖酸钠组中，B组最高，D组最低。

图1　葡萄糖酸钠对肉鸡脾脏系数的影响

2.2.2葡萄糖酸钠对肉鸡脾脏中IL-2 mRNA表达量的影响

图2　葡萄糖酸钠对肉鸡脾脏中IL-2 mRNA表达量的影响

由图2可见，与对照组(A组)相比，试验组B组脾脏中IL-2 mRNA的表达量明显提高，且差异显著（P< 0.05）；试验组C组、D组中IL-2 mRNA的表达量亦高于A组，但是差异不显著（P>0.05），其中添加葡萄糖酸钠组中，B组最高，C组最低。

3　讨论

3.1葡萄糖酸钠对肉鸡屠宰性能的影响

葡萄糖酸钠作为饲料添加剂替代抗生素的研究，在国内家禽饲料中相关的研究报告较少见。在K.A.Rafacz-Livingston（2005）等的试验中，8～22日龄的低磷肉鸡饲粮中添加葡萄糖酸钠，可以提高雏鸡对植酸磷的利用率以及提高肉鸡的生产性能和肉鸡胫骨灰分含量[6]；杨宁（2009）等在葡萄糖酸钠和植酸酶对肉鸡营养利用和屠宰性能的影响试验中得出：在促进肉鸡腹脂率的提高方面，葡萄糖酸钠和植酸酶存在着互作效应[7]；T.Poeilhampha等(2011)报道，在猪日粮中添加葡萄糖酸钠，可以显著地促进猪的生长，具体的机制尚不清楚[8]。本试验结果显示：日粮中添加适量的葡萄糖酸钠，可以显著提高肉鸡精肉率，提高屠宰性能，进而提高经济效益，这可能是与葡萄糖酸钠进入肉鸡体内后，改善肉鸡体内蛋白质转化有关的因素，但具体机制需要进一步研究。

3.2葡萄糖酸钠对肉鸡免疫性能的影响

脾脏是禽类重要的外周免疫器官，聚集着大量B细胞、T细胞，是免疫应答的重要场所，同时也是体内产生抗体的主要器官，参与全身细胞免疫及体液免疫[9]。Rivas等认为，脾脏免疫器官重量是反映免疫器官功能状态的一个重要指标[10]。IL-2对于机体的免疫应答起着重要的作用，IL-2是一种重要的免疫调节因子，在促进T细胞的活化与增殖、B细胞的生长与分化，增强NK细胞、单核细胞杀伤活性等功能中发挥着重要的作用[11-13]。本研究表明，在日粮中添加葡萄糖酸钠，能够显著提高肉鸡脾脏系数，其中添加0.1%葡萄糖酸钠组与对照组相比差异显著且最高；在日粮中添加葡萄糖酸钠，能够促进肉鸡脾脏IL-2 mRNA的表达量，其中添加0.1%葡萄糖酸钠组明显高于对照组，且差异显著，这与本试验中肉鸡脾脏系数的变化具有一致性，但是0.2%组、0.3%组与0.1%组相比，脾脏中IL-2 mRNA的表达量有降低的趋势，说明高剂量的葡萄糖酸钠有可能对动物产生免疫抑制作用,这与马可为等（2008）研究结论一致，日粮中添加不同水平的葡萄糖酸钠能够提高肉鸡免疫器官指数，提高了肉鸡的免疫机能。这可能是由于葡萄糖酸钠是不能被动物体吸收和利用，可以直接进入肉鸡肠道，通过促进肠道内乳酸菌、双歧杆菌等有益微生物的增殖或抑制肠道内有害菌大肠杆菌的数量来调节肠道菌群生态环境，从而起预防动物疾病，提高免疫性能，发挥类似抗生素的作用。

4　结论

①在日粮中添加0.2%葡萄糖酸钠可以显著增加42日龄肉鸡的精肉率（胸肉+腿肉）。

②在日粮中添加0.1%葡萄糖酸钠可以显著提高肉鸡的脾脏系数，且显著提高脾脏中IL-2 mRNA的表达量，提高肉鸡免疫性能；其中在日粮中添加0.1%葡萄糖酸钠对肉鸡的免疫效果最佳。

③葡萄糖酸钠能够产生与抗生素类似的作用，且0.1%葡糖糖酸钠添加量为最适添加量，有望替代抗生素。

参考文献

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[2]何利强.浅谈畜牧业中抗生素的危害与控制[J].中国动物检疫，2010，27(4)：11-12.

[3]许利.着力解决动物养殖中饲料抗生素等残留引起的问题[J].上海人大月刊，2013(7):24-25.

[4]邱亦秀.饲用抗生素替代物的应用及发展方向[J].江西饲料，2005(5):6-8.

[5]周长海，刘婷，陆程，等.葡萄糖酸钠对仔猪生长及肠道感染预防的研究[C].中国畜牧兽医学会动物营养分会第十次学术研讨会论文集, 2008:505.

[6] K.A.Rafacz-Livingston, C.M.Partonsect. The effects of various or⁃ganic acids on phytate phosphorus utilization in chicks[J]. Poultry Science, 2005,84(9):1356.

[7]杨宁,石杨红,郭艳丽,等.葡萄糖酸钠和植酸酶对肉鸡营养利用和屠宰性能的影响[J].甘肃农业大学学报, 2009，44(1)：44-48.

[8] T.Poeilhampha, C. Bunchasak. A dietary sodium gluconate supple⁃ment improves growth performance and prebiotic activity in the small intestine of nursery pigs grown under tropical conditions[J]. Animal Production Science, 2011, 51:702-707.

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[10] Rivas A, Fabricant T. Indication of Immuno depression in chick⁃en infected various strain of Mafek's disease virus[J]. Avian Dis⁃ease, 1985, 32: 1-8.

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[12]吕尊周，袁肖笑，蔡兆伟，等.抗菌肽对蛋鸡血清免疫指标及脾脏白细胞介素2 mRNA表达量的影响[J].动物营养学报，2011, 23(12)：2183-2189.

[13]杜银峰.几种饲用抗生素替代产品对肉鸡生长、消化和免疫性能的影响[D].扬州大学，2013.

（编辑：刘占，laramie_liu@139.com）

Effect of sodium gluconate on slaughter performance and immune function of broilers

Chen Hongying, Zhou Changhai, Duan Xiaoxiang, Zhang Liming, Feng Teng, Liao Xiandong, Li Liang, Yu Hangyu, Liu Boxue

Abstract：Sodium gluconate was added in feed to study the effects on slaughter performance and im⁃mune function of broilers. Two hundred and forty one-year-old AA broiler chickens were divided into 4 groups, that is group A, group B, group C, group D. There are 6 replicates in each group and 10 chickens per replicate. The control group was fed the basal diet. For treatment group, sodium gluco⁃nate was supplemented in feed at 0.1%, 0.2%, 0.3% of diet. There are two stages in the experiment, 0～ 21 days and 22～42 days. The result showed that compared with the control group, the treatment group D were significantly improved (P<0.05) on lean meat rate at 21 days of age and the treatment group C were significantly improved (P<0.05) on lean meat rate 42 days of age. Sodium gluconate can improve spleen coefficient and AMPs on expression of IL-2 mRNA in spleen of broilers, and group B was sig⁃nificantly different than the control group (P<0.05). In conclusion, the supplementation of sodium glu⁃conate can improve lean meat rate and immune function of broilers. And the group that added with 0.1% sodium gluconate was the best.

Key words：sodium gluconate；AA+broilers；slaughter performance；immune function

基金项目：吉林省科技厅国际科技合作项目[20120731]；吉林省科技厅自然科学基金项目[20140101131JC]

收稿日期：2015-10-09

作者简介：陈洪影，硕士，研究方向为动物营养与饲料科学。

中图分类号：S816.32

文献标识码：A

文章编号：1001-991X（2016）02-0038-04

doi:10.13302/j.cnki.fi.2016.02.008