303株肺炎克雷伯杆菌的药敏结果及耐药性分析

赖秀花，邹汉良，钟彦云，魏晟潇

(深圳市坪山新区妇幼保健院检验科，广东 深圳 518122)

303株肺炎克雷伯杆菌的药敏结果及耐药性分析

赖秀花，邹汉良，钟彦云，魏晟潇

(深圳市坪山新区妇幼保健院检验科，广东 深圳 518122)

目的 探讨肺炎克雷伯杆菌的药敏结果及其对临床常用药物的耐药性，为合理用药提供依据。方法 回顾性分析2011年1月至2014年11月我院门诊和住院患者送检的痰标本中分离出的非重复性肺炎克雷伯杆菌的数量以及产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检出率和耐药谱。结果 1 327份痰标本中分离出303株肺炎克雷伯杆菌，检出率为22.8%，其中产ESBLs检出137株，占45.2%。产ESBLs肺炎克雷伯菌青霉素类100%耐药，头孢类78.8%以上耐药，且以成人组居多，而氨基糖苷类在产ESBLs肺炎克雷伯菌中耐药性最低的是阿米卡星，占31.4%。β-内酰胺酶抑制剂占35.1%～43.8%、喹若酮类耐药率占46.7%。结论 长期动态监测肺炎克雷伯杆菌的药敏及耐药趋势，积极筛查肺炎克雷伯杆菌产ESBLs者对合理应用抗生素至关重要。

肺炎克雷伯菌；超广谱β-内酰胺酶；耐药性

肺炎克雷伯菌是医院常见的肺部感染的病原菌之一。肺炎克雷伯菌为革兰氏阴性杆菌，属于肠杆菌科克雷伯菌属，临床标本中较常见的主要有肺炎克雷伯菌肺炎亚种，本菌为兼性厌氧菌，无鞭毛、无动力。肺炎克雷伯菌分布于自然界，近年来成为最重要的条件致病菌之一[1-2]。本文对我院2011年1月至2014年11月肺炎克雷伯菌的检出率以及药物的耐药性进行分析，以期为合理用药提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2011年1月至2014年11月我院各科室送检的1 327份痰标本，培养出肺炎克雷伯菌303株，占总送检标本的22.8%，对同一患者重复留取标本不进行统计。按照年龄分为儿童组（6～12岁）、青少年组（13～17岁）和成年组（18～82岁）。质控菌株：大肠埃希菌 ATCC25922，铜绿假单胞菌ATCC27853。

1.2 菌株培养 采用一次性清洁无菌的痰杯留取晨痰，送实验室后按照白细胞（WBC）＞25个/HP，上皮细胞＜10个/LP标准筛查合格的标本。用合格的痰标本接于麦康凯、血平皿、巧克力平皿以及沙保氏培养基。24～48 h后用法国梅里埃ATB机型以及配套的革兰氏阴性杆菌试剂进行鉴定。

1.3 药敏试验 采用ATB机型配套的药敏试纸条直接读取MIC值。药敏结果均参照CLSI 2012版的执行标准进行判断。超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的确诊试验为K-B法，M-H琼脂放两组药敏纸片：①头孢噻肟/克拉维酸30 μg/片或10μg/片和头孢噻肟30 μg/片；②头孢他啶/克拉维酸30 μg/片或10μg/片和头孢他啶30 μg/片，24～48 h后任一组加了克拉维酸纸片的抑菌圈比没加克拉维酸的直径≥5 mm即为ESBLs阳性。

1.4 统计学方法 全部试验数据经SPSS19.0软件统计分析。

2 结果

2.1 菌株在各科室的分布情况 303株肺炎克雷伯菌在各科室的检出率差异较大。其中以儿科检出率最高，为28.5%(85/298)，其次是呼吸内科，送检痰标本769份，检出肺炎克雷伯菌198例，检出率为25.7%；外科的检出率为10.9%，排行第三；妇产科检出率最低，为4.1%。其他科室送检痰标本28份，检出肺炎克雷伯菌3例，检出率为10.7%，见表1。

表1 303株肺炎克雷伯菌在各科室的分布情况

2.2 产ESBLs肺炎克雷伯菌的分布情况 1 327份痰标本中共分离出303株肺炎克雷伯菌，检出率为22.8%，其中产ESBLs肺炎克雷伯菌137例，构成比为45.2%，且成年人组居多，有89株，占65%，青少年组34株，占25%，儿童组有14株，占10%。

2.3 药敏分析 303株肺炎克雷伯菌对青霉素和头孢类的耐药性较高，其中产ESBLs肺炎克雷伯菌青霉素是100%耐药，头孢类也是78.8%以上耐药，而氨基糖苷类在产ESBLs肺炎克雷伯菌中耐药性最低的是阿米卡星，占31.4%。β-内酰胺酶抑制剂占35.1%～43.8%、喹若酮类耐药率占46.7%；碳氢酶烯类的药敏结果最低，见表2。

表2 303株肺炎克雷伯菌的药物耐药性分析

3 讨论

肺炎克雷伯菌可在全身各部位发生感染，但最高的发病率在呼吸道和尿路[3]。近年来该菌的耐药性不断增加，部分成为产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株，对大多数青霉素、头孢菌素类抗生素耐药，治疗比较困难[4-5]。ESBLs是丝氨酸蛋白酶的衍生物，种类繁多，通常由TEM-1、TEM-2及SHV-1型ESBLs经一至数个氨基酸残基取代衍生物[6]可水解青霉素、头孢菌素、氨曲南等广谱β-内酰胺酶类抗菌药物。有研究表明编码ESBLs的耐药基因定位在质粒上，并可随质粒在相同或不同菌属细菌间水平传播，从而造成ESBLs细菌在医院感染爆发流行[7]，成为防治中的难点。ESBLs阳性菌对喹诺酮类和氨基糖苷类的药物耐药有增加，明显说明ESBLs阳性菌存在着广泛的多重耐药现象[8]。本研究结果显示亚胺培南与美罗培南的耐药性最低，是目前为止最理想的用药选择，这与严海明等[9]报道相一致。其次为含酶抑制剂的抗菌药物以及氨基糖苷类、喹若酮类。国内外资料显示产超广谱β-内酰胺酶是导致肺炎克雷伯菌的主要耐药机制之一[10]。李迎慧等[11]就曾报道过肺炎克雷伯菌对青霉素以及头孢类耐药率＞40%。可见此耐药趋势的严峻性，同时也给临床医务人员带来巨大的挑战。在医院感染中，内源性感染是通过病原体在宿主体内移位定值而直接传播，外源性感染是由患者体外的微生物引起，其主要途径为共同媒介物的传播，如医护人员的手、吸痰器等介入性操作器械中，常可在短时间内引起医源性感染的爆发流行[12-13]。本文结果显示了303株肺炎克雷伯菌中产ESBLs 137例，占45.2%，比2013年刘珊珊等[14]所监测的数据高，而且产ESBLs的菌株主要集中在（呼吸内科）成人组，这是否与患者在来院前已服用过抗生素有关还有待考证。下呼吸道感染已成为重要的感染类型，且感染趋势不断加重。随着临床广谱抗生素的大量使用，ESBLs的阳性菌株也跟着上升，如何合理应用抗菌药物，从而有效的控制各种感染病例，是临床医务人员的重要任务。

综上所述，如临床标本中一旦检出肺炎克雷伯菌，应同时做ESBLs检测，以便能在最短的时间内给临床提供更多有效的实验数据，让临床更好地为患者选择合适的抗菌药物，进一步加强医源性感染的防控，从而避免更多的耐药性菌株的产生。

[1]Munoz-Price LS,Poirel L,Bonomo RA,et al.Clinical epidemiology of the global expansion of Klebsiella pneumoniae carbapenemases[J]. Lancet Infect Dis,2013,13(9):785-796.

[2]胡志军,潘晓龙,周东升,等.肺炎克雷伯菌感染的临床分布及耐药性监测[J].中华医院感染学杂志,2014,24(12):2865-2867.

[3]宋金明,徐龙强,曹永献,等.医院感染肺炎克雷伯菌与鲍氏不动杆菌的分布及耐药性分析[J].中华医院感染学杂志,2013,23(9): 2186-2187.

[4]陆菲捷.重症社区获得性肺炎克雷伯杆菌肺炎临床分析[J].临床肺科杂志,2012,17(7):1356-1357.

[5]何紫琪,李从荣,杨艳兵,等.563株肺炎克雷伯杆菌临床分布及耐药性分析[J].海南医学,2012,23(7):78-79.

[6]贺毅,陆坚.治疗产ESBLs细菌感染的研究进展[J].国外医药:抗生素分册,2012,33(4):145-150.

[7]符永玫,张永标,席云,等.产ESBLs肺炎克雷伯菌的流行状况与药敏谱调查[J].中国卫生检验杂志,2010,20(2):402-403.

[8]王佩芳,凌春华,陈延斌,等.大肠埃希菌及肺炎克雷伯杆菌血流感染分布及药敏分析[J].江苏医药,2012,38(4):435-437.

[9]严海明,梁敏锋,邓伟豪,等.近三年同期几种常见致病菌的耐药性变迁分析[J].热带医学杂志,2014,14(7):864-866.

[10]贺晓珊,梅传忠.肺炎克雷伯菌耐药机制的研究进展[J].西部医学, 2014,26(1):124-126.

[11]李迎慧,兰全学,张韶华,等.深圳市7家医院常见病原菌耐药性分析[J].热带医学杂志,2010,10(7):878-881.

[12]夏梦岩,高全成,袁晨光.大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌耐药性的变迁研究[J].中华医院感染学杂志,2014,24(2):287-289.

[13]唐景云,秦晓林.加强抗菌药物管理对产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌耐药性的影响[J].海南医学,2016,27(5):753-755.

[14]刘珊珊,李海钦,易平,等.基层医院下呼吸道感染的菌群分布及耐药性分析[J].热带医学杂志,2013,13(8):1009-1011.

Analysis of drug sensitivity and drug resistance of 303 strains of clinically isolated Klebsiella pneumoniae.

LAI Xiu-hua,ZOU Han-liang,ZHONG Yan-yun,WEI Cheng-xiao.Department of Clinical Laboratory,Pingshan New District People's Hospital of Shenzhen,Shenzhen 518122,Guangdong,CHINA

Objective To investigate the drug sensitivity and clinical commonly used drugs resistance of Klebsiella pneumoniae,and provide reference for using the medicine rationally.Methods The number of Klebsiella pneumoniae isolated from outpatients and inpatients in our hospital from January 2011 to November 2014,extended spectrum beta lactamases(ESBLs)detection rate and drug resistant spectrum were retrospective analyzed.Results A total of 303 strains of Klebsiella pneumoniae was isolated from 1 327 sputum samples with detection rate of 22.8%,of which 137 strains produced extended spectrum beta lactamases(ESBLs),accounting for 45.2%.ESBLs producing Klebsiella pneumoniae has 100%resistance to penicillin,and 78.8%or more resistance to cephalosporins,which mainly isolated from the adult group. Aminoglycosides ESBLs producing Klebsiella pneumonia had the lowest resistance to Amikacin with 31.4%,which had 35.1%～43.8%resistance to beta lactamase inhibitor and 46.7%resistance to primaquine ketones.Conclusion The long-term dynamic monitoring of drug sensitivity and drug resistance tendency of Klebsiella pneumoniae,and regularly screening of ESBLs producing Klebsiella pneumoniae are very important to reasonable use of antibiotics.

Klebsiella pneumoniae;Extended-spectrum beta-lactamase;Drug resistance

R378.99+6

A

1003—6350（2016）15—2480—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.15.023

2016-03-22)

广东省深圳市坪山新区卫生系统科研资助项目(编号：201428)

赖秀花。E-mail：315080998@qq.com