疑难血型鉴定与分析1例

王向红　邢巧玲　李雅洁　罗敏莉　韩省华　杨翠丽　毛丽梅



疑难血型鉴定与分析1例

王向红邢巧玲李雅洁罗敏莉韩省华杨翠丽毛丽梅

目的对1例疑难血型临床样本进行检测及分析，为输血科血型鉴定，交叉配血提供实践依据。方法分别用不同试剂公司的微柱凝胶单克隆抗体卡和ABO血清，血球试剂，采用经典试管法，卡式法，唾液HAB血型物质测定，吸收放散试验。结果此标本血型是AxB血型。结论此标本鉴定血型表型是AxB亚型。

ABO血型系统；ABO正反定型不符；血型亚型；AxB亚型

人类红细胞血型是属于同种异型抗原，目前已发现红细胞血型系统35个，ABO血型基因位点在第9号染色体上，一般不改变，但某些因疾病的原因如白血病或实体瘤等有可能致使ABO血型系统抗原减弱，此种减弱一般是暂时性，随着疾病的缓解逐渐恢复原来的血型。ABO血型的准确鉴定十分重要，血型错误可影响输血工作，ABO血型鉴定错误是引起溶血性输血反应的最主要原因，严重可危及患者生命。在血型鉴定中，ABO亚型常导致血型错判，交叉配血不合[1]。

1　资料与方法

1.1一般资料孕妇孕39周，肝功能、肾功能检查均正常，梅毒、表面抗原、丙肝抗体、艾滋病均阴性，因贫血，血色素76 g/L来我院生产。在生产前备血，空腹抽取静脉血2 ml,EDTA抗凝。

1.2试剂与仪器ABO、RhD血型微柱凝胶正反定型检测卡(单克隆抗体)、ABO反定型红细胞、血型鉴定质控品，符合国家标准，所有试剂均在有效期内，试剂专用血型血清学离心机，免疫微柱孵育器。实验前所有正反定型检测卡，试管法正反定型试剂均用质控品做质控，相差不到1+。

1.3方法

1.3.1血型鉴定

1.3.2微柱凝胶法单克隆抗体，经典试管法进行ABO正反定型：微柱凝胶卡法，采集患者的静脉离心，血制备成0.8%悬液红细胞和血清标本。取微柱凝胶正反定型试剂卡，将受检者红细胞悬液按每管50 μl加入，将受检者血清每管50 μl加入微管中，再将反定型试剂A1、B细胞分别加入微管中，即刻使用专用离心机离心，取出判定结果，同时做自身对照。分别置于室温、4℃、37℃，用经典试管法，按照全国临床检验操作规程(第3版)操作和标准进行结果判断[2]。

1.3.3唾液HAB血型物质测定：按照全国临床检验操作规程(第3版)操作和标准进行结果判断[2]。

1.3.4吸收放散试验：按照全国临床检验操作规程(第3版)操作和标准进行结果判断[2]。

2　结果

2.1ABO正反定型使用长春博迅生物技术有限责任公司和江阴力博医药生物技术有限公司ABO正反定型凝胶卡，在室温、4℃、37℃不同温度下正定型抗A最高是1+；抗B：4+；抗A+B：4+，反定型在室温、4℃、37℃不同的温度下A1c：1+；Bc：0；Oc：0，自身对照：0。

2.2试管法鉴定使用上海血液生物医药公司、中国医学科学院输血研究所不同试剂公司的血型试剂，在室温、4℃、37℃不同的温度下，正定型抗-A最高1+，抗-B ：4+，抗-A+B ：4+，抗-A1最高：1+，抗-H： 4+, 反定型结果：A1抗原最高：2+，B抗原：0，O抗原:0，自身对照:0，使用上海血液生物医药公司和长春博迅生物技术有限责任公司的试剂反定型结果相同见，符合AxB亚型特点，确定标本为AxB亚型，进一步做基因学实验证实。

2.3吸收放散试验受检者放散使用立即离心和二次离心结果2+。

3　讨论

临床输血首先要避免亚型漏检或将亚型误判，ABO血型系统的抗原除经典的A、B、O以外，还包括多种亚型血型，比如有A2、Ax、CisAB、Ael、Bm等，ABO亚型共同的血清学特点是A和B亚型红细胞与A型和B型红细胞主要区别表现在红细胞膜上抗原决定簇数量上，有时肉眼几乎看不到凝集，不规则抗体可以出现同时存在不规则抗-A1，抗B1， 判断ABO亚型主要观察与H抗体的凝集会增强[3]，可增加抗-AB、抗-H、抗-A1试剂做正定型提供更多的分析数据[4]，亚型吸收能力低于正常红细胞，但放散能力强于正常红细胞，唾液中的型物质以能否检测到A或B物质等来确定，亚型是造成ABO血型正反定型不符的主要原因之一[5]。临床实验室易将A型，B型亚型误认为O型，AB亚型误认为A型或B型，给输血科的血型鉴定带来一定困难[6]。若出现正反定型结果不符，正定型小于4+，正反定型相差2+ 以上时，要进行血型鉴定分析，正确判定ABO血型。

A1型红细胞上有A和A1两种抗原，A2细胞上仅有A抗原。临床实验室易将AxB误定为B型，为确保安全输血安全，应使用ABO正反定型方法进行鉴定。AxB型血清中的抗-A1抗体较弱，有时是冷凝集。AxB亚型要与亚型B(A)型相区别，AxB型中A1细胞凝集较弱，有时需要4℃加强。B(A)型的H抗原增强明显成3+以上，反定型与A1细胞凝集强于3+以上，部分和A2细胞凝集。另外也要与CisAB做一区别，两者的遗传方式相似，与抗A血清反应较强，与自然发生的人血清抗B弱凝集或不凝集，血清中有弱的抗-B。

临床上常用的单克隆ABO血型试剂不能全部识别略有变化的ABO血型，造成不同试剂公司的单克隆试剂ABO血型抗原系统表位A或B抗原检测结果上的差异和漏检，尤其对亚型，所以发现正反定型不符时要使用不同试剂公司的试剂做重复试验，并且对不同的试剂公司的试剂做质控对照。除新生儿标本外，必须加用抗抗-AB血清，抗-H血清，抗-A1对鉴定和区分亚型有一定的意义，正反血型定型不一致的标本还可以做吸收放散试验来证实标本是否含有弱的抗-A和弱的抗-B，做吸收放散试验时最好利用人源性抗-A(B)或3份以上的单克隆抗体试剂的混合后进行试验，同时进行唾液中血型物质的测定，用以辅助判断血型。

发现ABO正反血型鉴定不相符时，首先排除操作上的错误，其次是受检者是否是年龄<1或>60，患者的丙种球蛋白是否减低[7]，患者血清与O型普筛红细胞的反应与试剂红细胞是否一样，患者是否是白血病、肠道阻塞、胃癌、结肠或直肠癌，支原体肺炎，自身免疫性溶血，肝硬化等[8]，混合视野反应是否是输血后标本等来自于标本本身原因后进行血型试验，方法应选择经典的试管法，在4℃、37℃和室温下进行试验，一般在4℃和室温条件下活性较强，37℃时活性较弱,唾液HAB血型物质测定，吸收放散试验等方法综合评价[9]，同时有条件可用分子生物基因学实验证实。

本实验使用不同试剂公司的试剂和不同方法的结果是：用微柱凝胶单克隆抗体卡式法，正定型：与抗-A血清反应最高1+，与抗-B血清反应均显示正常预测的4+，与抗-A+B血清反应均为4+，反定型样本血清与A1细胞反应强度最高为2+；与B细胞反应均为不凝集，正反定型不符。

本实验在不同温度下检测，按照试管法操作程序鉴定和判断标准结果：镜下观察正定与抗-A反应出现微弱凝集最高1+，抗-B侧出现4+，与抗-A+B血清反应均是4+，与抗-H血清反应4+，反定型标本血清与A1细胞反应强度最高为2+；与B细胞反应不凝集，同时用人原A1红细胞和B红细胞试剂做反定型检测，正反定型比较出现异常，反定型与正定型血型不符。

经微柱凝胶单克隆抗体卡式法、经典试管法、唾液HAB血型物质测定是分泌型，含有B物质，H物质，无A物质，吸收放散试验2+，强于正常人，唾液HAB血型物质测定、吸收放散试验具有AxB血清学特点所以鉴定为极其稀有的AxB血型，经上级血型实验室用分子生物基因学实验也得到证实，提示为AxB亚型。

AxB亚型中有抗-A1抗体产生的可能，在接受血液输注应选O洗涤红细胞和AB型血浆[10]。AxB亚型一般不能作为献血员，易造成输血反应，对于女性献血有必要开展血清意外抗体筛查，以避免临床输血配血时次侧配血不合[11]。输血科在血型鉴定时应常规使用正反定型鉴定，正反定型不符，结合临床疾病和检验结果综合分析，采用多种方法进行鉴定，综合分析确定血型，避免亚型漏检，提高安全输血意识。

1庄文化，庄彩梅.CisAB与AxB血型个案检测分析.临床输血与检验杂志，2014,10:432.

2卫生部临床检验中心.全国临床检验操作规程.第3版.南京:东南大学出版社,2006.

3王北元，扬帆，焦立新.AxB型引起血型正反不符1例.中国实验诊断学杂志,2010,12:15.

4刘郁.邢台地区无偿献血者ABO血型分布及正反定型不符调查分析.现代检验医学杂志,2014,29:12-14.

5张惠莲，杨婷，于洋.ABO血型正反定型不一致原因分析.国际检验医学杂志,2011,32:9.

6张钦辉主编.临床输血学.第1版.上海：上海科学技术出版社，2000.82.

7李延伟，田庆华.因低丙种球蛋白血症造成ABO血型正反定型不符1例.检验医学与临床,2014，11：98-99.

8马砚敏，赵凤莲.33例ABO正反定型不符的原因分析及解决方法.中国医药指南,2013,11:582-583.

9李育，谢一鸣.受血者ABO血型正反定型不符循证分析.浙江医学,2012,34:1191-1193.

10王振芳.AxB血型的检测及临床意义.中国卫生检验杂志,2013,23：1040-1042.

11刘福昌,许泰玲,姜珍一,等.献血者ABO血型正反定型不符18例分析.中国输血杂志,2014,27:393-395.

2015-10-21)

10.3969/j.issn.1002-7386.2016.15.050

050051河北省石家庄市妇幼保健院

R 457.11

A

1002-7386(2016)15-2399-02