车前子多糖的分离纯化及其功能性质研究

陈天丽

【摘要】本文基于车前子多糖特点，对其分离纯化及功能性质进行初步探究，以期为相关应用研究提供一定的参考。

【关键词】车前子；多糖；分离纯化；功能性质

车前子为车前科车前属植物，药食两用，其主要有效成分为车前子多糖，目前国内外对车前子多糖的提取、纯化、生物活性的研究均取得了实质性进展，含量测定方法和制备工艺己渐趋成熟，现对其分离纯化及其功能性质介绍如下。

1车前子多糖分离纯化分析

1.1资料与方法

1.1.1资料

实验所用仪器包括紫外可见分光光度计、超声波清洗器、电子天平、冰箱、恒温水浴锅及高效液相色谱仪，试剂有氯化钠、氢氧化钠、三氯甲烷、乙醚等，均为分析纯，乙醇为食用级，自选车前子样品。

1.1.2方法

取样本15g，置于乙醇容器内浸泡，过滤后入烘箱内挥干，先制备车前子粗多糖，再配制多糖液，规格为10mg/ml，采用Sevage法（单法）和酶法-Sevage法（联用法）获取多糖，溶解粗多糖和两种已脱离蛋白多糖并测定各自含量，计算蛋白质脱除率和多糖得率，观察多糖示差及紫外峰形变化；柱层析纯化车前子多糖，并以HPGPC法测定复合物分子量。

1.2结果与讨论

1.2.1两种脱蛋白方法比较

先后采用酶法和Sevage法脱蛋白，可减少脱除次数，其中联用法蛋白质脱除率和多糖得率均高于单法，见表1。

1.2.2柱层析纯化结果及多糖分子量

柱层析纯化结果显示，多糖吸收峰最大值位置与紫外检测到的蛋白质特征吸收峰基本一致，组分即为糖与蛋白的复合物，葡萄糖系列测得的保留时间和分配系数如表2，标准曲线测得多糖分子量为1898584Da。

2车前子多糖功能性质分析

2.1资料与方法

2.1.1资料

实验所用仪器包括旋转蒸发器、冷冻干燥机、离心沉淀机、物性测试仪和程序流变仪，试剂有氯化钠、三氯甲烷、乙醚、正丁醇等，均为分析纯，乙醇为工业级，自选车前子样品。

2.1.2方法

制取车前子精制多糖，采用减压干燥法、灼烧法、苯酚-硫酸法、咔唑-硫酸法和考马斯亮蓝法，分别测定多糖水分、灰分、总糖、糖醛酸和蛋白质含量，以粗多糖溶液为样本，观察剪切速率、温度、浓度、pH、水化时间、冻融及盐对多糖溶液黏度、凝胶和热稳定性的影响，多糖溶液凝胶点和熔化点均从差热曲线中获得。

2.2结果与讨论

2.2.1多糖初级结构及化学成分分析

车前子粗多糖成分组成见表3。

2.2.2多糖流变、凝胶特性及热稳定性分析

多糖溶液为剪切变稀的假塑性流体，保形性较好，溶液粘度随着温度的升高而降低，对盐有较好的兼容性，在pH5～10之间较为稳定；为热可逆行凝胶，凝胶强度随着浓度的增加而增强，pH<4及加入盐后，凝胶强度会有所增大；DSC检测发现，多糖溶液在加热和冷却过程中均未见明显相变，说明其无明显凝固点和熔化点，且热稳定性较好。

3小结

综上所述，车前子多糖以木糖和阿拉伯糖为主，目前国内对车前子多糖的开发和利用还局限在中医药领域，对车前子多糖功能性质的研究还不够深入，鉴于车前子多糖功具有高粘度、耐碱、耐盐等诸多特性，制备工艺正在从简单加工向深加工过渡，其在食品、医药等行业应用潜力巨大，发展前景备受看好。