爱罗咳喘宁口服液对慢性阻塞性肺疾病大鼠血清白细胞介素-6和白细胞介素-8的影响

谢文英　张良芝　常学辉　尚立芝　胡文豪　李　亮　刘　坦　张　静　李进京

(河南中医学院，河南　郑州　450008)



爱罗咳喘宁口服液对慢性阻塞性肺疾病大鼠血清白细胞介素-6和白细胞介素-8的影响

谢文英张良芝常学辉1尚立芝胡文豪李亮刘坦张静李进京

(河南中医学院，河南郑州450008)

〔摘要〕目的探讨爱罗咳喘宁口服液对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠血清白细胞介素(IL)-6、IL-8的影响。方法雄性SD大鼠60只随机分为正常组、模型组、西药组、中药大剂量组、中药中剂量组、中药小剂量组，每组10只。采用2 次气管内注入脂多糖加烟熏造模后，给予对应处理后测定各组大鼠血清IL-6、IL-8的含量。结果模型组大鼠血清IL-6、IL-8显著高于正常组，经用爱罗咳喘宁口服液治疗后，血清IL-6、IL-8明显下降，与模型组比较差异显著。结论爱罗咳喘宁口服液治疗COPD的作用机制可能与降低IL-6、IL-8水平有关。

〔关键词〕慢性阻塞性肺疾病；爱罗咳喘宁口服液；白细胞介素-6；白细胞介素-8

1河南中医学院第二临床医学院内科学科

第一作者：谢文英(1963-)，女，教授，硕士生导师，主要从事常见病症的辨证规律研究及中医防治研究。

慢性阻塞性肺疾病(COPD)居我国疾病负担序列的第一位，造成巨大的社会和经济负担。对于COPD 防治研究已成为目前医学界研究的热点课题之一。现代医学认为COPD 的发病机制复杂，涉及多种因素〔1，2〕。近年来，随着对 COPD 气道炎症的深入研究，普遍认为激活的炎性细胞释放多种介质，包括白细胞介素(IL)-6、IL-8等参与COPD的发作、加重和复发。本研究主要通过观察爱罗咳喘宁口服液对COPD 大鼠模型血清IL-6、IL-8含量的影响，探讨爱罗咳喘宁口服液治疗COPD的可能作用机制。

1材料与方法

1.1实验动物雄性SD大鼠60只，清洁级，体重(300±20)g，由河南省实验动物中心提供。

1.2药物与试剂爱罗咳喘宁口服液(由炙麻黄、苦杏仁、云苓、苍术、半夏、葶苈子、干姜、麦芽、白术、山药、党参、芫花、赤芍等药物按一定比例配制而成，由河南中医学院第一附属医院制剂室提供)；止咳橘红口服液，北京同仁堂生产。IL-6、IL-8试剂盒购自南京建成生物医学研究所；脂多糖购自广州齐云生物技术有限公司(由美国Sigma公司生产)。

1.3分组大鼠随机分为6组：正常组、模型组、止咳橘红口服液对照组(对照组)、爱罗咳喘宁大剂量组(中药大剂量组)，爱罗咳喘宁中剂量组(中药中剂量组)，爱罗咳喘宁小剂量组(中药小剂量组)，每组10只。

1.4造模采用烟雾吸入+脂多糖灌肺复合因素建立COPD大鼠模型,参照文献〔3，4〕法制作。在造模的第1天、第14天将大鼠以适量乙醚吸入麻醉后，暴露喉头，以静脉套管针替代气管导管行气管插管，向大鼠气管内注入脂多糖 LPS 100 μl(200 μg/μl)，完毕后将大鼠直立旋转10～20 s，使LPS均匀分布于肺部。第2～13天、第15 ～ 28天，每天在有机玻璃密闭箱(80 cm×60 cm×50 cm，上方有一直径为1.2 cm 的通气孔)持续吸入新鲜的香烟雾(南宁卷烟厂生产真龙牌香烟，焦油含量19 mg，尼古丁1.2 mg)30 min，20支/d，每天熏烟后立刻用低于环境温度(20℃)5℃冷空气刺激1 h，造模28 d结束。

1.5处理造模成功后正常组、模型组大鼠分别给予蒸馏水按10 ml·kg-1·d-1灌胃；爱罗咳喘宁大剂量组按20 ml·kg-1·d-1灌胃混悬液(每毫升含药物3 g)；爱罗咳喘宁中剂量组按10 ml·kg-1·d1灌胃混悬液(每毫升含药物1.5 g)；爱罗咳喘宁小剂量组按5 ml·kg-1·d=1灌胃混悬液(每毫升含药物0.75 g)；对照组按10 ml·kg-1·d-1灌胃药物混悬液(每毫升含药物0.0375 g)。每天灌胃2次/d，6AM与6PM各给药一次，连续7 d。

1.6指标测定灌胃结束24 h后断头处死动物，取血3 ml于4℃静置30 min后，以3 000 r/min 离心15 min，取血清在-20℃ 冻存待检测。IL-6，IL-8检测均用ELISA法,在河南中医学院实验中心完成，均按照试剂盒说明书由专人操作。

1.7统计学处理采用SPSS18.0进行F检验及Q检验。

2结果

见表1。模型组大鼠血清IL-6，IL-8显著高于正常组(均P<0.01)；中药大、中、小组及对照组大鼠血清IL-6，IL-8值显著低于模型组(均P<0.01)，中药大剂量组血清IL-6，IL-8值与对照组比较无显著性差异(P>0.05)，中药大剂量组血清IL-6，IL-8值显著低于中药中、小剂量组(均P<0.01)。

表1　各组大鼠血清IL-6，IL-8水平比较

与正常组比较:1)P<0.01；与模型组比较:2)P<0.01；与中药大剂量组比较：3)P<0.01

3讨论

COPD病因病机概括为六淫之邪侵袭，卫表受邪，肺失宣肃而成，尤以六淫之寒邪为多，外感是其重要的诱发因素；其病机为本虚标实，本虚为肺脾肾虚，标实为痰饮、血瘀；反复发作致肺气虚是本病迁延不愈的主要原因。COPD病机之关键涉及“气虚”、“痰凝”、“血瘀”、“气滞”，而又以“气虚”为根本，病位涉及肺、脾、肾三脏，治则为宣肺降肺；益气行气；化痰祛瘀；健脾益肾。爱罗咳喘宁口服液为已故著名中医谢畅怀治疗慢性支气管炎、慢性阻塞性肺疾病的经验方，全方由炙麻黄、苦杏仁、云苓、苍术、半夏、葶苈子、干姜、麦芽、白术、山药、党参、芫花、赤芍等药组成。方中炙麻黄宣肺平喘，杏仁祛痰止咳平喘，两者同为君药。臣以半夏燥湿化痰，葶苈子泻肺降气，祛痰平喘；干姜温肺化饮；茯苓健脾化痰；芫花泻水逐饮，祛痰止咳。佐以党参健脾益肺，白术健脾益气，山药补脾、养肺、固肾，苍术燥湿健脾,麦芽健脾和胃，赤芍活血祛瘀。全方可起健脾益肾，祛痰祛瘀，止咳平喘之效〔5~7〕。

近年来，细胞因子网络和免疫功能紊乱与COPD关系的探讨受到重视，细胞因子成员IL-6、IL-8在机体炎症和免疫调节过程中发挥重要作用〔8~10〕。IL-6 是机体内细胞产生的一种具有多种生物学活性的刺激因子，是机体复杂的细胞因子网络中的一个重要成员。IL-6在正常情况下调节免疫应答，在病理状态下其浓度的升高可引起免疫性病理损伤。IL-8是第一个被发现的有化学趋向作用的细胞因子，由多种参与炎症反应的细胞产生，如巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和内皮细胞等，其作用于嗜中性粒细胞趋化游走功能，加强炎症防护，促进T细胞趋化功能，加强免疫反应〔11,12〕。IL-8在慢性呼吸道炎症中起着关键作用，它可以激活中性粒细胞外形的改变、溶酶体酶的释放、超氧化物的产生和增加、黏附分子的表达。可见，以 IL-8为主要细胞因子导致的气道炎症已被认为是COPD 发病的重要机制之一〔13〕。

慢性支气管炎大鼠模型血清IL-6，IL-8释放增加，IL-6 又作用于血管内皮细胞，导致病理性损伤，促进疾病的发生与发展，与慢性阻塞性肺疾病炎症的形成和发展具有重要影响。而爱罗咳喘宁口服液可通过抑制IL-6，IL-8的释放而发挥其抗炎作用。爱罗咳喘宁口服液通过降低IL-6，IL-8含量，防止其对机体的进一步损害，控制炎症反应，此可能是爱罗咳喘宁口服液治疗COPD的作用机制之一。

4参考文献

1洪秀琴，戴爱国，孔春初.等.湖南部分地区慢性阻塞性肺疾病流行现状调查〔J〕.中国老年学杂志，2012；32(4)：795-7.

2张绍敏，孙丽，张俊丽.社区COPD流行病学调查及健康教育对策〔J〕.解放军护理杂志，2007；24(11A)：20-2.

3Hasday JD，McCrea KA，Meltzer SS，etal.Dysregulation of airway cytokine expression in chronic obstructive pulmonary disease and asthma 〔J〕.Am J Respir Crit CareMed，1994；150：s54-8.

4朱慧志，韩明向，丁小娟，等.多因素慢性阻塞性肺疾病大鼠模型的建立〔J〕.中国临床保健杂志，2005；8(2)：145-6.

5谢文英，张良芝，刘霖，等.爱罗咳喘宁口服液对慢性支气管炎大鼠白细胞介素-13 和肿瘤坏死因子-α含量的影响〔J〕.中国新药杂志，2012；21(5)：551-4.

6谢文英，常学辉，张良芝.爱罗咳喘宁汤治疗咳嗽变异性哮喘30例〔J〕.中医研究，2007；20(5)：35-8.

7谢文英，常学辉，张良芝.爱罗咳喘宁口服液对支气管哮喘患者白细胞介素2及白细胞介素13的影响〔J〕.中医杂志，2007；48(7)：614-5.

8雷国燕，雷章恒，钟红卫.中医药治疗COPD对IL-8、TNF-α影响的研究〔J〕.辽宁中医药大学学报，2012；14(3)：78-81.

9黄波贞.补肺益阳化痰中药对稳定期慢性阻塞性肺疾病患者痰液炎症细胞 IL-10、IL-8 的影响〔J〕.中国中医药现代远程教育，2010；8(22)：144-5.

10周兆山，胡海波，杨晓萍，等.固本颗粒胶囊对大鼠 COPD 模型血清 IL-8 及 TNF-α 影响的实验研究〔J〕.现代生物医学进展，2010；10(19)：3663-6.

11颜碧清，楼天正，徐俊龙，等.COPD患者急性发作期血清TNF-α、IL-6、IL-8变化及意义〔J〕.浙江中西医结合杂志，2004；14(6)：343-4.

12李淑岷.COPD患者血清中IL-6、IL-8、TNF-α的变化及其与分期之间的关系〔J〕.中国民康医学，2010；22(2)：95，107.

13黄修解，蒙定水，牛豫洁，等.双三口服液对实验 COPD 大鼠血清白细胞介素-8和肿瘤坏死因子-α的影响〔J〕.中国中医基础医学杂志，2010；16(5)：381-3.

〔2014-12-09修回〕

(编辑曹梦园)

Effect of Ailuokechuanning oral liquid on serum IL-6 and IL-8 in rat with chronic obstructive pulmonary disease

XIE Wen-Ying，ZHANG Liang-Zhi，CHANG Xue-Hui,etal.

Department of Diagnostics of Traditional Chinese Medicine,Henan Traditional Chinese Medicine College，Zhengzhou 450008，Henan,China

【Abstract】ObjectiveTo study the effect of Ailuokechuanning oral liquid on interleukin(IL)-6 and IL-8 in experimental rats' serums with chronic obstructive pulmonary disease (COPD).Methods60 SD male rats were randomly divided into normal control，model，Ailuokechuanning oral liquid( 5，10，20 ml·kg-1·d-1)，Zhikejuhong syrup control groups.COPD models were established by pouring lipopolysacchride(LPS)into trachea and putting rats into smoking environment twice a day.Levels of IL-6 and IL-8 in serum of rats were measured.ResultsThe levels of IL-6,IL-8 in rats′ serum of the model group were significantly higher than those in normal control group.The levels of IL-6,IL-8 of the rats treated with Ailuokechuanning oral liquid significantly decreased.ConclusionsThe mechanism of Ailuokechuanning oral liquid for treatment of COPD may be related to the inhibition of IL-6 and IL-8．

【Key words】Chronic obstructive pulmonary disease;Ailuokechuanning oral liquid;Interleukin-6;Interleukin-8

基金项目：国家自然科学基金面上项目(No.81573881)；河南省高等学校重点科研项目(15A360030)；河南省中管局项目(2013ZY02070)；郑州市科技领军人才项目(121PLTJRC535)

〔中图分类号〕R285.5

〔文献标识码〕A

〔文章编号〕1005-9202(2016)04-0786-02；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.04.007