桑葚提取液对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化能力的影响

邓秀婷　罗　姮　李彦彬　杨高群　徐远超　林秀澄　李朝敢

(右江民族医学院临床学院，广西　百色　533000)



桑葚提取液对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化能力的影响

邓秀婷罗姮李彦彬杨高群徐远超林秀澄李朝敢1

(右江民族医学院临床学院，广西百色533000)

摘要〔〕目的观察桑葚提取液对D-半乳糖致衰老小鼠超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量的影响。方法用D-半乳糖建立小鼠衰老模型，同时实验组分别灌胃给予不同剂量(2.0、4.0、6.0 g·kg-1·d-1)的桑葚提取液，给药40 d后处死小鼠，取血清及肝脏测定SOD、GSH-Px活性和MDA含量。结果桑葚提取液可以提高小鼠肝脏中的SOD、GSH-Px活性和降低MDA含量。低剂量桑葚提取液提高小鼠血清中的SOD、GSH-Px活性和降低MDA含量的作用较明显。结论桑葚提取液具有抗氧化延缓衰老的作用。

关键词〔〕桑葚提取液；D-半乳糖；抗氧化；抗衰老

1右江民族医学院生物化学教研室

第一作者：邓秀婷(1990-)，女，在读硕士，主要从事内分泌与代谢病研究。

《本草纲目》中记载，桑葚单食，止消渴，利五脏关节，通血气，久服不饥，安魂镇神，令人聪明，变白不老。现代药理研究也表明，桑葚含有丰富的维生素C、胡萝卜素、黄酮、硒等物质〔1〕，具有抗衰老、抗氧化、调节免疫、降脂、降血糖的作用〔2〕。抗衰老与自由基的清除有密切关系。随着年龄的增长，体内过量的自由基可通过氧化作用攻击细胞膜上的生物大分子引起细胞膜上一系列过氧化反应、DNA突变和生物酶活力下降，最终导致细胞功能受损以至衰老、死亡〔3〕。目前，国内对桑葚的研究多见于心血管系统方面，而对其抗氧化、抗衰老作用方面比较少见。本实验探讨桑葚的抗氧化和抗衰老作用。

1材料与方法

1.1药品、试剂与实验动物桑葚干购自国营正规中药店；超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)测定试剂盒由南京建成生物工程研究所提供；D-半乳糖由上海金穗生物科技有限公司提供；实验动物为昆明种小白鼠，体重(20±2)g，雌雄兼用，由右江民族医学院动物实验中心提供，许可证号为SCXR(桂)2003-0010号。

1.2动物分组、衰老模型的建立及给药动物适应环境3～4 d后，随机分成正常对照组、衰老模型组、桑葚提取液低、中、高剂量组，每组10只。除正常对照组外，其余各组动物每只按体重剂量150 mg/kg皮下注射D-半乳糖溶液，每日一次，正常对照组注射等量生理盐水。同时桑葚提取液低、中、高剂量组动物每只分别按体重桑葚生药2.0、4.0、6.0 g/kg 给予灌胃，每日1次，衰老模型组与正常对照组给予等量生理盐水灌胃，连续40 d。实验过程中每组意外死亡2只。

1.3血清中SOD、MDA、GSH-Px含量的测定从动物眼眶取血，37℃水浴静置30min， 3 000 r/min离心10 min，分离得血清，参照南京建成生物工程公司试剂盒说明书的方法步骤分别测定血清中SOD、MDA、GSH-Px的含量。

1.4肝脏SOD、MDA、GSH-Px的测定断椎处死动物，取肝脏，在4℃低温下操作，用生理盐水洗除多余血液，滤纸吸收多余水分，天平称重，用玻璃匀浆器匀浆，用生理盐水稀释成10%肝匀浆，3 000 r/min离心10 min，取上清液部分，按试剂盒说明书的方法步骤分别测定肝脏中SOD、MDA、GSH-Px的含量。

1.5统计学处理采用SPSS11.5软件行方差分析。

2结果

2.1桑葚提取液对D-半乳糖致衰老小鼠血清中SOD、GSH-Px活性和MDA含量的影响与正常对照组比较，衰老模型组、桑葚中剂量组血清SOD活性明显降低(P<0.01，P<0.05)；而桑葚低、中、高剂量组MDA含量明显降低(P<0.01)。与衰老模型组比较，桑葚低剂量组血清SOD活性明显升高(P<0.05)，而桑葚低、中、高剂量组MDA含量明显降低(P<0.01)。桑葚低、中、高剂量组GSH-Px活性与正常对照组、衰老模型组，无显著差异(P>0.05)。见表1。

表1　桑葚提取液对D-半乳糖致衰老小鼠血清SOD、

与正常对照组比较：1)P<0.05，2)P<0.01；与衰老模型组比较：3)P<0.05，4)P<0.01，下表同

2.2桑葚提取液对D-半乳糖致衰老小鼠肝脏中SOD、GSH-Px活性和MDA含量的影响与正常对照组比较，衰老模型组肝脏SOD、GSH-Px活性明显降低(P<0.05、P<0.01)；桑葚低、中、高剂量组肝脏SOD活性也明显降低(P<0.05、P<0.01)；桑葚高剂量组肝脏MDA含量、GSH-Px明显降低(均P<0.05)。与衰老模型组比较，桑葚低、中剂量组肝脏SOD的活性明显升高(P<0.01、P<0.05)，而桑葚高剂量组MDA含量明显降低(P<0.05)，桑葚低、中、高剂量组肝脏GSH-Px的活性明显升高(P<0.01、P<0.05)。见表2。

表2　桑葚提取液对D-半乳糖致衰老小鼠肝脏SOD、

3讨论

当今医学技术研究抗衰老机制中，自由基学说与线粒体DNA损伤学说占主要地位。自由基学说认为，在人体中不断产生自由基并存在有效的自由基清除系统，使自由基维持在正常水平。一旦这种平衡打破，过剩的自由基经常发生一系列的氧化反应，最终使细胞膜的功能受损，细胞活力下降，造成组织器官功能衰退，从而使机体进入衰老状态〔4〕。由此可见，清除自由基，抗氧化对于延缓衰老有明显作用。

桑葚中含有大量的维生素C、硒、胡萝卜素、黄酮等天然抗氧化成分，并具有提高免疫力，抗氧化，降血糖、降血脂的作用。这些作用可能与桑葚中富含的黄酮、维生素C有关。有文献报道〔5〕，维生素C具有减轻氧化损伤，保护mtDNA和氧化呼吸酶活力的作用，并借助此发挥抗氧化延缓衰老的功效。而黄酮类化合物则通过抑制脂质过氧化，提高抗氧化酶系统活性而间接产生抗自由基的作用〔6〕。

研究表明，D-半乳糖致衰老动物模型能够模拟动物老化过程，能使SOD、GSH-Px活性下降、MDA含量增加〔7〕。SOD因其能分解氧自由基，被称为人体的“清道夫”。GSH-Px主要依靠其还原作用，从而起到保护生物酶免受过氧化物损害的作用。MDA是脂质氧化分解的产物，其生成的多少可以间接地反映组织损伤程度〔4〕。所以测定SOD、GSH-Px、MDA有助于了解机体内衰老的情况。

本次实验结果表明，桑葚提取液具有提高血清和肝脏中SOD、GSH-Px活性、降低MDA含量的作用。桑葚低剂量治疗组在提高SOD、GSH-Px活性方面比桑葚中、高剂量治疗组可能要好一些，而在降低MDA含量方面，桑葚高剂量治疗组可能要好一些。从实验结果还可以看出，SOD、GSH-Px活性的增高和MDA含量的降低与桑葚提取液的剂量大小还没有表现出明显的量-效关系，桑葚提取液的剂量与抗氧化、抗衰老的效果之间的关系仍有待进一步实验研究。

综上，桑葚提取液具有一定抗氧化、延缓衰老的作用。目前国内对桑葚多数局限在药理作用的研究上，并未投入实际的生产应用中，如果能将其药用价值与保健价值相结合，桑葚的价值就能在更开阔的领域中得到发挥。

参考文献4

1郭长江，韦京豫，杨继军，等.66种蔬菜、水果抗氧化活性的比较研究〔J〕.营养学报，2003；25(2)：204-7.

2金杰，李志西，张锋，等.桑葚醋提取物抗氧化性的研究〔J〕.中国酿造，2005；151(1)：20-2.

3童坦君，张宗玉.衰老机制及其学说〔J〕.生物科学进展，2007；38(1)：14-7.

4王桔红，谢宗平.衰老机理及抗衰老研究进展〔J〕.河西学院学报，2003；2(2)：94-6.

5高志清，海春旭，王鹏，等.维生素C对D-半乳糖致亚急性衰老小鼠模型的影响〔J〕.中国老年学杂志，2007；27(4)：634-8.

6陆蓓，叶静灵，徐晓虹，等.柑桔黄酮对D-半乳糖衰老模型抗氧化作用〔J〕.中药新药与临床药理，2006；17(5)：343-6.

7雷鸣，朱祖建.D-半乳糖致衰老的研究进展〔J〕.解剖科学进展，2011；17(1)：83-5.

〔2014-04-17修回〕

(编辑安冉冉/曹梦园)

通讯作者：李朝敢(1963-)，男，教授，主要从事中草药抗衰老作用研究。

基金项目：2013年度广西壮族自治区级大学生创新训练计划立项项目(QJCX201305)

中图分类号〔〕R285.5〔

文献标识码〕A〔

文章编号〕1005-9202(2016)01-0036-02；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.01.016