蜂胶配伍姜黄抗高尿酸血症实验研究

陈璇，任泽明，童晔玲，戴关海，杨锋

浙江省中医药研究院基础实验研究所，浙江 杭州 310007

◆实验研究◆

蜂胶配伍姜黄抗高尿酸血症实验研究

陈璇，任泽明，童晔玲，戴关海，杨锋

浙江省中医药研究院基础实验研究所，浙江 杭州 310007

目的：观察蜂胶配伍姜黄对高尿酸血症模型小鼠血清尿酸（SUA）及黄嘌呤氧化酶（XOD）活性的影响。方法：实验设蜂胶配伍姜黄低、中、高剂量组，别嘌醇组、模型对照组、溶剂对照组和正常对照组，观察小鼠体重的变化及SUA水平、肝脏XOD的活性。结果：与模型对照组比较，蜂胶配伍姜黄高、中、低剂量组小鼠SUA水平和肝脏XOD活性呈现剂量依赖性下降，差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：蜂胶配伍姜黄具有降低高尿酸血症模型小鼠SUA水平及抑制XOD活性的作用。

抗高尿酸血症；蜂胶；姜黄；配伍

高尿酸血症是由于黄嘌呤氧化酶(XOD)活性出现异常导致嘌呤代谢紊乱，从而使尿酸生成过多或肾脏排泄障碍所致的代谢性疾病，其严重后果可导致痛风性关节炎和尿酸性肾损害[1]。随着人们生活水平的提高及饮食结构的改变，社会节奏的加快和运动时间的减少，高尿酸血症患病率呈上升趋势[2]。研究发现，高尿酸血症与心脑血管疾病、糖尿病、血脂紊乱、肥胖症等疾病密切相关[3]。目前，中医药治疗高尿酸血症越来越受到重视。由于中药材的成分较复杂，且各种中药材相互之间的复配效果很难预见，因此，需要不断地探索具有良好抗高尿酸血症作用的中药及其复方。本研究对蜂胶配伍姜黄抗小鼠高尿酸血症作用进行实验，结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样品 蜂胶(购自浙江福赐德生物科技有限公司，批号：141110)，姜黄提取物(购自宁波中药制药有限公司，批号：20141102)。以山茶油为溶剂将蜂胶和姜黄提取物配制成各剂量供试，即分别称取供试样品10.0 g、60.0 g和120.0 g加山茶油至60 mL，配制成浓度为0.17g/mL、1.00 g/mL和2.00 g/mL样品，作为供试液。另设姜黄提取物对照组1.00 g/mL，灌胃容积均为0.1 mL/10 g体重。

1.1.2 别嘌醇片 每片0.1 g，江苏方强制药厂有限责任公司生产，批号：201110302。

1.2 实验动物和检测条件 ICR种小鼠，雌雄各半，体重18～22 g，由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供，许可证：SCXK(沪)2008-0016。动物饲料由浙江省实验动物中心提供，执行标准：GB14924-2001。检测环境条件，温度范围20～23℃，相对湿度范围40%～70%。小鼠试验前在动物房环境中适应性饲养5天。

1.3 主要仪器与试剂 电子天平、721分光光度计、恒温水浴箱、手术器械等。酵母浸出汁，上海蓝季科技发展有限公司生产，批号：131008。盐酸乙胺丁醇片，杭州民生药业有限公司，批号：T11G515。尿酸检测试剂盒，宁波赛克生物技术有限公司生产，批号：20140412。黄嘌呤氧化酶(XOD)测试盒，南京建成生物工程研究所生产，批号：20140419。

1.4 实验方法

1.4.1 分组 实验小鼠共80只，适应性饲养5天后，随机分成8组，每组10只，雌雄各半，设蜂胶配伍姜黄低剂量组[0.17 g/(kg·d)]、蜂胶配伍姜黄中剂量组[1.00 g/(kg·d)]、蜂胶配伍姜黄高剂量组[2.00 g/(kg·d)体重]、姜黄提取物组[1.00 g/ (kg·d)]、阳性对照组(别嘌醇组)、模型对照组、溶剂对照组(山茶油)，同时设正常对照组。蜂胶配伍姜黄低、中、高3个剂量组，相当于人推荐量的5、30和60倍(人推荐量为[2.0 g/60 (kg·d)]。别嘌醇组灌胃别嘌醇片[0.3 g/(kg·d)]体重，相当于人推荐量的30倍(人推荐最高量为0.01g/60(kg·d)。各组灌胃相应受试物共21天，其中第8天起实验组小鼠分别灌胃30 g/ (kg·d)酵母浸出汁和0.25 g/(kg·d)乙胺丁醇，连续14天，造成高尿酸血症小鼠模型，造模期间各组同时继续灌胃相应受试物，并按常规饲养，每周称1次体重。

1.4.2 指标测定方法 末次给药后，小鼠空腹24 h，摘眼球取血，放置1 h，2000 r/min离心10 min，收集血清，按试剂盒说明书测定血清尿酸(SUA)含量。脱颈椎处死小鼠，取肝脏组织，匀浆，3500 r/min离心10 min，取上清液，按试剂盒说明书测定XOD。

1.5 实验数据统计 采用SPSS16.0统计软件分析，数据均以()表示，多组均数比较采用F检验，其中2组间比较，计量资料采用LSD-t检验，方差不齐时加做Dunnett T3检验。

2 结果

2.1 蜂胶配伍姜黄对高尿酸血症模型小鼠体重的影响 见表1。整个实验周期中，蜂胶配伍姜黄各组及其它受试物各组小鼠体重与模型对照组、溶剂对照组、正常对照组比较，差异均无统计学意义(P＞0.05)，实验开始至中期，别嘌醇组小鼠体重与其他各组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)，而到实验末期，别嘌醇组小鼠体重与正常对照组比较，体重下降，差异有统计学意义(P＜0.05)。提示别嘌醇对小鼠体重有影响。

表1 蜂胶配伍姜黄对高尿酸血症模型小鼠体重的影响()g

表1 蜂胶配伍姜黄对高尿酸血症模型小鼠体重的影响()g

与正常对照组比较，①P＜0.05

组别蜂胶配伍姜黄高剂量组蜂胶配伍姜黄中剂量组蜂胶配伍姜黄低剂量组姜黄提取物组别嘌醇组模型对照组溶剂对照组正常对照组开始2 5 . 0 ± 1 . 6 2 5 . 2 ± 1 . 4 2 4 . 8 ± 1 . 7 2 5 . 1 ± 1 . 8 2 4 . 9 ± 1 . 6 2 5 . 1 ± 1 . 7 2 4 . 9 ± 1 . 5 2 5 . 3 ± 1 . 8中期2 7 . 5 ± 2 . 0 2 8 . 7 ± 2 . 3 2 7 . 8 ± 2 . 5 2 7 . 4 ± 2 . 9 2 6 . 5 ± 2 . 6 2 8 . 4 ± 2 . 4 2 8 . 6 ± 2 . 7 2 8 . 3 ± 2 . 0结束2 8 . 5 ± 2 . 7 2 9 . 0 ± 2 . 9 2 8 . 8 ± 2 . 5 3 0 . 0 ± 2 . 4 2 6 . 7 ± 2 . 9①2 9 . 5 ± 2 . 7 2 9 . 8 ± 2 . 8 3 0 . 0 ± 2 . 3体重( g )

2.2 蜂胶配伍姜黄对高尿酸血症模型小鼠SUA、XOD含量的影响 见表2。蜂胶配伍姜黄高剂量组、蜂胶配伍姜黄中剂量组、蜂胶配伍姜黄低剂量组与模型对照组比较，SUA含量下降，差异有统计学意义(P＜0.05)。而姜黄提取物组SUA含量与模型对照组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。提示蜂胶配伍姜黄具有降低小鼠血液高尿酸血症的作用。模型对照组与正常对照组比较，小鼠肝XOD活性增加，差异有统计学意义(P＜0.05)。蜂胶配伍姜黄高、中、低剂量组，别嘌呤醇组的XOD活性与模型对照组比较，均降低，差异均有统计学意义(P＜0.05)。姜黄提取物组亦可使小鼠肝XOD活性降低，但差异无统计学意义(P＞0.05)。提示大剂量灌胃酵母浸出汁和乙胺丁醇使小鼠体内尿酸上升，肝脏XOD活性增加，而蜂胶配伍姜黄及别嘌醇均具有抑制XOD活性的作用。

表2 蜂胶配伍姜黄对高尿酸血症模型小鼠SUA、XOD含量的影响()

表2 蜂胶配伍姜黄对高尿酸血症模型小鼠SUA、XOD含量的影响()

与模型对照组比较，①P＜0.05

组别蜂胶配伍姜黄高剂量组蜂胶配伍姜黄中剂量组蜂胶配伍姜黄低剂量组姜黄提取物组别嘌醇组模型对照组溶剂对照组正常对照组S U A ( μ m o l / L ) 6 8 . 5 ± 2 7 . 9①7 2 . 5 ± 2 5 . 1①7 5 . 2 ± 2 3 . 9①8 7 . 0 ± 2 6 . 2 6 5 . 4 ± 2 2 . 5 1 0 4 . 3 ± 2 9 . 9 1 0 0 . 5 ± 2 9 . 8 6 1 . 7 ± 1 4 . 2 X O D ( U · g-1) 1 6 . 5 ± 4 . 0①1 8 . 4 ± 4 . 1①1 9 . 9 ± 4 . 3①2 4 . 9 ± 4 . 7 7 . 1 ± 2 . 0①3 0 . 1 ± 4 . 9 2 7 . 8 ± 4 . 2 1 3 . 9 ± 3 . 1①

综上，与模型对照组比较，蜂胶配伍姜黄高、中、低剂量组小鼠SUA水平和肝脏XOD活性呈现剂量依赖性下降。

5 讨论

蜂胶是蜜蜂集植物树脂，并混入其唾液腺分泌物及蜂蜡、花粉等经咀嚼加工而成的一种黏稠物质，具有护肝、抗肿瘤、抗氧化、抗微生物、抗炎等药理作用[4]，此外，蜂胶还可降低高尿酸血症模型小鼠血液尿酸[5]。姜黄为姜科植物姜黄Curcuma longa L.的干燥根茎，味辛、苦、温，归脾、肝经，是常用的活血化瘀药，具有破血行气、通经止痛之功效。临床用于风湿痹痛、跌扑肿痛、筋脉拘挛、骨节酸痛等的治疗。中医临床常与其它中药配伍用于降尿酸和抗痛风的治疗。蜂胶和姜黄配伍具有抗高尿酸血症作用潜力。本实验研究结果示：蜂胶配伍姜黄各组小鼠体重与模型对照组、溶剂对照组、正常对照组比较，差异均无统计学意义(P＞0.05)，而别嘌醇组与正常对照组比较，体重下降(P＜0.05)。提示别嘌醇对小鼠体重有影响，这可能与别嘌醇具有较大副作用，如胃肠道刺激所致的呕吐、食欲不振，肝肾损害等有关。模型对照组和溶剂对照组与正常对照组比较，SUA含量升高，差异有统计学意义(P＜0.05)，提示造模成功。蜂胶配伍姜黄高、中、低剂量组与模型对照组比较，SUA含量下降，差异有统计学意义(P＜0.05)，提示蜂胶配伍姜黄有降低小鼠血液高尿酸血症的作用。模型对照组和溶剂对照组与正常对照组比较，肝XOD活性升高，差异均有统计学意义(P＜0.05)；蜂胶配伍姜黄各剂量组和别嘌醇组与模型对照组比较，肝XOD活性降低，差异有统计学意义(P＜0.05)，提示蜂胶配伍姜黄和别嘌醇具有抑制XOD活性的作用。姜黄提取物组提取物有一定的降SUA和XOD的作用，但作用不显著，差异无统计学意义(P＞0.05)。结果提示，蜂胶配伍姜黄有降低高尿酸血症模型小鼠血尿酸及XOD活性的作用，其作用要优于单味中药——姜黄提取物。本研究为蜂胶配伍姜黄的抗高尿酸血症相关临床应用和药物开发提供依据。

[1]邱朝晖，曹奕.高尿酸血症与高血压的关系[J].国外医学：心血管疾病分册，2001，28(1)：9-11.

[2]李京，赵心童，胥欣，等.高尿酸血症与代谢综合征相关关系的研究[J].现代预防医学，2014，41(14)：2671-2673.

[3]陈光亮，徐叔云.高尿酸血症研究进展[J].中国药理学通报，2003，19(10)：1088-1092.

[4]李雅晶，冯磊，胡福良，等.纳米蜂胶对实验性高脂血症大鼠脂质代谢的影响[J].中国药学杂志，2007，42 (12)：903-906.

[5]Yoshizumi K，Nishioka N，Tsujj T.Xanthine oxidase inhibitory activity and hypouricemia effect of propolis in rats[J].Yakugaku Zassh，2005，125(3)：315.

（责任编辑：刘淑婷）

Experimental Study of Propolis Combined with Curcuma on Anti-hyperuricaemi

CHEN Xuan，REN Zeming，TONG Yeling，DAI Guanhai，YANG Feng

Objective：To observe the influence of propolis combined with curcuma on the activity of Uric Acid(UA)and xanthine oxidase(XOD)in hyperuricaemia mice model.Methods：The mice were randomly divided into 7 groups，including low，middle and high dose of propolis combined with curcuma group，allopurinol group，hyperuricaemia model control group，camellia oil control group and normal control group.The body weight，UA level and XOD activity in liver were observed for all mice in each group.Results：Compared to hyperuricaemia model control group，UA level and XOD activity in liver of mice of the three doses of propolis combined with curcuma groups received significantly dose-dependent decrease.Conclusion：Propolis combined with curcuma can reduce UA level and XOD activity in liver in hyperuricaemia mice model.

Anti-hyperuricaemia；Propolis；Curcuma；Compatibility

R285.5

A

0256-7415（2016）02-0233-03

10.13457/j.cnki.jncm.2016.02.090

2015-10-29

浙江省科技厅资助项目（2014F50029）；浙江省科技厅资助项目（2015F10015）

陈璇（1984-），女，博士，助理研究员，研究方向：中医药机理研究。

杨锋，E-mail：13858088332@163.com。