方刺参酒补肾壮阳作用的实验研究

（广西医科大学药学院，广西南宁530021）

方刺参酒补肾壮阳作用的实验研究

阮氏锦秀，廖遥灵，罗 俊，杨 斌

（广西医科大学药学院，广西南宁530021）

［目的］观察方刺参酒的补肾壮阳作用，为其应用和开发提供科学实验依据。［方法］①取SPF级SD雄性大鼠60只，去势3 d后将其随机分为6组：模型对照组，溶媒对照组，阳性对照组，方刺参酒高、中、低剂量组，每组10只；另取10只不去势不做任何处理作为正常对照组。每组连续给药21 d，第21 d给药1 h后，将YLS-9A生理、药理电子刺激仪的刺激电极置于大鼠阴茎部位，观察大鼠阴茎勃起功能及对附性器官脏器指数的影响；②取SPF级SD雄性大鼠60只，随机分成6组：正常对照组，阳性对照组，溶媒对照组，方刺参酒高、中、低剂量组，每组10只，每日给药1次，连续28 d。于末次给药1 h后，进行交配实验，记录雄性大鼠扑捉潜伏期、扑捉次数、射精潜伏期及射精次数。［结果］去势后的大鼠包皮腺、精囊腺+前列腺、提肛肌的脏器指数均显著降低，垂体、肾上腺、胸腺等脏器指数显著提高，与正常对照组比较差异显著（P<0.05或P<0.01），但方刺参酒无明显促进这些器官发育的作用；与模型对照组比较，方刺参酒高、中剂量组可显著缩短大鼠阴茎勃起潜伏期（P<0.05或P< 0.01）；与正常对照组比较，方刺参酒中、低剂量组可明显缩短扑捉潜伏期和射精潜伏期（P<0.05），明显增加射精次数（P<0.05或P<0.01）。［结论］方刺参酒可明显提高生殖反射阈值及兴奋水平，具有一定的补肾壮阳作用。

方刺参酒；补肾壮阳；交配试验；实验研究

方刺参酒是由北海博铧医院提供的一种自制药酒，内含海参、牡蛎、山药、党参、枸杞子等中药，具有提高性功能、调节性激素分泌紊乱及免疫调节等作用，主治阳痿、性功能下降等。方刺参酒在市面上已有销售，但动物实验资料尚不够丰富，因此本研究探讨方刺参酒的补肾壮阳作用，旨为其应用和开发提供科学实验依据。

1 实验材料

1.1 动物SPF级SD大鼠，由广西医科大学实验动物中心提供。实验动物生产许可证号：SCXK桂2014-0002；实验动物使用许可证号：SYXK桂2014-0003。

1.2 药品与试剂方刺参酒（北海博铧医院提供，酒精度38度，批号：20151202）；注射用青霉素钠（华北制药股份有限公司，批号：H13020657）；丙酸睾酮注射液（上海通用药业股份有限公司，批号：H31020524）；桂林三花酒（酒精度38度，桂林三花股份有限公司，批号：GB/T10781.3）；黄体酮注射液（广州白云山明兴制药有限公司，批号：150804）。

1.3 仪器YLS-9A生理、药理电子刺激仪的刺激电极（济南益延科技发展有限公司，批号：201104102）。

2 方法

2.1 对去势大鼠阴茎勃起潜伏期的观察取60只雄性大鼠，体重60～80 g，雄性大鼠在10%水合氯醛腹腔注射（ip）麻醉下，消毒阴囊皮肤，摘除双侧睾丸，术后肌注青霉素钠2万U/kg预防感染。去势3 d后，将其随机分为6组：模型对照组，溶媒对照组，阳性对照组，方刺参酒高、中、低剂量组，每组10只。模型对照组灌胃给予生理盐水（5 ml/kg），溶媒对照组灌胃给予桂林三花酒（5 ml/kg），阳性对照组皮下注射丙酸睾酮注射剂（0.2 mg/kg），方刺参酒高（10 ml/kg）、中（5 ml/kg）、低（2.5 ml/kg）剂量组灌胃给予相应剂量的方刺参酒，每日1次，连续21 d。此外另取10只雄性大鼠，不做任何处理，与其它各组大鼠同期饲养观察，作为正常对照组。第21 d给药1 h后，将YLS-9A生理、药理电子刺激仪的刺激电极置于大鼠阴茎部位，给予局部电刺激，电流强度为0.2 mA，波宽为100 ms，电压为150 mV，记录自刺激开始至阴茎勃起时间（勃起潜伏期）。

2.2 对去势大鼠相关附性器官脏器指数的测量分组与给药途径同2.1项，连续给药21 d，末次给药24 h后，动物处死，迅速取包皮腺（双侧）、精囊腺+前列腺、提肛肌、垂体、肾上腺、胸腺、脾脏，用电子天平称湿重，计算脏器指数。

2.3 大鼠交配实验取体重200～270 g健康成年雄性大鼠60只，随机分成6组：正常对照组，溶媒对照组，阳性对照组、方刺参酒高、中、低剂量组，每组10只。模型对照组灌胃给予生理盐水（5 ml/kg），溶媒对照组灌胃给予桂林三花酒（5 ml/ kg），阳性对照组皮下注射丙酸睾酮注射剂（0.2 mg/kg），方刺参酒高（10 ml/kg）、中（5 ml/kg）、低（2.5 ml/kg）剂量组灌胃给予相应剂量的方刺参酒，每日1次，连续28 d。另取60只健康成年雌性大鼠，体重200～270 g，交配前4 h每只皮下注射黄体酮注射液500 μg。交配试验观察方法［1］：将雄性大鼠单独放入55 cm×35 cm×20 cm笼中5 min，使其能够适应新的环境，然后放入雌性大鼠1只；开始记录下列指标：①自雌鼠投入至雄性大鼠第一次扑捉雌鼠的时间（扑捉潜伏期）；②20 min内雄鼠扑捉雌鼠或爬背的动作次数（扑捉次数）；③雄鼠自爬背成功后出现舔阴茎的时间（射精潜伏期）；④20 min内雄鼠扑捉雌鼠或爬背成功后出现舔阴茎的次数（射精次数）。

2.4 统计方法采用SPSS 20.0统计软件进行数据分析。计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间差异采用方差分析，以P<0.05为具有统计学意义。

3 结果

3.1 对去势大鼠阴茎勃起潜伏期的影响见表1。

表1 对去势大鼠阴茎勃起潜伏期的影响（±s）

表1 对去势大鼠阴茎勃起潜伏期的影响（±s）

注：与模型对照组比较，①P＜0.05，②P＜0.01；与溶媒对照组比较，③P＜0.05

组别n剂量勃起潜伏期（s）正常对照组10-12.12±3.94模型对照组10-18.20±10.11溶媒对照组105 ml/kg11.56±5.15阳性对照组100.2 mg/kg6.71±3.23②③方刺参酒高剂量组1010 ml/kg7.33±2.94②③方刺参酒中剂量组105 ml/kg10.18±4.56①方刺参酒低剂量组102.5 ml/kg12.35±4.88

表1结果显示，与模型对照组比较，阳性对照组和方刺参酒高、中剂量组均能明显缩短大鼠勃起潜伏期（P<0.01或P< 0.05），具有统计学意义；方刺参酒低剂量组有缩短大鼠阴茎勃起潜伏期的趋势；与溶媒对照组比较，阳性对照组及方刺参酒高剂量组均可缩短大鼠阴茎勃起潜伏期（P<0.05），具有统计学意义。结果表明方刺参酒具有提高大鼠性兴奋作用。

3.2 对去势大鼠相关附性器官脏器指数的影响见表2。

表2结果显示，与模型对照组比较，正常对照组和阳性对照组包皮腺、精囊腺+前列腺、提肛肌的脏器指数明显升高（P<0.05或P<0.01），方刺参酒中剂量组、溶媒对照组包皮腺脏器指数明显高于模型对照组（P<0.05），方刺参酒高、低剂量组精囊腺+前列腺脏器指数明显低于模型对照组（P<0.05或P<0.01），但方刺参酒高、中、低剂量组对提肛肌脏器指数无明显影响（P＞0.05）；与溶媒对照组比较，方刺参酒低剂量组包皮腺有统计学意义（P<0.05），高、中剂量组包皮腺、精囊腺+前列腺、提肛肌的脏器指数均无明显差异（P＞0.05）。结果表明去势后模型大鼠包皮腺、精囊腺+前列腺、提肛肌的脏器指数均显著降低，方刺参酒无明显提高器官指数的作用。与模型对照组比较，正常对照组垂体、肾上腺、胸腺脏器指数明显降低（P<0.05或P<0.01），阳性对照组肾上腺脏器指数明显增高（P<0.05），方刺参酒高剂量组胸腺脏器指数明显降低（P＜0.05），方刺参酒低剂量组的脾脏脏器指数明显增高（P<0.01）；与溶媒对照组比较，除方刺参酒高剂量组的胸腺脏器指数明显低于溶媒对照组（P<0.01）外，其余均无明显差异（P＞0.05）。结果表明去势后大鼠的垂体、肾上腺、胸腺脏器指数明显增高，可能是由于大鼠去势后，通过垂体-腺体轴反馈调节，代偿性增生所致。

3.3 对大鼠交配能力的影响见表3。

表2 对去势大鼠相关附性器官脏器指数的影响（mg/g±s）

表2 对去势大鼠相关附性器官脏器指数的影响（mg/g±s）

注：与模型对照组比较，①P＜0.05，②P＜0.01；与溶媒对照组比较，③P＜0.05，④P＜0.01

包皮腺精囊腺+前列腺提肛肌正常对照组10-0.44±0.10①3.40±0.43②④1.97±0.30②④模型对照组10-0.34±0.09③0.48±0.15③0.80±0.06溶媒对照组105 ml/kg0.46±0.13①0.35±0.06①③0.79±0.07阳性对照组100.2 mg/kg0.43±0.05①1.73±0.23②④1.73±0.23②④方刺参酒高剂量组1010 ml/kg0.36±0.120.32±0.05②0.75±0.12方刺参酒中剂量组105 ml/kg0.43±0.06①0.40±0.070.91±0.19方刺参酒低剂量组102.5 ml/kg0.36±0.06③0.37±0.08①0.75±0.09组别n剂量垂体肾上腺胸腺脾脏正常对照组10-0.04±0.01①③0.21±0.03②④3.09±0.32②④3.36±0.68模型对照组10-0.06±0.010.29±0.044.44±0.723.10±0.33溶媒对照组105 ml/kg0.06±0.010.29±0.064.76±0.573.28±0.55阳性对照组100.2 mg/kg0.06±0.010.34±0.04①4.36±0.683.17±0.40方刺参酒高剂量组1010 ml/kg0.05±0.020.29±0.063.73±0.67①④2.99±0.43方刺参酒中剂量组105 ml/kg0.06±0.010.33±0.044.76±1.133.25±0.62方刺参酒低剂量组102.5 ml/kg0.06±0.010.30±0.044.20±0.693.63±0.28②组别n剂量

表3 对大鼠交配能力的影响（s）

表3 对大鼠交配能力的影响（s）

注：与正常对照组比较，①P＜0.05，②P＜0.01；与溶媒对照组比较，③P＜0.05，④P＜0.01

组别n剂量扑捉射精潜伏期（s）次数潜伏期（s）次数正常对照组10-278.7±102.110.2±4.7553.8±166.43.2±1.3溶媒对照组105 ml/kg194.0±78.37.6±4.7618.3±170.02.5±1.3阳性对照组100.2 mg/kg130.8±55.6②22.0±10.9②④209.3±17.2②④11.3±6.3①③方刺参酒高剂量组1010 ml/kg136.8±31.9①5.4±1.1①417.3±69.22.0±1.0①方刺参酒中剂量组105 ml/kg158.2±54.0①9.8±1.5224.3±72.1①③7.5±1.9②④方刺参酒低剂量组102.5 ml/kg179.5±76.1①11.6±3.2291.3±54.4①③8.0±3.6①③

表3结果显示，与正常对照组比较，方刺参酒中、低剂量组可明显缩短扑捉潜伏期和射精潜伏期（P<0.05），明显增加射精次数（P<0.01或P<0.05）；方刺参酒高剂量组虽能明显缩短扑捉潜伏期（P<0.05），射精潜伏期也有一定的缩短趋势，但扑捉次数和射精次数明显减少（P<0.05）；与溶媒对照组比较，方刺参酒中、低剂量组可明显缩短射精潜伏期（P<0.05），明显增加射精次数（P<0.01或P<0.05）。结果表明方刺参酒在一定剂量范围可明显缩短射精潜伏期，增加射精次数，具有提高性功能作用，但剂量过大反而被抑制。

4 讨论

近年来关于补肾中药的药理作用和临床研究有不少报道，主要集中在补肾壮阳、激素水平的调节、免疫系统的调节、对骨结构的影响等方面［2］。补肾中药在激素水平上的调节主要体现在对下丘脑-垂体-性腺轴等的调节上，现在药理研究表明，大鼠去势后，性能力会逐渐丧失，阴茎勃起潜伏期延长，性激素水平降低，血清中睾酮和皮质酮等含量会下降［3］。扑捉是一种性交活动，与雄性大鼠阴茎的勃起直接相关，阴茎插入是一种感觉刺激过程，射精是感觉刺激达到一定阈值时唤起生殖反射活动的极点，射精潜伏期越短，表明激发射精的敏感性越大。因此，射精潜伏期提供了一个生殖反射阈值及兴奋水平的间接手段［4］。

本实验对雄性大鼠去势后造成肾阳虚模型，结果表明，方刺参酒高、中剂量组能显著缩短去势大鼠阴茎勃起潜伏期，提高去势大鼠阴茎对外部刺激的兴奋性；去势后的模型大鼠包皮腺、精囊腺+前列腺、提肛肌的脏器指数均显著降低，说明大鼠去势后因性激素分泌减少，阴茎、提肛肌、精囊腺+前列腺等主要性器官的发育受阻，质量有所减轻，而方刺参酒无明显促进这些器官发育的作用；去势后大鼠的垂体、肾上腺、胸腺脏器指数明显增高，可能是由于大鼠去势后，通过垂体-腺体轴反馈调节，代偿性增生所致。

正常雄性大鼠的交配能力可由一定时间内雄鼠扑捉潜伏期的长短、扑捉次数、射精潜伏期的长短和射精次数等方面来反映。本研究通过雌激素诱导的发情期雌鼠和正常雄性大鼠交配模型考察方刺参酒壮阳作用。交配试验结果表明，与正常对照组比较，方刺参酒中、低剂量组明显缩短扑捉潜伏期和射精潜伏期，明显增加射精次数；高剂量组有明显缩短扑捉潜伏期，并有一定缩短射精潜伏期的趋势，但扑捉次数和射精次数明显减少。根据交配结果试验可知方刺参酒在一定剂量范围可明显缩短大鼠扑捉潜伏期、射精潜伏期，提高扑捉次数和射精次数，但剂量过大反而被抑制，可能原因是方刺参酒相对于大鼠来说酒精度过高（38度），过量对中枢神经产生抑制所致。

综上所述，方刺参酒具有提高生殖反射阈值及兴奋水平的作用，至于方刺参酒的作用机制及如何提高其工艺，有待于进一步研究。

［1］关业枝，梁荣辉，吴青业，等.芪茸保健酒补肾壮阳作用的实验研究［J］.今日药学杂志，2011，21（2）：91-93.

［2］宋根伟，张晓燕，姚霜，等.补肾中药的药理作用研究概况［J］.山西医药杂志，2011，40（8）：787-789.

［3］杨香瑜，张松.三子强肾混悬颗粒补肾壮阳及抗疲劳作用的研究［J］.中国药师学报，2013，16（12）：1764-1767.

［4］王忠山，许宗革，左文静，等.青春期糖尿病鼠性腺重量及性行为观察［J］.中国男科学杂志，1996，10（2）：86-89.

（编辑 陈明伟）

The Experimental Research of Fangcishen Wine on Pharmacological Activities of Tonifying the kidney and Invigorating Yang

RUANSHI Jin－xiu，LIA O Yao－ling，LUO Jun，YANG Bin
（Department of Pharmacology，Guangxi Medical University，Nanning，Guangxi，530021）

［Objective］To study the pharmacological activities of Fangcishen wine for tonifying the kidney and Yang so as toprovide scientific experimental basis for its application and development.［Methods］①SPF－SD male rats were castrated 3 days later and then were randomly divided into 6 groups：model group，solvent group，positive control group and Fangcishen wine groups in high，medium and low doses with 10 rats for each group.The other 10 rats without any treatment for castration were taken as he control group.Each group was administered a continuous treatment for twenty－one days.After one hour of administration on the twentyfirst day，the stimulating electrodes of physiological and pharmacological electronic－stimulation－instrument named YLS－9A were placed at the rat penises to observe the erectile function of rats and the influence of the accessory sex organ index；②SPF－SD male rats were randomly divided into 6 groups：control group，positive control group，solvent group and Fangcishen wine groups in high，medium and low doses with 10 rats for each group.Each group was administered 1 times daily for 28 consecutive days.After one hour of the last administration，the mating experiment was conducted to record the latent period，the number of capture，the latency of ejaculation and the frequency of ejaculation.［Results］The index of visceral gland，seminal vesicle，prostate and levator ani muscle were significantly decreased in castrated rats，and the indexes of pituitary，adrenal gland and thymus were significantly increased compared with those of control group（P＜0.05 or P＜0.01）.Fangcishen wine had no significant role in promoting the development of these organs.The high－dose and the medium－dose of Fangcishen wine groups can significantly shorten the rat penis erection latency compared with those of model group（P＜0.05 or P＜0.01）.The medium－dose and the low－dose of Fangcishen wine groups can significantly shorten the capturing latency and ejaculation latency（P＜0.05），and markedly increased ejaculation frequency compared with those of control group（P＜0.05 or P＜0.01）.［Conclusion］Fangcishen wine，which has a certain role in tonifying kidney and invigorating Yang，can significantly improve the genital reflex threshold and exciting level.

Fangcishen wine；tonifying kidney and invigorating Yang；mating experiment；experimental research

R285.5

A

2095-4441（2016）04－0005－04

2016－10－26

杨斌，教授，硕士研究生导师，E-mail:81960722@qq.com