慢性牙周炎患者病损局部Th1和Th17细胞表达

陈玮粲，李晔

(保定市第一中心医院，河北 保定 071000)



慢性牙周炎患者病损局部Th1和Th17细胞表达

陈玮粲，李晔

(保定市第一中心医院，河北 保定 071000)

目的：研究慢性牙周炎患者病损局部的Th1细胞及Th17细胞表达情况，为临床诊治牙周炎提供参考。方法：选择2013年2月至2015年7月本院收治慢性牙周炎患者70例作为实验组，同期在本院进行体检的健康者70例作为对照组，对两组被检者均给予龈沟液标本采集，观察Th细胞相关因子IFN-γ、TNF及IL-17表达情况并进行对比。结果：慢性牙周炎患者中，Th1细胞IFN-γ表达为(0.19±0.05)，高于对照组(P<0.05)；TNF表达为(0.33±0.05)，高于对照组(P<0.05)；Th17细胞中IL-17为(0.58±0.12)pg/μL，高于对照组(P<0.05)，差异有统计学意义。结论：慢性牙周炎患者病损局部均有Th1和Th17细胞高表达，提示Th1细胞及Th17细胞可能是导致牙周炎发生的关键因子，共同发挥致病作用。

慢性牙周炎；牙周炎；Th1细胞；Th17细胞

牙周炎是一种发生在牙周组织的疾病，为感染性病变，包括有慢性牙周炎及侵袭性牙周炎等。慢性牙周炎可以发生在各个年龄段，且多为成年人，在35岁以上发病率有显著升高，炎症程度与局部刺激因素基本一致[1]。慢性牙周炎患者临床表现主要为牙龈炎症，并伴有牙周附着丧失和牙槽骨吸收，严重的患者还会出现有牙齿移位及松动，最终导致牙齿缺失[2]。导致慢性牙周炎发病的原因尚不清楚，既往临床认为是致病菌导致疾病发生，但是也存在微生物感染解释不清的情况[3]。为更好地研究慢性牙周炎的发病原因，本文选择2013年2月至2015年7月保定市第一中心医院收治的70例慢性牙周炎患者作为实验对象，给予龈沟液标本采集，观察Th细胞相关因子对慢性牙周炎患者的影响，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 资料

选择2013年2月至2015年7月保定市第一中心医院收治的70例慢性牙周炎患者作为实验组，同期在我院进行体检的70例健康者作为对照组。

慢性牙周炎入选标准：患者口腔卫生较差，有牙龈的颜色、形状和性质的变化，至少有1个位点探诊深度在4 mm以上，临床附着丧失为4 mm以上，余留牙在14个以上，经过X线显示患者有牙槽骨的吸收[4]。排除标准：侵袭性牙周炎，合并糖尿病，合并高血压及类风湿性关节炎，合并全身系统疾病，妊娠期及哺乳期，近半年内有牙周治疗病史，近3个月内服用有抗生素等药物，吸烟。

健康者入选标准：全口牙探诊深度在3 mm以下，无附着丧失，无免疫系统疾病，无病毒及细菌感染，无恶性肿瘤，无吸烟等。实验经过伦理委员会批准，且患者知情同意。两组患者一般资料见表1，P>0.05，具有可比性。.

表1 慢性牙周炎患者及健康者一般资料比较(n=70)

1.2 方法

对所有被检者均给予龈沟液的检查。使用25号吸潮纸消毒灭菌后，称重。使用手工洁治器对牙面菌斑去除后，在牙周袋的最深点进行性采样。试纸尖要沿着牙面轻轻地插入到牙周袋，遇到阻力后要停留半分钟，取出后称重，并记录。如果有血液和唾液污染则弃掉。对慢性牙周炎患者要选取牙周病牙，健康者随机选取任意牙。使用ELISA法检测对细胞因子Th1及Th17细胞因子检测[5]。实验试剂及器材：ELISA试剂盒(上海裕平生物科技公司生产)、恒温箱、标准规格酶标仪、精密移液器、蒸馏水、一次性试管、吸水纸。实验方法：①标准品稀释及加样：测样品孔中加入50 μL的稀释液和10 μL的样品进行稀释；②孵育及洗板：封膜，恒温箱孵育30 min(37 ℃)后用洗板机洗板3～4次，每次之间静置15 s；再加入50 μL酶标试剂恒温箱孵育30 min(37 ℃)后，继续用洗板机洗板3～4次，静置时间同上；③显色与终止：依次加入A和B显色剂液(各50 μL)，混匀，暗室(室温20 ℃)放置15 min后，加入50 μL的终止液。15 min内使用酶标仪读取OD值，并计算出待测指标，Th1细胞包括：IFN-γ及TNF；Th17细胞指：IL-17的浓度。

1.3 数据处理

2 结果

慢性牙周炎患者中，Th1细胞IFN-γ表达为(0.19±0.05)pg/μL，高于对照组(P<0.05)；TNF表达为(0.33±0.05)pg/μL，高于对照组(P<0.05)；Th17细胞中IL-17为0.58±0.12 pg/uL，高于对照组(P<0.05)，差异有统计学意义。见表2。

表2 慢性牙周炎与健康者龈沟液标本中Th1和Th17细胞表达情况(n=70)

3 讨论

3.1 慢性牙周炎概述

牙周炎是牙周支持组织的一种感染性的病变，是导致成年人牙缺失的一个主要因素，并与心血管、糖尿病等多个系统疾病相关。临床研究发现牙槽骨吸收主要是由于龈沟内和牙周袋的龈下菌斑及产物释放了过多的炎性介质及细胞因子，相互作用引发炎症的发生[6]。

慢性牙周炎为临床常见的一种牙周炎，其中以牙龈炎症、慢性炎症性疾病及牙槽骨的吸收为主要的临床表现，在35岁以后人群的发病率会有明显的升高[7]。此疾病的起病缓慢，活动期与静止期会交替出现，在静止期，其主要表现为炎症的反应减轻，且骨吸收及附着丧失停止；而在活动期，骨吸收和附着丧失明显加快，牙周袋加深。静止期和活动期交替出现。

既往临床认为，细菌是导致牙周炎发生的主要因素，而随着临床对有牙龈组织、龈沟液的重视，有关炎性介质、免疫反应等逐渐引起重视。

3.2 辅助性T淋巴细胞

T淋巴细胞为免疫系统中的一个高度异质性的群体。其中辅助性T淋巴细胞为T淋巴细胞的分类，并与微生物所引起的感染性病变有密切的关系，其能够辅助其他免疫细胞的分化，并具有较好的调节免疫应答的效果，能够产生不同的细胞因子。

辅助性T淋巴细胞根据其所产生细胞因子的不同，分为Th1细胞、Th2细胞及Th17细胞，并均来自于Th0细胞。辅助性T淋巴细胞的分化与自身的基因调节、细胞因子调节和趋化因子调节及信号通路有关，并由T-bt、GATA-3及孤核受体RORγt所决定。不同细胞亚群之间可以相互抑制和共生，并发挥各自的功能[8]。

3.3 慢性牙周炎患者Th1和Th17细胞表达

Th1细胞因子可以加重牙周组织的炎症，并增加牙槽骨的破坏程度，当机体被异己抗原供给，Th1细胞因子可能会出现功能升高，出现漂移。且牙周破坏主要是由于局部环境中Th1与Th2的应答失衡，表现为Th1细胞的功能亢进[9-10]。

Th17主要在于牙周病组织的破坏阶段，其能够诱导细胞释放炎症因子，并动员中性粒细胞因子，进而发挥作用。且Th17破坏作用较大，其可以作为一个专门的破骨细胞源性淋巴细胞，并将骨吸收与T细胞活化相联系[11]。

本次实验研究分析了慢性牙周炎与健康者的龈沟液Th1及Th17细胞。慢性牙周炎患者中，Th1细胞IFN-γ表达为(0.19±0.05)pg/μL，高于对照组的(0.11±0.03)pg/μL，P<0.05；TNF表达为(0.33±0.05)pg/μL，高于对照组的(0.24±0.06)pg/μL，P<0.05；Th17细胞中IL-17为(0.58±0.12)pg/μL，高于对照组的15.060 pg/μL，P<0.05，差异有统计学意义。这说明患者的免疫系统被打破，患者炎性细胞因子增加，促炎/抑炎平衡出现失调，T细胞的网络平衡受到破坏。

高Th1与Th17的应答建立会抑制Th2的反应。我们认为，在慢性牙周炎患者初期阶段，宿主反应多为保护性，可以防止细菌侵入到牙周组织深层，但是由于抗原的持续刺激，T细胞增生，会释放淋巴因子，导致宿主组织的进一步损伤，且由于菌斑持续存在，反应持续时间长，炎症控制差，导致了牙周炎的局部炎症进展。

综上所述，慢性牙周炎患者病损局部均有Th1和Th17细胞高表达，提示Th1细胞及Th17细胞可能是导致牙周炎发生的关键因子，共同发挥致病作用。

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[2] 王惠,孙淑贞,陈丽艳.牙周基础治疗对慢性牙周炎合并代谢综合征患者血脂及血清脂蛋白相关磷脂酶A2的影响[J].实用口腔医学杂志,2014,30(4):547-550.

[3] 李娟,靳华.类胰蛋白酶和TIM-3双阳性肥大细胞在人不同程度牙周炎组织中的量化研究[J].实用口腔医学杂志,2014,30(4):482-486.

[4] 朱建华,杨艳飞.α通过血清中TNF-α、IL-17、IL-23的水平研究慢性牙周炎和类风湿性关节炎的相关性[J].口腔医学研究,2015,31(12):1220-1222.

[5] Navarrete M,García J,Dutzan N,etal.Interferon-γ,interleukins-6 and -4,and factor XIII-A as indirect markers of the classical and alternative macrophage activation pathways in chronic periodontitis[J].Journal of Periodontology,2014,85(5):751-760.

[6] 宋倩,刘华,钟良军,等.新疆木垒县哈萨克族慢性牙周炎患者血清与唾液中IL-6、IL-17的表达及相关性分析[J].口腔医学研究,2015,31(8):827-829.

[7] 王斌.慢性间歇低氧对大鼠牙周炎模型血清及牙龈组织中白细胞介素-18和低氧诱导因子-1α的影响[J].华西口腔医学杂志,2015,33(4):383-387.

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[11]李渠，何平，王刚.中药在牙周炎治疗中的作用[J].川北医学院学报，2004，19(2)： 81.

(学术编辑：刘英)

The expression of local Th1 and Th17 cells of the patients with chronic periodontitis

CHEN Wei-can，LI Ye

(TheFirstCentralHospitalofBaoding,Baoding071000,Hebei,China)

Objective：To investigate the expression of local Th1 and Th17 cells of the patients with chronic periodontitis,and to provide reference for the clinical diagnosis and treatment of periodontitis.Methods：70 patients with chronic periodontitis from February 2013 to July 2015 in our hospital were selected as the experimental group,70 cases of healthy persons for medical examination at the same period in our hospital were set as the control group,two groups of subjects were given gingival crevicular fluid samples collecting,the expression of Th cell related factors IFN-γ,TNF and IL-17 were observed and compared.Results：The expression of IFN-γ in Th1 cells was 0.19 ± 0.05 in chronic periodontitis patients,higher than that in control group (P<0.05).TNF expression was 0.33±0.05,higher than the control group (P<0.05).IL-17 in Th17 cells 0.58±0.12 pg/μL,higher than the control group,the difference was statistically significant (P<0.05).Conclusion：The high expression of local Th1 and Th17 cells of chronic periodontitis lesion in patients,suggests that Th1 and Th17 cells may lead to the key factors of the occurrence of periodontitis and play a pathogenic role.

Chronic periodontitis;Periodontitis;Th1 cell;Th17 cell

10.3969/j.issn.1005-3697.2016.06.024

2016-03-31

陈玮粲(1985-)，女，硕士，主治医师。E-mail：aishangni1300@163.com

时间：2017-1-3 22∶01

http://www.cnki.net/kcms/detail/51.1254.R.20170103.2201.048.html

1005-3697(2016)06-0863-03

R783.3

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