杨治平,孙华栋
(1.山西省动物疫病预防控制中心,太原 030012;2.山西省农业规划设计研究院,太原 030002)
山西省2015年部分地区羊口蹄疫疫病的血清学调查
杨治平1,孙华栋2
(1.山西省动物疫病预防控制中心,太原 030012;2.山西省农业规划设计研究院,太原 030002)
目的:为了解山西省2015年度羊口蹄疫集中免疫效果。方法:从山西省11个市14个县40个规模场和17个散养户采集1 010份羊血清样品。采用酶联免疫法吸附试验方法。结果:山西省11个市1 010份羊血清样品的O型口蹄疫血清抗体平均合格率为77.72%,亚洲Ⅰ型口蹄疫血清抗体平均合格率为79.21%。结论:山西省11个市调查的羊口蹄疫免疫抗体全部符合农业部要求,但仍需加强相关免疫,防止重大疫病发生。
羊口蹄疫病 血清学检测 调查
口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒引发的一种急性发热性和传播极为迅速的接触性传染病,在偶蹄兽中发生。被侵染的动物显著特征为蹄、乳头、乳房、口腔黏膜等处形成水疱[1]。口蹄疫的病毒主要是通过消化道、呼吸道等进行传染,病毒的潜伏期比较长,羊的发病时间主要是在春秋两季,尤其春季风和回归的候鸟都是病毒传播的主要原因[2]。该病传播速度快,感染率高,一旦发病,很难控制和消灭,还会造成巨大的经济损失和政治影响。故OIE将其列为A类传染病之首,我国也将其列为一类动物传染病[3]。为了解山西省口蹄疫集中免疫效果,给预防和控制口蹄疫疫病提供科学依据,笔者于2015年全年对全省11个市进行了口蹄疫病血清学调查,现报告如下。
1.1 被检血清
2015年在山西省11个市14个县通过现场采集和送样的方式,随机抽取了40个规模场和17个散养户共1 010份血清样品(其中规模场羊血清800份、散养户血清210份)。
1.2 器材
酶标仪(美国伯腾ELX800)、洗板机、微量移液器、温箱等仪器设备。
1.3 操作步骤
O型和亚洲I型抗体检测方法如下。
(1)配洗液:将50 ml洗液加纯化水稀释至1 000 ml,充分摇匀后备用。
(2)编号:每次试验应在包被板上设空白对照孔1孔,阴性对照孔2孔,阳性对照孔2孔,其余为待检样品孔。
(3)加样品稀释液:用加样器在包被板的待检样品中加入样品稀释液,每孔100µl;空白对照孔、阴性对照孔及阳性对照孔不加样品稀释液。
(4)加样:分别于各待检样品孔加入待检样品10µl,阴性对照孔加入阴性对照血清100µl,阳性对照孔加入阳性对照血清100µl;空白对照孔不加样。
(5)温育:充分混匀,贴上封板膜,37℃温箱温育30 min。
(6)洗板:洗板机洗或手洗,方法如下。
手洗:倾去内容物,用洗液注满反应孔,静置15~30 s后吸去或弃去,在毛巾或吸水纸上拍干。如此洗板重复5次。
洗板机洗:洗板次数为5次,每次洗液在孔中滞留时间为15~30 s,洗液应注满反应孔,确保每次吸净无残留,全部洗完后在毛巾或吸水纸上拍干。
(7)加酶标结合物:除空白对照孔以外,各孔中加入酶标结合物100µl。
(8)温育:贴上封板膜,37℃温箱温育30 min。
(9)洗板:方法同上洗板。
(10)加显色剂:每孔加入A显色剂50µl,全部加完后再在每孔中加入B显色剂50µl,混匀,封板。
(11)温育:37℃温箱显色10 min。
(12)终止:显色完毕后立即于每孔加50µl终止液,混匀测定。
(13)测定:终止后应在10 min内完成判读。对空白对照调零,用酶标仪在450 nm波长处测定吸光值。或使用双波长测定吸光值,测定波长为450 nm,参考波长可选630 nm或655 nm。
根据说明书进行结果判定。
总体检测结果,对随机抽取的40个规模场17个散养户的1 010份羊血清样品进行O型和亚洲I型抗体检测,口蹄疫O型抗体合格数为785份,平均合格率77.72%;口蹄疫亚洲I型抗体合格数800份,平均合格率79.21%。也可以看出O型和亚洲I型抗体全部达到农业部要求,山西省羊的口蹄疫O型和亚洲I型免疫抗体全部合格。
(1)该血清学调查结果表明,山西省11个市羊口蹄疫O型和亚洲I型达到农业部要求,但规模场优于散养户,散养户合格率O型为64.29%,亚洲I型为66.67%,处在一个较低水平,这与各散养户的卫生环境、管理水平、防疫措施、饲养观念、疫苗免疫剂量、免疫时间及疫苗存储条件等因素有关。预防和控制本病任务仍很艰巨。
(2)羊口蹄疫O型与亚洲I型合格率低的原因主要是这些羊场在日常管理方面存在漏洞;部分散养户在引进种公(母)羊时未按规定程序严格检疫,导致引进带病的种公(母)羊。没有及时进行O型与亚洲I型双价疫苗补免,部分散养户消毒工作不到位,存在死角和盲角,个别散养户存在人畜、多畜同在一个院现象。
(3)预防和控制该病,认为预防口蹄疫的有效办法是接种疫苗,及时建立有效的免疫屏障,防止病毒侵入。加大疫苗预防口蹄疫的宣传力度,让散养户认识到疫苗预防的重要性。在日常管理中要严格按照国家规定的口蹄疫免疫计划进行免疫。必须做到“乡不漏村、村不漏户、户不漏畜、畜不漏针”。对免疫不合格的羊要及时补免。切实加强流通环节的监管力度,尤其是产地检疫和屠宰场的检疫。加强饲养管理,尤其对散养户要求减少混群放牧,经常消毒有助于羊群生长发育,提高农民的经济收入。
[1] 阿依古丽.玛纳斯县六户地镇羊口蹄疫疫病的血清调查.中国畜牧兽医文摘,2013,29(12):87~88
[2] 徐桂平.如何做好牛羊口蹄疫防治工作.中国动物保健,2014.16(7):36~37
[3] 迪力拜尔.阿木提.口蹄疫的防控研究进展.中国兽医杂志,2011,47(4):61~63