猪流行性腹泻的流行现状及防控策略

2016-01-28 17:52林耀民宋万杰赵永旭牛中伟申世川鞠吉楠天津农垦渤海农业集团有限公司天津300000浙江诺倍威生物技术有限公司浙江杭州3008
中国动物检疫 2016年5期
关键词:防控策略

林耀民,宋万杰,秦 云,赵永旭,李 慧,牛中伟,申世川,鞠吉楠,郭 锐(.天津农垦渤海农业集团有限公司,天津 300000;.浙江诺倍威生物技术有限公司,浙江杭州 3008)



猪流行性腹泻的流行现状及防控策略

林耀民1,宋万杰2,秦 云2,赵永旭2,李 慧2,牛中伟2,申世川2,鞠吉楠2,郭 锐2
(1.天津农垦渤海农业集团有限公司,天津 300000;
2.浙江诺倍威生物技术有限公司,浙江杭州 310018)

摘 要:猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的一种猪急性肠道传染病,两周龄以内的仔猪受其危害最为严重。本文介绍了猪流行性腹泻的流行现状、致病机理、疫苗研究进展以及防控策略,以期为本病防控提供参考。

关键词:猪流行性腹泻病毒;分子流行病学调查;致病机理;疫苗研究进展;防控策略

猪流行性腹泻是由流行性腹泻病毒(PEDV)引起的一种以腹泻、呕吐、脱水为典型症状的猪急性肠道传染病,各年龄段的猪均易感,但两周龄以内的仔猪受损最严重[1]。1971年,英国部分猪场暴发了以肥猪为主的腹泻疫情,其临床表现与传染性胃肠炎极为相似,但病料中检测不到传染性胃肠炎病毒和其它致病微生物。1976年,英国及比利时部分猪场再次暴发类似疫病,同样排除了传染性胃肠炎病毒和其它病原微生物的存在。1978年,比利时首次分离鉴定了形态类似于传染性胃肠炎病毒(TGEV)的病原,并将其命名为CV777[2]。随后流行性腹泻在匈牙利、德国、中国、韩国、日本等国家相继出现。从1973年开始,我国逐渐有流行性腹泻病例的相关报道,但直到1984年才通过荧光抗体实验和中和抗体确定了病原是流行性腹泻病毒。20世纪80年代后期,流行性腹泻在我国大面积流行,后来随着流行性腹泻和传染性胃肠炎二联灭活苗的应用,疫情逐渐得到控制,各地仅呈偶尔散发态势。2010年初,我国华南地区多个省份再次暴发了严重的流行性腹泻疫情,猪场感染率接近100%,哺乳仔猪的病死率超过80%。随后疫情快速蔓延至华北及华中地区,截止到2011年底,我国有超过100万头仔猪死于流行性腹泻,给我国养猪业带来了沉重打击[3]。2013年,流行性腹泻首次在美国暴发,仅一年时间就使美国损失了700万头仔猪[4]。

1 PEDV的分子流行病学研究进展

PEDV是有囊膜的单股正链RNA病毒,基因组大小约为28kb,可编码4种结构蛋白和4种非结构蛋白,结构蛋白包括纤突蛋白(S)、囊膜蛋白(E)、膜蛋白(M)、衣壳蛋白(N),非结构蛋白包括1a、1b、3a、3b四种蛋白[5]。S蛋白在宿主受体识别、病毒和细胞融合的过程中发挥着重要作用,能够诱导机体产生中和抗体。S蛋白是PEDV重要的纤突蛋白,分析S基因序列有助于研究PEDV不同毒株的变异情况[6]。河南农业大学王庆川等研究了其分离的CH/ZMDZY/11及其它11株PEDV全基因组序列,包括ORF1a/b、S、ORF3、E、M、N基因,系统进化分析都表明,2010年之后的PEDV集中形成了一个新群,表明一个新的PEDV亚型正在中国流行[7]。华中农业大学何启盖等对在2011年发病的9个猪场中分离的PEDV S基因进行分析,发现9条S基因的同源性为94.9%~99.6%,表明流行于中国的PEDV S基因出现了变异,这些变异或许是引起2010年12月至今流行性腹泻暴发的主要原因[8]。2012年广东省农业科学院宋长绪等对部分PEDV S基因(651bp)的系统进化分析表明,我国目前的PEDV不同于国外以及国内其它毒株,其与泰国株亲缘关系较近,而与疫苗株关系较远[9]。哈尔滨兽医研究所通过对2011—2012年收集的33份PEDV阳性病料的S基因测序并分析,发现33株S基因之间核苷酸及蛋白同源性分别为93.5%~99.8%和92.3%~99.8%;许多毒株有核苷酸的缺失和插入,与我国经典株CH/S的同源性仅为93.5%~94.2%,与近期CHGD-1的同源性高达97.1%~99.3%;系统进化分析表明,经典株与变异株均存在于猪群中,变异株为主要流行毒株[10]。

2 PEDV的传播途径及致病机理

PEDV主要通过口鼻传播,美国学者Scott证实污染的饲料也可以传播PEDV,另外研究发现PEDV还可以通过气溶胶的形式传播。PEDV传播途径的多样化给流行性腹泻的防控带来了一定困难[11]。经口鼻感染进入肠道的PEDV可以在肠上皮细胞内增殖,引起肠上皮细胞的肿胀、变性和崩解,导致肠绒毛的萎缩和脱落,肠内酶活性降低,使吸收功能发生障碍,肠道内出现渗透压升高,从而引起渗透性腹泻。由于仔猪抗应激能力和耐受力差,肠绒毛更新速度慢,导致仔猪的死亡率远远高于中大猪。

3 PEDV疫苗的研究进展

1976年,比利时最先分离出PEDV毒株(CV777),并通过多次细胞传代,使CV777适应了细胞生长,这使PEDV疫苗的研发应用成为了可能。后来CV777毒株的灭活苗在亚洲的多个国家得到广泛应用,并取得了不错的效果。1991年,日本生物科学研究所分离出一株PEDV(83P-5),通过在培养液中加入胰酶使其适应了在细胞内生长[12]。后来研究发现,随着83P-5在vero细胞中的传代,其对哺乳仔猪的致病力逐渐减弱[13]。这为PEDV活疫苗的研发提供了一个新思路。后来83P-5毒株的弱毒苗在日本流行性腹泻的防控中也起到了重要作用。1999年,韩国国家兽医检疫研究所分离出一株PEDV(KPEDV-9),通过Vero细胞传代成功使其毒力减弱,后来该毒株也被用于流行性腹泻弱毒苗的研制。2003年,韩国国立江原大学分离出一株PEDV(DR13)。DR13通过Vero细胞持续传代后,其ORF3序列发生了较大变化,高代次的DR13感染仔猪后不表现任何临床症状。而低代次的病毒感染仔猪后则出现典型的腹泻症状,此结果表明DR13通过Vero细胞持续传代后致病力减弱[14]。虽然PEDV有较多的疫苗株可供选择,但分子进化的角度分析,CV777、83P-5、KPEDV-9、DR13等毒株都属于G1亚群。

目前临床分离到的毒株多数为新流行毒株,其与经典疫苗株在分子同源性方面存在较大差异,这是流行性腹泻疫苗免疫效果不理想的重要原因。限制流性腹泻疫苗研发的一个主要因素是病毒分离难度大,即使分离成功,病毒滴度也很难达到疫苗生产要求[15]。有学者通过反向遗传系统建立了PEDV感染性克隆。PEDV感染性克隆的建立可以实现在DNA水平对PEDV基因组进行改造,极大促进了PEDV新型疫苗的研发[16]。PEDV S蛋白可以诱导机体产生高水平的中和抗体,是PEDV亚单位疫苗研发的一个热点。韩国学者利用真核表达系统成功构建表达了PEDV S1蛋白,用其免疫猪只后能够诱导机体产生较高水平的中和抗体,并对强毒株具有一定的保护作用[17]。

4 PEDV的防控策略

近几年的临床实践表明,立足于现有疫苗、合理调整免疫程序、适当增加免疫次数和免疫剂量、加强综合管理,可有效防控当前的流行性腹泻疫情。虽然经典疫苗株(CV777)同流行毒株在分子同源性方面存在一定差异,但是经典疫苗株对流行株具有一定的交叉保护力。免疫猪场即使出现流行性腹泻疫情,其发病的严重程度和遭受的损失也会大大降低,而未免疫猪场一旦暴发流行性腹泻疫情,其损失是难以想象的。

大家比较关注的另一个问题就是活疫苗和灭活苗哪个效果更理想。国内PEDV疫苗,无论是活疫苗还是灭活苗,其毒株均为CV777,均是通过免疫母猪产生母源抗体间接保护小猪。目前,PEDV免疫效果的实验室评判标准主要包括血液中的IgG、IgA和中和抗体水平,以及母猪乳汁中的IgA水平。韩国S.Paudel通过免疫母猪对比了流行性腹泻活疫苗和灭活苗的效果,母猪产前4周和2周分别免疫K/K、L/K、L/L病毒(k表示灭活苗,L表示活疫苗),结果发现无论是母猪血清还是乳汁以及哺乳仔猪血清中的IgG、IgA和中和抗体水平,K/K组明显高于其他组,这为选择理想的疫苗种类和制定合理的免疫程序提供了参考[18]。大量临床数据表明,无论是活疫苗还是灭活苗,大剂量多次免疫母猪可以有效提高母猪体内的IgG、IgA和中和抗体水平,从而提高疫苗的保护率。

在饲养管理方面,应注重圈舍的消毒和产房的保温工作,一旦圈舍内有发病猪只,应马上隔离或淘汰。对于正在发病的猪场,对妊娠母猪可以肌注干扰素降低体内的病毒载量,同时对出生后的仔猪连续肌注治疗剂量的干扰素,以建立被动保护屏障。实践中,多个猪场用此方案有效控制了流行性腹泻疫情的暴发和蔓延。

参考文献:

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(责任编辑:杜宪)

The Prevalence and Prevention Strategies of PEDV

Lin Yaomin1,Song Wanjie2,Qin Yun2,Zhao Yongxu2,Li Hui2,
Niu Zhongwei2,Shen Shichuan2,Ju Jinan2,Guo Rui2
(1. Tianjin Farm Bohai Agriculture Group Co.,Tianjin 300000;
2. EBVAC Biological Technology Co.,Hangzhou,Zhejiang 310018)

Abstract:Porcine epidemic diarrhea is an acute intestinal disease caused by PEDV. Piglets within two weeks were seriously affected by this disease. The epidemic status,pathogenesis,vaccine progress and prevention strategies of PEDV were introduced,in order to provide reference for the prevention and control of PED.

Key words:PEDV;molecular epidemiological investigation;pathogenesis;vaccine progress;prevention strategies

中图分类号:S852.65

文献标识码:B

文章编号:1005-944X(2016)05-0062-03

DOI:10.3969/j.issn.1005-944X.2016.05.020

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