开县龙珠茶粗提物对利血平诱导昆明小鼠胃溃疡的预防效果

王　睿，孙　鹏，易清云,周　露

(重庆第二师范学院 生物与化学工程系，重庆 400067)



开县龙珠茶粗提物对利血平诱导昆明小鼠胃溃疡的预防效果

王睿，孙鹏，易清云,周露

(重庆第二师范学院 生物与化学工程系，重庆 400067)

摘要：利用利血平诱导昆明小鼠出现胃溃疡来测定市售重庆开县龙珠茶提取物的胃溃疡预防效果。龙珠茶2000mg/kg处理组小鼠的IL-6,IL-12,TNF-α和IFN-γ细胞因子低于1000mg/kg处理组和对照组小鼠。龙珠茶组小鼠胃溃疡面积也低于对照组小鼠，并且2000mg/kg处理组表现得更为明显。龙珠茶组小鼠的胃液量低于对照组小鼠，胃液pH值高于对照组小鼠，可见龙珠茶对利血平诱导胃溃疡有很好的预防效果。

关键词：龙珠茶；胃溃疡；细胞因子；血清；昆明小鼠

起源于重庆市开县的龙珠茶是一种高品质的绿茶，它的名字来源于龙王的女儿和凡人之间的爱情传说[1]。胃损伤是一种胃黏膜损伤，化学物质和药物都可能造成这种损害，损伤发生后也往往引发炎症反应[2]。龙珠茶中含有一定的营养成分，适用于胃溃疡患者，可以在胃溃疡患者不宜进食的情况下进行补充，同时其中的保健功效成分有可能对胃溃疡本身产生抑制作用。本研究对龙珠茶预防胃溃疡的功效进行研究，为充分利用这种传统食品积累科学依据。

一、材料方法

(一)材料与试剂

龙珠茶：选用重庆市开县售优质龙珠茶。

无水乙醇(分析纯)(重庆市品誉化工有限公司)，利血平(美国Sigma公司)，细胞因子IL-6、IL-12、TNF-α和IFN-γ试剂盒(美国Biolegend公司)。

R-114型旋转蒸发仪(瑞士Buchi公司)，VS-15CFN型离心机(韩国Vision科学株式会社)UV-1750型紫外分光光度计(日本岛津公司)，D550数码相机(日本佳能公司)。

(二)实验方法

1.龙珠茶提取物准备

将龙珠茶粉碎后与80%的乙醇按1∶20混合提取，每次12h，重复3次，过滤得到提取液，合并提取液用旋转蒸发仪蒸干后得到提取物待用。

2.昆明小鼠诱导胃溃疡实验

SPF级昆明小鼠40只，雄性，体重20~25g，按体重将小鼠随机分为正常组、胃溃疡对照组、1000mg/kg龙珠茶处理组和2000mg/kg龙珠茶处理组，每组10只，在相对湿度50±10%，室温保持24±2℃，12h明暗轮换条件下饲养。正常组和胃溃疡对照组小鼠每日口腔灌胃0.2mL生理盐水，龙珠茶处理组每日按龙珠茶提取物浓度1000mg/kg和2000mg/kg对小鼠实施口腔灌胃0.2mL龙珠茶提取物稀释液，实验期14d。14d后用生理盐水配制利血平悬浊液后按10mg/kg浓度对除了正常组小鼠外所有小鼠实施腹腔皮下注射0.2mL利血平悬浊液。注射后对小鼠禁食24h后对所有小鼠进行解剖，取小鼠全胃，浸泡在福尔马林下10min后用数码相机拍照，并使用ImageJ软件分析胃溃疡面积，计算胃溃疡抑制率=(各组胃溃疡面积-对照组胃溃疡面积)/对照组胃溃疡面积×100；并对胃液量和胃液总酸度进行测定[3],同时对小鼠的胃液量和胃液pH值进行测定。

3.酶联免疫法测定血清中细胞因子水平

取小鼠动脉血浆0.2mL，在4℃，3000r/min下离心分离10min，取上层血清。采用定量酶联检测试剂盒，按试剂盒说明书的酶联免疫法用紫外分光光度计在450nm处检测血清中细胞因子IL-6,IL-12,TNF-α和IFN-γ水平。

(三)数据统计

使用SAS统计软件对所得到数据采用one-wayANOVA法分析数据结果是否存在差异性(p<0.05)。

二、结果

(一)龙珠茶对小鼠胃溃疡抑制率的影响

龙珠茶提取物灌胃小鼠后，由表1可以看出对照组的胃溃疡最为严重，龙珠茶提取物灌胃后小鼠胃溃疡面积明显下降，并且2000mg/kg高浓度龙珠茶提取物灌胃组小鼠胃溃疡面积下降得更为明显。

(二)龙珠茶对小鼠细胞因子的影响

由表2可知，相对于正常组小鼠，对照组小鼠的IL-6，IL-12，TNF-α和IFN-γ细胞因子水平增加(p<0.05)；龙珠茶提取物能降低小鼠的IL-6，IL-12，TNF-α和IFN-γ细胞因子水平，且2000mg/kg龙珠茶提取物的效果最为明显。

表1　龙珠茶提取物对利血平诱导胃溃疡小鼠的胃组织观察

a-d不同字母表示差各组数据平均值差异显著(p<0.05)，同表2，3。

(三)龙珠茶对小鼠胃液的影响

通过观察小鼠胃液，由表3可知正常组和龙珠茶提取物处理组小鼠的胃液量低于对照组，pH值高于对照组，并且2000mg/kg龙珠茶提取物可以使小鼠的胃液更接近正常组小鼠。

表2　龙珠茶提取物对利血平诱导胃溃疡小鼠的细胞因子的效果

表3　龙珠茶提取物对利血平诱导胃溃疡的

三、结论

胃溃疡在临床上可以通过测定血液中炎症细胞因子来进行判断。食用功能性食品可以起到加强胃功能，调节体内相关因子水平，预防胃溃疡的作用[4]。胃溃疡发生后引起胃黏膜出现炎症，血液中的炎症相关细胞因子水平发生改变，IL-6，IL-12，TNF-α和IFN-γ等炎症相关因子在血液中的含量会明显升高[5]，龙珠茶提取物可以降低血液中以上因子的水平，由此判断龙珠茶提取物对胃溃疡的预防有明显效果。出现胃损伤后胃部会分泌胃酸，大量胃酸使胃内部呈酸性，加剧胃溃疡程度[6]。龙珠茶提取物灌胃后小鼠的胃酸分泌被更好地抑制，起到了胃溃疡抑制效果。胃黏膜损伤会引起胃液分泌量增多，此时胃液的pH值与正常值相比较会有所下降[2]，本文中龙珠茶提取物也显著降低了胃溃疡小鼠的胃液pH值。本研究从胃溃疡抑制率、血清中炎症因子水平、胃液分泌量和pH值等方面对龙珠茶提取物灌胃处理的胃溃疡小鼠进行了观察，观察到龙珠茶提取物可以起到抑制胃溃疡的作用，并且随浓度的增加效果更好。龙珠茶发挥具体功效的有效成分有待进一步研究。

参考文献：

[1]苏桂发,梁少俊,戴伟昭,等.龙珠茶营养成分分析与开发利用[J].广西师范大学学报:自然科学版,1993,11(4):63-66.

[2]邓潇潇,赵欣.不同浓度虫茶对SD大鼠的胃损伤预防效果评价[J].北京联合大学学报:自然科学版,2013,27(2):64-67.

[3]曲香芝,金光洙.青蒿素对小鼠无水乙醇型和利血平型胃溃疡的影响[J].延边大学医学学报,2010,33(2):96-97.

[4]鄢顺琴,凤良元,苏英豪,等.胃痛灵保护胃粘膜作用及对胃溃疡愈合质量的影响[J].中国中西医结合杂志,1995,15(10):612-614.

[5]Arican O, Aral M, Sasmaz S, et al. Serum levels of TNF-α, IFN-γ, IL-6, IL-8, IL-12, IL-17, and IL-18 in patients with active psoriasis and correlation with disease severity[J]. Mediators of Inflammation, 2005(5): 273-279.

[6]张守仁,邵金莺,於毓文.呋喃唑酮和一些常用抗溃疡药对四种大鼠胃溃疡模型的影响[J].药学学报，1984,19(1):5-11.

[责任编辑刘江南]

中图分类号：Q946.88

文献标识码：A

文章编号：1008-6390(2015)01-0168-02

作者简介：王睿(1982-)，男，重庆第二师范学院讲师，研究方向为食品化学与营养学、功能性食品开发；

通讯作者：孙鹏(1983-)，男，重庆第二师范学院讲师，研究方向为药理学、药剂学。