尘螨过敏哮喘患儿舌下含服粉尘螨滴剂后血清尘螨SlgE、SlgG4及IL-12、IL-13水平变化

尘螨过敏哮喘患儿舌下含服粉尘螨滴剂后血清尘螨SlgE、SlgG4及IL-12、IL-13水平变化

曾春云1，董蔚1，严华杰1，盛军1，钱丹1，陈向明1，陆敏2

(1上海市嘉定区南翔医院，上海201802；2上海市儿童医院)

摘要：目的观察尘螨过敏哮喘患儿经舌下含服粉尘螨滴剂治疗2年后血清尘螨特异性IgE(SlgE)、尘螨特异性IgG4(SlgG4)及IL-12、IL-13水平变化。方法 选择轻中度尘螨过敏哮喘患儿69例，随机分为观察组32例和对照组37例。两组均予沙美特罗替卡松粉吸入剂吸入治疗，观察组再予粉尘螨滴剂舌下含服治疗，两组均治疗2年。治疗前后采用荧光酶联免疫法检测血清尘螨SlgE、SlgG4，采用化学发光免疫分析法检测血清IL-12、IL-13。结果 对照组治疗前后血清尘螨sIgE、尘螨sIgG4、IL-12、IL-13水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05)，观察组治疗后血清尘螨sIgG4、IL-12水平较治疗前升高(P均<0.05)。与对照组比较，观察组治疗后血清尘螨sIgG4、IL-12水平升高，IL-13水平降低(P均<0.05)。结论 尘螨过敏哮喘患儿经舌下粉尘螨滴剂治疗2年后血清尘螨sIgG4及IL-12水平升高，血清IL-13水平降低，血清尘螨sIgE无明显变化。

关键词：哮喘；粉尘螨滴剂；舌下免疫疗法；免疫功能；儿童

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2015.45.028

中图分类号：R256.12 文献标志码：B

收稿日期：(2015-08-05)

特异性免疫治疗(SIT)可影响变应性疾病的发病机制，从而改变疾病自然进程[1]，是目前惟一针对过敏性疾病的对因治疗方法[2]。舌下免疫治疗(SLIT)是SIT的一种[3]，安全性及依从性较高,目前已广泛用于治疗过敏性哮喘及变应性鼻炎等过敏性疾病[4]，但SLIT的作用机制尚不明确。目前，国内有关儿童SLIT对其免疫机制的影响报道不多，且疗程多在1年内。2011年10月～2014年10月，我们对轻中度尘螨过敏哮喘患儿予粉尘螨滴剂舌下含服治疗2年，观察血清尘螨特异性IgE(SlgE)、尘螨特异性IgG4(SlgG4)及IL-12、IL-13水平变化。

1资料与方法

1.1临床资料哮喘患儿69例，男36例、女33例，年龄5～12岁。纳入标准：①均符合中华医学会小儿哮喘诊断及防治指南对支气管哮喘的临床诊断标准；②均为轻中度哮喘；③经体外过敏原检测尘螨过敏，血清尘螨SlgE 2级或以上；④患儿家属均签署知情同意书。排除标准：①有心血管、肝、肾、肺结核等严重慢性疾病或炎症；②严重免疫性疾病，如自身免疫性疾病、免疫缺陷病等；③服用β2受体阻滞剂患者；④重度持续性哮喘、哮喘病情不稳定或急性发作期、第1秒用力呼气容积占预计值的百分比<70%；⑤未完成2年疗程。根据随机数字表法将患者分为观察组32例与对照组37例，两组性别、年龄等比较差异无统计学意义。

1.2治疗方法两组均予沙美特罗替卡松粉吸入剂(50 μg/100 μg)治疗，前3个月每次1吸、2次/d，3个月后根据病情减量渐至停药，如症状反复可调整用量，治疗期间可据病情使用其他对症治疗药物。观察组在此基础上予粉尘螨滴剂舌下含服治疗，第1、2、3周分别使用滴剂1号(1 μg/mL)、2号(10 μg/mL)、3号(100 μg/mL)，每周第1～7天，每天按1、2、3、4、6、8、10滴依次递增服用；从第4周开始使用滴剂4号(333 μg/mL)作为维持剂量，每次3滴，直至疗程结束。患儿自行或在家长协助下将粉尘螨滴剂滴于舌下，含服1～2 min后吞咽，服药后15 min内不再饮水进食，每日1次，固定时间用药。治疗期间若出现哮喘急性发作，暂停舌下含服粉尘螨滴剂，待病情稳定后继续治疗。两组均治疗2年。

1.3 血清尘螨SlgE、SlgG4检测采用荧光酶联免疫法。SlgE、SlgG4试剂购自上海鑫乐生物科技有限公司。患儿分别于治疗前后采静脉血2 mL，分离血清。在Unicap100系统中加入包被了尘螨抗原的固相载体CAP试剂，加入血清样本后，根据待测指标分别加入酶标记的抗人IgE抗体、抗人IgG4抗体，最后加入底物，生成荧光物质，根据荧光强度计算SlgE、SlgG4水平。

1.4血清IL-12、IL-13检测采用化学发光免疫分析法。IL-12、IL-13试剂购自上海鑫乐生物科技有限公司。患儿分别于治疗前后采静脉血2 mL，分离血清，在血清样本中分别加入酶标记的抗人IL-12抗体、抗人IL-13抗体，最后加入底物，生成化学发光物质，在芬兰酶标仪系统中根据发光强度计算各项待测指标水平。

2结果

两组治疗前后血清尘螨sIgE、sIgG4及IL-12、L-13水平比较见表1。

表1　 两组治疗前后血清尘螨sIgE、sIgG4

注：与同组治疗前相比，*P<0.05；与对照组相比，△P<0.05。

3讨论

SLIT已逐渐用于临床[5]，但其作用机制尚未完全明确，目前研究主要侧重于T细胞反应、产生抗体成分和效应细胞活性等免疫学变化[6]。国内学者在研究SLIT治疗支气管哮喘疗效同时检测血清sIgE水平,但结论不一[7,8]。目前研究认为，SIT是否导致变应原SlgE水平降低有可能受多种因素影响，如治疗时间、环境变应原持续暴露等。有研究对尘螨过敏哮喘患儿SLIT治疗1年后发现，SLIT组SlgE水平与非SLIT组比较差异无统计学意义，考虑可能是由于抗原特异性T淋巴细胞构象改变后导致对抗体产生的变化需相当长的一段时间，或由于SLIT治疗中所用抗原剂量尚不足以致抗体型别的转换[9]。本研究结果显示，SLIT 后2年sIgE水平无明显变化。WHO推荐的SIT时间为3～6年，通常在治疗2～3年后sIgE水平才能逐渐缓慢降低。目前国内SLIT疗程多为2～3年，疗程结束症状多改善，而儿童对于变应原敏感性的改善可能需更长时间治疗，故疗程结束时sIgE不一定降低。

IgG4是IgG的一种抗过敏的非炎性亚型，由于其活性和亲和性能更早地捕获变应原，竞争性地阻断肥大细胞与变应原IgE的结合，避免肥大细胞激活，减少炎性介质释放，抑制过敏反应[10]。本研究SLIT 2年sIgG4水平明显升高，与郑伯强等[11]研究结论一致。Th1/Th2细胞功能紊乱是哮喘发病的重要机制，变应原对特异性个体诱导，导致患儿Th1/Th2分化和调控比例失衡，这种失衡的细胞因子微环境又促使Th0细胞向Th2细胞分化。IL-12由单核巨噬细胞分泌，促使Th0细胞向Th1细胞分化，抑制Th2细胞功能,降低气道的高反应性；Th2型主要分泌IL-4、IL-5、IL-13，IL-13是多效细胞因子，直接促进IgE合成，可诱导痰液、上皮化生及气道高反应。SLIT的机制是刺激机体对变应原产生免疫反应，多数变应原蛋白被舌下丰富的抗原递呈细胞捕获后，移行至舌下黏膜下的淋巴组织或附近淋巴结启动脱敏反应，调节Th1/Th2淋巴细胞平衡[12]。本研究结果显示，经SLIT治疗后血清IL-12水平明显升高，有利于T细胞两个亚种的免疫应答处于平衡状态。但SLIT后血清IL-13水平无明显变化，与上述研究不一致，故经过SLIT后血清IL-13水平未必明显下降。可见，SLIT对尘螨过敏哮喘儿童的免疫功能有调节作用,SLIT 后2年，血清尘螨SIgG4、IL-12水平上升,动态监测sIgG4、IL-12对临床评估脱敏治疗效果有一定指导意义。

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