负离子矿物质制剂对蛋鸡血清生化及免疫指标的影响

■王佳艺 耿春银 于梦影 张 敏 片永泰

（1.延边大学，吉林延吉 133000；2.延吉永大天然矿物质开发有限公司，吉林延吉 133000）

在现代规模化、集约化的饲养方式下，动物受到的各种应激因素明显增多，这将导致动物免疫力降低，生产性能下降。近两年的研究发现，以纳米加工技术处理的负离子矿物质制剂不仅具有改善动物生产性能及产品质量的作用[1-4]，还对动物的机体免疫能力、抗氧化性和抗应激能力有显著的提高效果[5-7]。因此，负离子矿物质制剂是兼具保健作用的一种新型饲料添加剂，其具有较大的开发应用价值。目前，负离子矿物质制剂对肉鸡[5-6]、猪[7]、牛[8]等血液生化指标的已有报道，但对蛋鸡血清生化及免疫指标的影响报道尚未见报道。本试验研究旨在前人的工作基础上，进一步研究负离子矿物质制剂对蛋鸡血液生化及免疫指标的影响，为其在蛋鸡生产中的应用及深入的相关作用机制的认识奠定基础。

1 材料与方法

1.1 试验材料

本试验所使用的负离子矿物质制剂的组成：硫磺粉46%、锗矿粉4%、复合微量元素粉5%、电气石粉38%、石粉7%。

1.2 试验动物及试验设计

选用960只健康无病，日龄、体况比较一致的蛋鸡，采用完全随机设计，将960只蛋鸡随机分成A、B、C三组，每组五个重复，每个重复64只鸡（试验设计见表1）。试验期共49 d，预饲期7 d，正式试验期42 d。试验用基础日粮的组成及营养水平见表2。

表1 试验设计

表2 基础日粮组成及营养水平

1.3 供试鸡的饲养管理

试验开始前，对鸡舍进行全面的消毒。各处理组的各个重复在鸡舍内均匀分布，每日光照时间满16 h，自由采食和饮水，每天在5：30、12：00、17：30饲喂。预饲期为7 d，各试验组鸡只所饲喂日粮逐步过渡为试验日粮。

1.4 样品的采集及测定

1.4.1 样品的采集及处理

试验结束前一天早饲前，从每个处理的每个重复中随机选取2只蛋鸡，采集蛋鸡翼下血液，3 000 r/min离心10 min制备血清，用于相关指标的测定。

1.4.2 血液生化指标和免疫指标的测定

相关指标的测定方法如下：血糖（GLU），葡萄糖氧化酶法；血清尿素氮（BUN），酶两点动力法；甘油三酯（TG），酶比色法；总胆固醇（TC）,CHOD-PAP双试剂法；谷草转氨酶（GOT）的活性，比色法；谷丙转氨酶（GPT）的活性，赖氏法；高密度脂蛋白的测定（HDL），清除法；低密度脂蛋白的测定（LDL），计算法；血清钙，采用血清钙测定试剂盒(邻甲酚酞络合酮比色法)测定；血清磷，采用血清磷测定试剂盒(采用紫外法)测定；免疫球蛋白IgA、IgM、IgG的测定，散射速率比浊法，用试剂盒测定。测试试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

1.5 统计方法

所有试验数据使用Excel 2013进行整理，应用SPSS17.0对整理数据做方差分析，并采用Duncan′s检验法比较各组间差异显著性，试验数据用“平均值±标准差”表示。

2 结果与分析

2.1 添加不同剂量的负离子制剂对蛋鸡血清生化指标的影响（见表3）

由表3可知，C组（0.5%）蛋鸡血清中总蛋白的含量较A组（对照组）提高了15.98%（P＜0.05），白蛋白和球蛋白的含量较A组有升高趋势但差异不显著；随着负离子矿物质制剂水平的提高，蛋鸡血清中的胆固醇含量有下降趋势，且B组（0.3%组）和C组（0.5%组）比A组分别降低了4.21%（P＜0.05）、28.74%（P＜0.05）；蛋鸡血清中的甘油三酯含量有下降趋势，且B组和C组较A组相比分别降低了8.95%（P＜0.05）、37.63%（P＜0.05）；高密度脂蛋白B、C组有升高趋势但差异不显著；B组和C组蛋鸡血清中碱性磷酸酶的活性较A组显著升高，分别升高了20.64%（P＜0.05）和32.24%（P＜0.05），但B组与C组间差异不显著；蛋鸡血清中的血清钙、血清磷、葡萄糖的含量各组间均无显著性差异；C组比A组尿素氮的含量降低了15.09%（P＜0.05）。

2.2 添加不同剂量的负离子制剂对蛋鸡血清免疫指标的影响（见表4）

表4 添加试验日粮对蛋鸡血清免疫指标的影响（g/l）

由表4可知，C组IgA、IgM的含量较A组分别提高了47.61%（P＜0.05）、31.82%（P＜0.05）；B组及C组蛋鸡血清IgG的含量较对照组有升高趋势但差异不显著（P＞0.05）。

3 讨论

3.1 添加不同剂量的负离子制剂对蛋鸡血清生化指标的影响

3.1.1 添加负离子矿物质制剂对蛋鸡血清总蛋白、白蛋白和球蛋白含量的影响

血清总蛋白和白蛋白是肝脏功能和营养状况的重要指标，其总体反映了蛋白质的吸收、合成和代谢情况。血清球蛋白主要来自于浆细胞，与免疫有关。本研究中，添加0.5%负离子矿物质显著提高了血清总蛋白含量，同时白蛋白和球蛋白的含量也较对照组有升高趋势。本试验中纳米负离子矿物质中含有的锗和氧化锌均具有促进血清总蛋白含量提高的作用[10]，其提高的机制可能与改善了蛋鸡肠道环境，提高了肝功能，增强了机体饲料蛋白质的吸收和代谢有关。此外，负离子矿物质制剂中含有铁矿粉其对蛋鸡血清中总蛋白的增加也有一定的助力作用。

3.1.2 添加负离子矿物质制剂对蛋鸡血清脂质代谢的影响

本试验中，随着负离子矿物质制剂水平的提高，血清中TG、TC、低密度脂蛋白（LDL）含量呈下降趋势，且C组（0.5%组）TG和TC含量显著低于A组（对照组），高密度脂蛋白（HDL）呈升高趋势，这可能与负离子矿物质制剂中的电气石、锗、铜和氧化锌等有关。锗可以增加血清HDL的含量，增加TC的肝脏代谢，从而降低了血清TC的含量。另外，锗有利于动物机体对铜的吸收，而铜在降低TC方面有很好的作用，从而使血清TC含量减少。杨利[11]试验结果指出，Ge-132可有效地修饰鸭的脂质方面的代谢，减少血清中TC、TG、蛋黄TC的含量，提高血清HDL水平。于瑞敏等[12]研究了Ge-132对大鼠脂质代谢的影响，结果得出其能提高HDL/TC的比值。另外，锗可明显增强谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性，而GSH-Px活性对合成胆固醇前体的辅酶有影响，可降低肝脏合成胆固醇，影响血清胆固醇的水平。

3.1.3 添加负离子矿物质制剂对蛋鸡血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶和碱性磷酸酶含量的影响

谷丙转氨酶（GPT）和谷草转氨酶（GOT）参与畜禽体内的转氨基活动，在正常范围内提高其活性，可提高蛋白质代谢效率。本试验中添加负离子矿物质制剂的两组的GPT和GOT活性与对照组相比呈逐渐升高趋势，但没有达到显著水平，说明负离子矿物质制剂可提高这两种酶的活性，从而提高蛋白质代谢效率，但对肝脏功能无不良影响。王慧明[8]将负离子制剂加入到日粮中饲喂牛，结果血液GPT和GOT的变化与本研究结果一致。

碱性磷酸酶（ALP）是畜禽消化代谢过程中的关键酶，它的活性大小是畜禽机体的生长和代谢状况的标志。本试验中添加负离子矿物质制剂的两组的ALP活性与对照组相比显著升高,这可能与负离子矿物质制剂中锌有关。锌是合成ALP所必不可少的金属离子，ALP的活性与日粮中锌的多少和机体内锌的含量密切相关。负离子矿物质制剂含有一定量的纳米氧化锌，从而提高了蛋鸡血清中ALP的活性，这与徐奇友等[13]研究的纳米氧化锌极显著提高了血清锌水平和ALP水平结论一致。

3.1.4 添加负离子矿物质制剂对蛋鸡血清尿素氮、葡萄糖、血钙和血磷水平的影响

尿素氮是体内蛋白质和氨基酸代谢的最终生成物，血清中尿素氮的水平完全可以体现畜禽蛋白质和氨基酸代谢的基本状态。当畜禽机体与氨基酸的代谢相关的活动出现异常情况时，会导致血清尿素氮浓度升高。当畜禽机体蛋白质的形成数量较多时候，血清中的含量就会减少。本试验表明，负离子矿物质组血清尿素氮含量较对照组降低，说明负离子矿物质具有促进蛋鸡体内蛋白质合成作用，对肾脏的组织也无损伤。这与李雅茹等[6]研究的硫磺负离子矿物质对肉鸡血清尿素氮有提高的作用结果一致。

蛋鸡血液中的糖大部分是葡萄糖，其是碳水化合物的中间产物，是蛋鸡各个组织器官细胞的活动所需的能量的重要来源。当血糖超出正常生理常数时，说明蛋鸡机体出现异常。本试验结果表明，负离子矿物质具有降低血糖作用，且不低于正常值。本试验中随着负离子矿物质水平的升高，血钙和血磷含量增加，说明负离子矿物质制剂具有促进饲料中钙离子吸收作用。

3.2 添加不同剂量的负离子制剂对蛋鸡血清免疫指标的影响

本试验表明负离子矿物质添加具有提高血清中IgG、IgA和IgM含量的作用，说明负离子矿物质制剂对蛋鸡自身免疫力提高有积极的促进作用。这可能与负离子矿物质制剂中含有锗元素有关。有研究指出，锗对于畜禽来说，可以起到免疫调节的功效，它能够提高许多免疫细胞的活性，从而提高机体自身对于各种疾病的免疫力。李伟毅[14]用有机锗饲喂小鼠，结果得出锗能提高B淋巴细胞抗体产生的能力。唐兆新等[15]的研究表明，锗可以显著增加雏鸡的血清中IgA和IgM含量。本研究结论与负离子矿物质添加到肉鸡饲料中，对肉鸡免疫指标影响的结论一致[6]。

4 结论

产蛋期的蛋鸡添加0.5%负离子矿物质制剂可以显著提高血清中总蛋白含量及碱性磷酸酶活性，显著降低血清中总胆固醇、甘油三酯和尿素氮的含量；同时，添加0.5%负离子矿物质制剂显著或极显著提高了产蛋期蛋鸡血清中IgA和IgM的含量，提高了产蛋期蛋鸡的免疫力。