高水平代谢有机酸对肉鸡生长性能及肠黏膜形态的影响

■赵雪梅 于 艳 刘 娇 李 杰

（东北农业大学动物科学技术学院，黑龙江哈尔滨150030）

代谢有机酸主要包括酮酸、短链有机酸及低级脂肪酸等。丙酮酸(CH3COCOOH)是最简单的α-酮酸，以糖酵解的终产物形式和三羧酸循环的起始底物而参与循环。目前研究表明，代谢有机酸具有提高肌肉耐力[1]、降低运动员体重、身体脂肪比率以及腹部脂肪的作用[2]。酮酸和必需氨基酸联用在低蛋白饮食中对慢性肾功能不全有治疗作用[3]。在畜牧生产方面，栗敏等[4]研究表明，日粮中添加0.125%代谢有机酸可以促进育肥猪体内蛋白质沉积进而提高生长性能。王盼盼等[5]研究表明，日粮中添加0.1%代谢有机酸显著提高5～8周龄三黄鸡体重作用。刘娇等[6]试验证明，代谢有机酸显著提高了肉鸡生长性能，且其在肉鸡日粮中的最适添加量为0.1%。添加水平适宜会明显促进机体生长，但添加水平过高而产生的效果，及是否抑制动物机体生长甚至危及机体健康等问题不得而知。而随着集约化养殖业的发展，饲料安全问题也越来越突出，开发出安全无毒、无毒副作用、无残留、无抗药性、不影响畜产品安全、对人类及动物健康无害、对环境无污染的饲料添加剂对现代畜牧养殖业意义重大，对绿色养殖有积极推动作用。故本试验在已筛选出代谢有机酸添加于AA肉鸡日粮最适水平0.1%的基础上，探讨高水平有机酸对AA肉鸡生长发育及机体代谢的影响，为代谢有机酸在畜牧生产中的安全应用提供科学依据及应用参数。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验所用有机酸产品的有机酸含量为20%，主要包括短链有机酸和酮酸，由东北农业大学动物营养研究所饲料资源研究室开发研制。

1.2 试验动物与分组

试验共选取192只一日龄平均体重接近的雄性AA肉鸡，随机分为4个处理，每个处理4个重复，每个重复12只鸡，分别为对照组、0.1%代谢有机酸组、1%代谢有机酸组、5%代谢有机酸组，试验为期28 d。

1.3 试验日粮

试验用基础日粮参照NY/T33—2004配制玉米-豆粕型基础日粮，日粮组成及营养水平见表1。试验组在基础日粮中分别添加0、0.5%、5%、25%代谢有机酸产品，最终日粮中代谢有机酸含量分别为0、0.1%、1%、5%。

表1 基础日粮组成及营养水平（风干基础）

1.4 饲养管理

试验在东北农业大学实验基地进行，进雏前一星期对育雏舍内所有试验设备、墙壁及地面进行彻底清扫，采用福尔马林和高锰酸钾熏蒸消毒。进雏前一天提前预热舍内温度达32～33℃，前一周温度维持在此范围内，第二周温度降低至28～30℃。注意保持鸡舍湿度在适宜范围，试验全期自由饮水和采食，每日记录发病、死亡、淘汰等情况，试验期间免疫程序按常规免疫程序进行。

1.5 测定指标及方法

1.5.1 生长性能指标及方法

于试验第15、29 d早晨8∶00空腹称重，并以每个重复为单位统计各阶段的耗料量，计算各阶段各组的平均日增重、平均日采食量和料重比。

1.5.2 血液指标

试验29 d每个重复里选取一只体重接近平均体重的肉鸡，进行屠宰取样,采用断静脉采血，37℃水浴30 min，3 000 r/min离心15 min，分离血清置于-20 ℃保存。血清试样送往黑龙江省电力医院，采用贝克曼DXC800全自动生化分析仪测定血清尿酸及葡萄糖含量。

1.5.3 肠黏膜形态

屠宰同时分别剪取十二指肠、空肠中部各一块组织约1.0 cm×1.0 cm，用生理盐水将内容物冲洗干净，置于10%的福尔马林溶液中常温保存，以备测定绒毛高度和隐窝深度。

小肠切片的制作方法与小肠形态观察：小肠组织样固定后，经过修整、水洗、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、粘片、烤片、脱蜡、复水和常规HE染色，并从组织切片上选取6个典型视野（绒毛完整、走向平直），用美国moticam 3000显微摄影成像系统100倍下摄片，采用motic images advanced 3.2病理图像分析系统测量各肠段绒毛高度和隐窝深度，并计算绒毛高度与隐窝深度的比值，各项指标取其平均数作为测定数据，该过程均由黑龙江中医药大学协助完成。

测定指标与方法：绒毛高度为从绒毛顶端至隐窝开口处的垂直距离；隐窝深度为从隐窝开口至隐窝基部的垂直距离；绒毛高度与隐窝深度的比值为绒毛高度/隐窝深度。

1.6 数据处理

数据采用Spss17.0软件One-way ANOVA程序进行统计分析，运用Duncan's法进行多重比较，以P＜0.05为显著差异，P＜0.01为极显著差异。测定结果以“平均值±标准差”表示。

2 结果

2.1 不同水平代谢有机酸对AA肉鸡生长性能的影响（见表2）

表2 不同水平代谢有机酸对AA肉鸡生长性能的影响

由表2可知，0.1%代谢有机酸组肉鸡的28 d体重、平均日增重、平均日采食量高于对照组，但无显著差异（P＞0.05）。1%代谢有机酸组肉鸡28 d体重、平均日增重、平均日采食量始终低于对照组和0.1%代谢有机酸组，但无显著差异（P＞0.05）。5%代谢有机酸组肉鸡28 d体重、平均日增重、平均日采食量均极显著低于其他三组（P＜0.01）。对照组、0.1%代谢有机酸组、1%代谢有机酸组料重比无显著差异（P＞0.05），但0.1%组料重比最低，对照组和1%代谢有机酸组次之；5%代谢有机酸组料重比极显著高于其他三组（P＜0.01）。

2.2 不同水平代谢有机酸对AA肉鸡血清指标的影响（见表3）

表3 不同水平代谢有机酸对AA肉鸡血清指标的影响

由表3可知，试验组肉鸡血清尿酸和葡萄糖含量随代谢有机酸水平升高呈线性增加，5%代谢有机酸组肉鸡血清葡萄糖水平与对照组相比差异显著（P＜0.05），其他各组无显著差异。各组肉鸡血清尿酸水平无显著差异（P＞0.05），但5%代谢有机酸组尿酸含量高于对照组20.81%。

2.3 不同水平代谢有机酸对AA肉鸡肠黏膜形态的影响（见图1及表4）

从图1可以看出，0.1%组空肠绒毛排列整齐、高度较一致、绒毛较宽、结构清晰；对照组和1%组次之；5%组最差，绒毛排列不整齐、绒毛较细。

由表4可知，0.1%代谢有机酸组肉鸡十二指肠绒毛高度高于对照组0.75%（P＞0.05）,1%代谢有机酸组肉鸡十二指肠绒毛高度低于对照组但无显著差异（P＞0.05），5%代谢有机酸组肉鸡的十二指肠绒毛高度极显著低于其他三组（P＜0.01）。0.1%和1%代谢有机酸组肉鸡十二指肠隐窝深度高于对照组但无显著差异（P＞0.05），5%代谢有机酸组十二指肠隐窝深度极显著高于其他三组（P＜0.01）。0.1%和1%代谢有机酸组肉鸡空肠绒毛高度与隐窝深度与对照组相比无显著差异（P＞0.05），但0.1%代谢有机酸组肉鸡空肠绒毛高度比对照组提高了2.01%。5%代谢有机酸组空肠绒毛高度极显著低于其他三组（P＜0.01），隐窝深度显著高于其他三组（P＜0.05）。5%代谢有机酸组肉鸡十二指肠及空肠绒毛高度/隐窝深度极显著低于其他三组（P＜0.01），其他各组无显著差异（P＞0.05）。

图1 各组空肠光镜观察结果

表4 不同水平代谢有机酸对AA肉鸡肠黏膜形态的影响

3 讨论

3.1 不同水平代谢有机酸对AA肉鸡生长性能的影响

本实验室前期研究表明，日粮中添加0.1%代谢有机酸对肉鸡有促长作用，本试验结果显示，28 d 0.1%组肉鸡体重较对照组提高3.32%，与前期研究结果基本一致；而5%代谢有机酸组肉鸡体重降低61.34%（P＜0.01），生长受抑制。在饲养过程中发现，5%代谢有机酸组肉鸡的粪便水分过多，均为软便，粪便中消化物清晰可见，可能是过高浓度的代谢有机酸破坏了肠道正常的消化吸收功能，影响了动物对营养物质的利用，减少采食量和降低生长速度。另外，外源性补充丙酮酸可加快三羧酸循环，消耗大量的热量，从而抑制脂肪的合成，加速了脂肪酸的动员，故机体表现为体脂、体重均减少[7]。赖文清[8]研究表明，低血糖可刺激采食神经中枢,而高血糖则可刺激饱感中枢，5%代谢有机酸组肉鸡采食量极显著低于其他三组也可能是血液葡萄糖水平升高刺激了饱感中枢，降低了采食量，进而降低了日增重和体重。

1%代谢有机酸组肉鸡28 d体重、日增重虽低于对照组，但无显著差异（P＞0.05），可见1%水平的代谢有机酸并未影响肉鸡生长。而0.1%水平的代谢有机酸促进了肉鸡的生长，可能是因为代谢有机酸本身就是机体代谢的中间产物，从而可以为机体提供能量，促进肉鸡生长。

3.2 不同水平代谢有机酸对AA肉鸡血清指标的影响

Stanko等[9]认为，补充丙酮酸会引起胰岛素浓度下降，而胰岛素可以促进细胞对葡萄糖的利用，胰岛素分泌减少时血糖水平自然就会升高，这可能是试验组血清葡萄糖水平高于对照组的原因之一。尿酸是嘌呤的代谢终产物,主要以经肾小球滤过,肾小管重吸收和再分泌,最后通过尿液排出体外,极少一部分可由肠系膜细胞分泌入肠腔中。尿酸在机体内的作用具有两方面。一方面,尿酸是体内的氧自由基的清除剂,对细胞起保护作用;另一方面,当尿酸产生过量或排除受阻时,将在体内堆积而对机体造成损伤[10]。而试验组血清尿酸含量增加主要可能是体内有机酸过多,有机酸会与尿酸竞争分泌,从而进一步提高尿酸水平[11]。

3.3 高水平代谢有机酸对肉鸡肠黏膜形态的影响

小肠是动物吸收营养物质的重要场所，其形态变化直接影响动物的生长。郭雪峰等[12]指出，小肠黏膜上皮绒毛变短、隐窝加深意味着肠道黏膜上皮绒毛萎缩，吸收能力下降；绒毛高度与隐窝深度的比值大，说明肠内膜面积较大，消化吸收能力较强。研究表明，1%α-酮戊二酸可以降低脂多糖（LPS）刺激仔猪的隐窝深度，增加绒毛表面积，提高绒毛高度/隐窝深度的比值[13-14]。胡泉舟等[15]研究表明，1%α-酮戊二酸不仅增加了断奶仔猪小肠的绒毛高度，降低隐窝深度，同时日增重提高了11%。本试验中，0.1%代谢有机酸组肉鸡空肠绒毛高度比对照组提高了2.01%（见图1），绒毛高度与隐窝深度比值有升高趋势。这表明0.1%和1%水平代谢有机酸在一定程度上改善了肉鸡空肠的吸收功能。这可能是由于外源提供的代谢有机酸可以为小肠黏膜增殖和代谢提供能量，节约了外源性或内源性的谷氨酰胺，而谷氨酰胺能够维持肠道正常的形态结构，提高绒毛高度，降低隐窝深度，维持正常的吸收功能[15]。另外，本试验中，综合绒毛高度/隐窝深度来看，0.1%和1%水平代谢有机酸对小肠形态与消化吸收功能有一定改善作用，而5%水平代谢有机酸对小肠吸收功能有一定影响。

4 结论

综合本试验结果得出，日粮中添加0.1%水平代谢有机酸有促进AA肉鸡生长的作用，1%水平的代谢有机酸对AA肉鸡既无促长作用也无抑制作用，而5%水平的代谢有机酸会严重抑制AA肉鸡生长，并且肉鸡有酸中毒表现。因此，应控制好代谢有机酸应用在畜禽生产上的添加水平，防止用量过高造成经济损失。