芒黄颗粒对糖尿病肾病大鼠的保护作用

关键词：芒黄颗粒；糖尿病肾病；血糖；胰岛素

DOI:10.13463/j.cnki.cczyy.2015.06.003

中图分类号：R285.5文献标志码：A

文章编号：2095-6258(2015)06-1107-02

基金项目:吉林省中医药科技项目(2014-ZC24) 。

作者简介:王建玮(1991-) ，女，硕士研究生，主要从事中药复方制剂分子药理学及其应用研究。

收稿日期:(2015-06-10)

*通信作者:林喆,男,教授，博士研究生导师，电话-13252649565，电子信箱-linzhe1228@163.com

Mangiferin hydrastis granulein in rats with diabetes nephropathy mellitus

WANG Jianwei1, LU Hanying2, LIN He1, LYU Guangfu1, ZHANG Jingzhuo1, CHANG Zhida1, LIN Zhe1*

(1.Changchun University of Chinese Medicine, Changchun 130117, China;

2. Changchun Obstetrics-Gynecology Hospital, Changchun 130022, China)

Abstract:ObjectiveTo explore the protective effects of mangiferin hydrastis granulein in rats with diabetes nephropathy mellitus. MethodsBy intraperitoneal injection of STZ and long-term high fat diet preparation in the rat model of diabetic nephropathy. To test the fasting blood glucose (FBG), fasting insulin (FINS), blood lipid, creatinine (SCr), urea nitrogen (BUN) and 24 h urine micro protein content etc of rat serum. ResultsMHG can reduce the rats fasting glucose, fasting insulin levels and insulin resistance index significantly. It also can reduce the rats serum triglyceride, cholesterol, high-density lipoprotein cholesterol and free fatty acid content conspicuously. In addition, MHG can decrease significantly to the model rats SCr, BUN, urinary trace protein content. ConclusionMangiferin hydrastis granulein can protect the diabetic nephropathy rats.

Keywords:Mangiferin hydrastis granulein; diabetic nephropathy; blood glucose; insulin

糖尿病肾病(diabetic nephropathy，DN)是伴随着糖尿病及高血压等疾病发生的，糖尿病病程10年以上者约有50%并发糖尿病肾病[1-2]。发病机制多由氧化应激、炎症反应及纤维化等过程相互交联引起，单从简单的血压、血糖控制很难对其进行根本上的治疗[3-5]。芒黄颗粒是芒果苷和小檗碱制成的颗粒制剂，前期研究[6]发现其对GK糖尿病具有较好的治疗作用，并可能通过促进三酰甘油(TG)的氧化水解，降低血糖，可用于糖尿病的治疗，且阻止血脂紊乱引起的动脉硬化的形成。本研究主要考察芒黄颗粒对糖尿病肾病大鼠的治疗作用，为其进一步的深入研究开发提供依据。

1材料

1.1药物芒黄颗粒(MHG)，黄色粉末，由海南德泽药物研究有限公司提供。二甲双胍肠溶胶囊，0.25 g/粒，北京圣永制药有限公司生产，批号：121004。1.2实验动物SD雄性大鼠，体质量180~220 g，清洁级，由吉林大学动物中心提供，动物合格证编号：SCXK-(吉)2008-0005，饲养条件：室温20~25 ℃，湿度45%~50%，自然昼夜节律，自由进食及饮用净化水。1.3主要试剂链脲佐菌素，sigma产品。血糖(GLU)、血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、游离脂肪酸(FFA)试剂盒，Rat 胰岛素INS ELISA Kit，96T，均由南京建成生物工程研究所生产。

2方法

2.1模型的制备将60只SD雄性大鼠随机分出10只，设为正常对照组，给予正常饮食饮水；其余50只设为高脂饲料组，用于糖尿病肾病的造模，每日给予高脂饲料(由12%猪油，0.5%胆酸盐，1%胆固醇，5%蔗糖，81.5%基础营养饲料配制而成)。于4周末给予大鼠腹腔注射30 mg/kg链脲佐菌素(STZ)，72 h后尾静脉采血测血糖，大于16.7 mmol/L为糖尿病模型造模成功[7]。造模大鼠继续给以高脂饲料，于12周末检测大鼠24 h尿微量蛋白量持续增高，确定糖尿病肾病模型成功。2.2分组与给药将造模完成的50只大鼠按体质量随机分为5组，每组10只，即模型对照组，阳性对照组，芒黄颗粒高、中、低剂量组。阳性对照组每日灌胃二甲双胍，给药浓度125 mg/kg；芒黄颗粒高、中、低剂量组每日分别灌胃芒黄颗粒粉末480、240、120 mg/kg；空白对照组、模型对照组每日灌胃相同体积蒸馏水。连续给药10周。2.3指标检测末次给药前所有大鼠禁食不禁水10 h，给药2 h后称量体质量，各组大鼠腹腔注射3%水合氯醛1 mL/100 g麻醉，腹主动脉取血，4 500 r/min，离心15 min，分离血清。采用生化法测定大鼠血清空腹FBG、TG、TC、HDLC、LDLC、FFA、SCr、BUN，采用ELISA法测定大鼠空腹胰岛素(FINS)、24 h尿微量蛋白含量。2.4数据处理所有实验数据以均数±标准差(±s)表示，采用t检验进行统计学处理，P<0.05为有统计学意义。

3结果

3.1芒黄颗粒对体质量及肾脏指数的影响见表1。

表1　芒黄颗粒对体质量及肾脏指数的影响( ± s, n=10)

组别剂量/(mg/kg)体质量/g肾脏指数/(mg/g)正常对照组 —486±52.9 5.78±0.60 模型对照组 —345±65.4##8.59±1.50##阳性对照组 125404±57.9△ 7.31±1.45△ 芒黄颗粒高剂量组480421±62.7△△7.07±1.24△ 芒黄颗粒中剂量组240406±66.9△ 7.42±1.31△ 芒黄颗粒低剂量组120387±53.7 7.69±1.52

注：与正常对照组比较，##P<0.01；与模型对照组比较，△P<0.05，△△P<0.01

3.2对空腹血糖、空腹胰岛素的影响见表2。

表2　芒黄颗粒对空腹血糖、空腹胰岛素的影响( ± s, n=10)

组别剂量/(mg/kg)FBG/mmol/LFINS/mU/L正常对照组 —3.21±1.20 28.6±4.01 模型对照组 —6.07±2.06##33.5±3.12##阳性对照组 1254.11±1.46△ 29.9±3.06△ 芒黄颗粒高剂量组4804.32±1.36△ 28.2±3.17△ 芒黄颗粒中剂量组2404.46±2.13 29.6±2.27△ 芒黄颗粒低剂量组1204.87±1.96 31.7±3.22

注：与正常对照组比较， ##P<0.01；与模型对照组比较，△P<0.05

3.3芒黄颗粒对大鼠血脂的影响结果表明，芒黄颗粒高、中、低剂量组可显著降低造模大鼠血清TG、TC、HDLC、FFA含量(P<0.05,P<0.01)。

3.4芒黄颗粒对大鼠24 h尿微量蛋白、肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)的影响结果表明，芒黄颗粒高、中、低剂量组均能显著降低模型大鼠SCr、BUN及尿微量蛋白含量(P<0.05,P<0.01)。

4小结

本实验结果表明，给予芒黄颗粒可改善造模大鼠多尿，体毛干枯无光泽，精神萎靡，活动减少等症状；可显著降低造模大鼠空腹血糖、空腹胰岛素含量以及胰岛素抵抗指数(P<0.05)；可显著降低造模大鼠血清三酰甘油、胆固醇、高密度脂蛋白及游离脂肪酸含量(P<0.05);能够显著降低模型大鼠肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)及尿微量蛋白含量(P<0.05)。关于其干预机制目前多限于氧化应激等方面[8-13]，而对其肾小管、肾间质等方面作用有待进一步完善。目前研究结果发现，芒黄颗粒(MHG)对糖尿病肾病(DN)具有一定的干预作用，但对于其机制仍有待于进一步研究。

参考文献：

[1]陈烨,王旭.中医药治疗糖尿病肾病研究[J].吉林中医药,2011,31(1):17-18.

[2]REUTENS A T, ATKINSTKINS R C. Epidemiology of diabetic nephropathy[J]. Contributions to Nephrology, 2001, 170(1): 1-7.

[3]SINGH D K, WINOCOUR P, FARRINGTON K. Oxidative stress in early diabetic nephropathy: fueling the fire[J]. Nature Reviews Endocrinology, 2011, 7(3): 176-184.

[5]吕萌,胡高云,涂志军,等.糖尿病肾病的发病机制及抗糖尿病肾病化合物的研究进展[J].中国新药杂志,2014,23(10):1139-1145.

[6]李娜,曲晓波,胡丽娜,等.芒黄颗粒对GK糖尿病大鼠的降血糖作用[J].吉林大学学报(医学版),2010,36(3):483-486.

[7]石光,石岩,孙晓波,等.糖尿病肾病大鼠模型制备方法与模型建立标准研究[J].辽宁中医药大学学报,2014,16(7):171-173.

[8]张李兴,曹田梅.活血化瘀法治疗糖尿病肾病经验[J].吉林中医药,2008,28(10):713-714.

[9]朱柄铭,陈文璟,苏运钦,等.血清miR-21在糖尿病肾病中的诊断价值[J].中国病理生理杂志,2013,29(12):2160-2166.

[10]王阳阳,于惠玲,李田阳,等.HO-1介导芒果苷对大鼠肝脏缺血/再灌注损伤的保护作用[J].中国药理学通报,2015,31(5):736-737.

[11]卫智权,阎莉,邓家刚,等.芒果苷对慢性支气管炎大鼠超氧化物歧化酶同工酶表达的影响[J].中国药学杂志,2015,50(11):941-946.

[12]陈英男,王国贤,胡国梅.芒果苷对糖尿病大鼠心肌细胞凋亡影响[J].中国公共卫生,2015,31(4):453-455.

[13]邱水晶,刘义,杜红禹.芒果苷对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及机制[J].中国动脉硬化杂志,2010,18(12):956-960.