隐球菌性脑膜炎患者颗粒溶素的表达及临床意义

李楠

【摘要】 目的 探讨隐球菌性脑膜炎患者颗粒溶素（GNLY）的表达和临床意义。方法 选择28例隐球菌性脑膜炎患者作为脑膜炎组， 另选同期进行健康检查的28例健康人作为健康人组， 分离其外周血单个核细胞， 并采用免疫印迹法检测其蛋白含量， 再使用荧光定量法检测mRNA的含量， 分析隐球菌性脑膜炎患者蛋白质含量与其他免疫指标的关系。结果 和健康人组相比脑膜炎组GNLY蛋白、mRNA含量明显降低， 差异具有统计学意义（P<0.05）；脑膜炎组患者的GNLY蛋白质的表达情况和血清中的干扰素（IFN）-γ、免疫球蛋白（Ig）G水平呈正相关， 与白细胞介素（IL）-10水平呈负相关。结论 颗粒溶素直接影响隐球菌性脑膜炎患者的病情发展， 通过测定其水平可为患者的治疗提供理论依据。

【关键词】 隐球菌性脑膜炎；颗粒溶素

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.02.011

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取本院2013年6月～2014年6月收治的28例隐球菌性脑膜炎患者作为脑膜炎组， 以及同期进行健康体检的健康人28例作为健康人组， 脑膜炎组患者中男12例、女16例， 年龄35～67岁， 平均年龄（50.6±5.6）岁， 健康人组中男14例、女14例， 年龄37～65岁， 平均年龄（49.3±5.7）岁。两组年龄、性别等一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 方法 分别在清晨对研究对象抽取静脉血液3 ml作为样本， 然后注入构椽酸钠抗凝管并加入适量的生理盐水稀释， 再进行离心处理， 分离出血清后将每个血清样本分成两份（一份进行免疫印迹反应， 一份进行反转录反应）， 按照说明书的规范进行操作。通过定量的聚合酶链式反应（PCR）和反转录反应， 分别提取研究者血清中的RNA 2 ?g， 进行反转录反应， 反应过程中所使用到的设备和反应酶都按照说明书的内容准备；采用定量PCR反应， 在定量反应的过程中分别进行PCR扩增和RT质量控制， 然后分别求出两组标本的相对表达量[1]。

1. 3 统计学方法 采用SPSS18.0统计学软件对数据进行统计分析。计量资料以均数 ± 标准差（ x-±s）表示， 采用t检验；计数资料采用χ2检验；相关性采用Pearson法进行分析。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2. 1 两组GNLY蛋白、mRNA表达量比较 脑膜炎组GNLY蛋白含量（0.62±0.06）mmol/L明显低于健康人组的（1.11± 0.12）mmol/L， 几乎为健康人组含量的0.56倍左右；脑膜炎组GNLY-mRNA的表达量（0.35±0.04）mmol/L低于健康人组的（1.20±0.15）mmol/L， 差异均具有统计学意义（P<0.05）。

2. 2 两组免疫指标对比 研究发现脑膜炎组血清IgG含量明显少于健康人组（P<0.05）， GNLY蛋白的表达和IgG呈正相关关系。见表1。

2. 3 两组血清细胞因子水平比较 健康人组血清中IL-10、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、IFN-γ、IL-4水平与脑膜炎组比较， 差异均具有统计学意义（P<0.05）。GNLY蛋白的表达与IFN-γ水平呈正相关， 与IL-10水平呈负相关。见表2。

3 小结

本次试验中脑膜炎组28例患者GNLY蛋白及mRNA的含量较健康人组明显下降（P<0.05）， 由此分析两种指标的表达量均明显下降， 其与致病关系密切。Th1型免疫应答能够分泌 Th1型细胞因子（如IFN -γ）， 在强细胞介导的免疫应答及对宿主抵抗细胞内病原菌过程中发挥重要作用， 而Th2型免疫应答分泌Th2细胞因子（如IL-10）却可能抑制Th1型细胞因子介导的免疫应答， 加重感染病情， 试验中健康人组的免疫指标（IgG）与细胞因子水平（IL-4等）和脑膜炎组比较差异具有统计学意义（P<0.05）。

综上所述， 隐球菌性脑膜炎患者的发病与患者GNLY的蛋白含量、mRNA含量相关， 通过对其含量的测定可给临床治疗方案的制订提供坚实依据。

参考文献

[1] 周晔， 邓安梅， 谷明莉， 等.隐球菌性脑炎患者颗粒酶B、颗粒溶素、穿孔素的表达及临床意义.中国实验诊断学， 2011， 13（1）： 64-68.

[2] 周晔， 邓安梅， 奚伟强， 等.隐球菌性脑膜炎患者颗粒溶素的表达及其临床意义.临床军医杂志， 2011， 37（4）：552-553.

[3] 陈燕， 周晔， 邓安梅， 等.穿孔素、颗粒酶、颗粒溶素在银屑病患者中的表达及临床意义.临床军医杂志， 2010， 36（4）：861-862.

[收稿日期：2015-09-11]