肿瘤转移抑制基因KAI1/CD82和整合素β1在子宫内膜腺癌中表达及临床意义

肿瘤转移抑制基因KAI1/CD82和整合素β1在子宫内膜腺癌中表达及临床意义

张晓勇魏琳琳

(辽宁医学院附属第一医院妇产科，辽宁锦州121000)

摘要〔〕目的研究KAI1/CD82与整合素β1亚基在子宫内膜腺癌中的表达以及与临床病理特征之间的关系。方法采用免疫组织化学S-P法检测46例子宫内膜腺癌患者中KAI1/CD82蛋白和整合素β1亚基的表达。结果KAI1/CD82蛋白在子宫内膜腺癌中的阳性表达率较正常子宫内膜组织降低明显(P<0.01)。KAI1/CD82在子宫内膜腺癌中的阳性表达率与手术-病理分期(P=0.008)、组织学分级(P=0.001)、肌层浸润深度(P=0.017)及淋巴结转移(P=0.005)密切相关。整合素β1蛋白在子宫内膜腺癌中的阳性表达率明显高于正常子宫内膜组织(P<0.001)。整合素β1在子宫内膜腺癌组中的阳性表达率与组织学分级(P=0.013)及淋巴结转移(P=0.003)密切相关。 KAI1/CD82与整合素β1的表达呈负相关。结论KAI1/CD82表达下调，同时伴整合素β1的异常表达增高，促进子宫内膜腺癌的侵袭和转移。检测其表达异常，对判断子宫内膜腺癌转移趋势、评估预后及指导治疗意义重大。

关键词〔〕KAI1/CD82；整合素β1；免疫组织化学法；子宫内膜腺癌

中图分类号〔〕R737.33〔文献标识码〕A〔

第一作者：张晓勇(1971-)，女，硕士，副主任医师，主要从事妇科肿瘤研究。

大多数子宫内膜癌患者死于肿瘤后期癌细胞的扩散及转移。CD82蛋白作为肿瘤转移抑制基因KAI1的一种基因产物，属于跨膜4超家族(TM4SF)成员。研究发现TM4SF分子可与整合素形成复合体，通过介导细胞的黏附来达到抑制肿瘤细胞侵袭及转移的目的。本文检测KAI1/CD82和整合素β1在子宫内膜腺癌患者中的水平变化及与临床病理特征间的关联性。

1资料与方法

1.1一般资料2012年6月至2014年6月在天津医科大学第二医院行手术切除治疗的子宫内膜腺癌患者的石蜡标本46例，不典型增生子宫内膜(EIN)14例，因子宫肌瘤手术切除的正常增生期子宫内膜标本13例进行检测，病理诊断均经HE染色及两位病理专家确诊。子宫内膜腺癌的手术-病理分期参考国际妇产科联盟(FIGO，2000年)的标准。年龄33～72岁，中位年龄56.5岁，排除标准：术前行放化疗或激素治疗者；合并妊娠、子宫内膜增殖症或妇科以外的其他肿瘤的患者。

1.2方法采用免疫组化SP法检测KAI1和整合素β1蛋白的表达。鼠抗人单克隆抗体KAI1(sc-17752)购自上海新肽生物科技有限公司，鼠抗人单克隆抗体Integrinβ1(sc-9970)购自上海天呈医流科技股份有限公司，SP免疫组织化学染色试剂盒购自北京绿源大德生物科技有限公司。阳性对照选择已确定的阳性组织切片，阴性对照选择以磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗进行。

1.3指标判断依据①KAI1与整合素β1表达阳性判定标准：以细胞膜和(或)细胞质中出现清晰棕黄色细颗粒为依据〔1〕。②综合评分的判定：综合评分=阳性细胞数评分+染色强度评分，综合评分≥4分者为“+”表达，<4分为“-”表达。其中阳性细胞数以阳性细胞数的百分率为参考，>50%计3分，>25%且≤50%计2分，>5%且≤25%计1分，≤5%计0分。染色强度评分以细胞染色强度的分级为参考，棕褐色计3分，棕黄色计2分，浅黄色计1分，无着色计0分。

1.4统计学方法利用SPSS18.0统计学软件进行χ2检验或Fisher确切概率检验和Spearman等级相关分析。

2结果

2.1KAI1、整合素β1在不同组织中的表达情况KAI1主要在细胞膜和(或)细胞质中表达，表达产物为棕黄色颗粒。KAI1蛋白、整合素β1在子宫内膜腺癌组织中的阳性表达率较子宫内膜不典型增生组和正常子宫内膜组显著降低、升高(P<0.05)。见表1和图1。整合素β1主要在细胞膜、细胞质中表达，表达产物呈棕黄色或棕褐色。

表1　 KAI1/CD82、整合素β1在不同组织中的阳性表达

1)与子宫内膜腺癌相比

2.2KAI1、整合素β1的蛋白表达与子宫内膜腺癌临床病理特征的相关性分析随着子宫内膜腺癌手术病理分期、组织学分级、肌层浸润深度的增加及淋巴结的转移，KAI1蛋白的阳性表达率呈递减趋势，呈负相关(P<0.05)。在子宫内膜腺癌组织中，随着组织学分级的增加及淋巴结的转移，整合素β1蛋白阳性表达率呈增高趋势，呈正相关(P<0.05)。见表2。

2.3KAI1与整合素β1在子宫内膜癌组织中表达的相关性分析列联系数r=-0.433(χ2=8.626，P=0.003)。

正常子宫内膜KAI1/CD82阳性表达

子宫内膜腺癌KAI1/CD82阴性表达

正常子宫内膜整合素β1阴性表达

子宫内膜腺癌整合素β1阳性表达

临床资料nKAI1/CD82χ2值P值整合素β1χ2值P值年龄(岁) <50116(54.5)1.8850.1703(27.3)3.5930.058 ≥503515(42.9)21(60.0)组织学分级 G11311(84.6)12.0650.0025(38.5)8.7130.013 G2228(36.4)9(40.9) G3112(18.2)10(90.9)手术-病理分期 Ⅰ期2315(65.2)7.0970.00810(43.5)1.3940.238 Ⅱ～Ⅲ期236(26.1)14(60.9)肌层浸润深度 无或≤1/22415(62.5)5.7410.01711(45.8)0.8090.369 >1/2226(27.3)13(59.1)淋巴结转移 有3519(54.3)7.7890.00514(40.0)8.6930.003 无112(18.2)10(90.9)

3讨论

子宫内膜癌发病率占女性生殖器恶性肿瘤的一半以上。随着医疗技术及分子生物学的不断进步及发展，关于子宫内膜癌的基因治疗、分子靶向治疗等新的治疗手段不断涌现。但其5年生存率仍处于癌症生存的较低水平，其主要的死亡原因为癌细胞的侵袭及转移。该过程涉及转移抑制基因的缺失及失活、转移促进基因的激活及肿瘤细胞、机体、靶细胞间的关系。

KAI1作为新的肿瘤转移抑制基因的一个，在人染色体11p11.2上有表达〔2〕。KAI1基因参与肿瘤的作用过程尚无明确定论，推测可能的原因为KAI1基因介导了细胞与环境间的信号传递，进而参与细胞的运动及分化，达到抑制肿瘤的侵袭和转移的目的〔3〕。近年研究发现KAI1和其他TM4SF分子可与整合素β1亚基组成四分子交联网，对细胞表面的蛋白进行准确的定位，调节整合素家族依赖性细胞外基质(ECM)的黏附作用〔4〕。

Guo等〔5〕进一步的研究表明KAI1在膀胱癌、结直肠癌、乳腺癌、卵巢癌〔6〕和宫颈癌〔7〕患者中的表达明显降低。White等〔8〕利用Western印迹方法对8种子宫内膜癌细胞株进行检测，结果发现KAI1在其中7种癌细胞株中均表现为低表达，提示KAI1可能参与子宫内膜癌的发展过程。Liu等〔9〕研究表明，在早期子宫内膜癌患者发展至转移的过程中，KAI1的表达丢失在28%～71%，与本文结果基本一致。

整合素作为跨膜糖蛋白的一种，存在两个亚单位α、β，并在恶性肿瘤的发生、发展及转移中发挥功效。整合素β1家族是介导ECM信号的最主要的细胞表面受体，介导细胞与细胞、细胞与基质、细胞-基质-细胞之间的反应〔10〕。整合素β1亚基在肿瘤的发生及转移过程中可能发挥介导细胞黏附的功效。整合素β1、KAI1/CD82可能利用彼此间的信号网络来进行信号传导间级联反应的调节，进而改变细胞的行为，发挥其协同作用。综上，KAI1/CD82与整合素β1的联合检测能更好地对子宫内膜癌的生物学行为、转移趋势做出合理的判定，指导患者的预后评估及综合治疗等。

4参考文献

1许良中，杨文涛.免疫组织化学反应结果的判断标准〔J〕.中国癌症杂志，1996；6(4)：229-31.

2Dong JT，Lamb PW，Rinker Schaeffer CW，etal.KAI1，a metastasis suppressor gene for prostate cancer on human chromosome 11pl1.2〔J〕.Science，1995；268(5212)：884-6.

3Horejsi V，Vlcek C.Novel structurally distinct family of leucocyte surface glycoproteins including CD9，CD37，CD53 and CD63〔J〕.FEBS Lett，1991；288(1-2)：1-4.

4He B，Liu L，Cook GA，etal.Tetraspanin CD82 attenuates cellular morphogenesis through down-regulating integrin alpha6-mediated cell adhesion〔J〕.J Biol Chem,2005；280(5)：3346-54.

5Guo X，Friess H，Graber HU，etal.KAI1 expression is up regulation in pancreatic cancer is associated with lymphnode and distant metastases〔J〕.Int Cancer，1996；56：4876-80.

6Liu FS，Dong JT，Chen JT，etal.Frequent down-regulation and lack of mutation of the KAI1 metastasis suppressor gene in epithelial ovarian carcinoma〔J〕.Gynecol Oncol，2000；78(1)：10-5.

7Liu FS，Chen JT，Dong JT，etal.KAI1 metastasis suppressor gene is frequently down-regulated in cervical carcinoma〔J〕.Am J Pathol，2001；159(5)：1629-34.

8White A，Lamb PW，Barrett JC，etal.Frequent downregulation of the KAI1(CD82)metastasis suppressor protein in human cancer cell lines〔J〕.Oncogene，1998；16(24)：3143-9.

9Liu FS，Dong JT，Chen JT，etal.KAI1 metastasis suppressor protein is down-regulated during the progression of human endometrial cancer〔J〕.Clin Cancer Res，2003；9(4)：1393-8.

10Riemenschneider MJ，Mueller W，Betensky RA，etal.In situ analysis of integrin and growth factor receptor signaling pathways in human glioblastomas suggests overlapping relationships with focal adhesion kinase activation〔J〕.Am J Pathol，2005；167(5)：1379-87.

〔2014-01-11修回〕

(编辑苑云杰)