脓毒血症老年患者血清中白细胞介素－18、－35和肿瘤坏死因子α表达及意义

脓毒血症老年患者血清中白细胞介素-18、-35和肿瘤坏死因子α表达及意义

杨培雄李琳业吴占庆韩何武侯明1张呈祥1

(青海大学附属医院急诊外科，青海西宁810000)

摘要〔〕目的观察脓毒血症老年患者血清中白细胞介素(IL)-18、IL-35及肿瘤坏死因子(TNF)-α表达特征，关注其临床意义。方法83例诊断为脓毒血症的老年患者作为观察组，55例体检健康老年人的血清样本作为对照组，应用酶联免疫吸附实验检测两组血清中IL-18、IL-35和TNF-α的表达。结果两组血清中IL-18、IL-35和TNF-α的表达差异显著。观察组血清中IL-18、IL-35和TNF-α的表达与病变类型、是否伴有并发症及预后密切相关。相关分析显示观察组中IL-18和IL-35、IL-35和TNF-α均呈负相关性。结论脓毒血症老年患者血清中IL-18和TNF-α高表达、IL-35低表达，IL-18、IL-35和TNF-α三者间具有协同作用，共同促病变的进展。联合检测IL-18、IL-35和TNF-α表达在一定程度上可以判断预后。

关键词〔〕脓毒血症；白细胞介素(IL)-18；IL-35；肿瘤坏死因子(TNF)-α

中图分类号〔〕R63〔文献标识码〕A〔

1青海大学附属医院急诊ICU

第一作者：杨培雄(1966-)，男，副主任医师，主要从事腹部创伤及危重病治疗研究。

脓毒血症是危重症患者临床较为严重的全身炎症反应，病变严重者可以引起休克和多器官衰竭等严重并发症〔1〕。患者在脓毒症发生和发展过程中可以分泌多种细胞因子，对病程的进展影响较大〔2，3〕。白细胞介素(IL)-18作为机体内中性粒细胞的趋化和活化因子，可以诱导炎性细胞的形态改变，释放超氧化物和溶酶体酶，促进炎症反应〔4〕。肿瘤坏死因子(TNF)-α是急性炎性因子，对炎症的发展和机体的免疫反应具有促进作用〔5〕。IL-35可以对抗促炎介质，维持正常机体的炎性因子平衡〔6〕。本研究关注脓毒血症老年患者血清中IL-18、IL-35和TNF-α的表达及其相关性。

1资料与方法

1.1一般资料近3年我院确诊为脓毒血症的老年患者83例作为观察组。排除标准：①伴有恶性肿瘤的患者；②有严重先天性疾病或畸形的患者；③有精神疾病史的患者。其中男43例，女40例；年龄60～85(平均70.4)岁。55例我院经体验证实为健康的老年人血清标本作为对照组，其中男28例，女27例；年龄60～67(平均64.3)岁。两组一般资料无明显差异(P>0.05)。

1.2IL-18、IL-35和TNF-α检测方法观察组在确诊后抽取空腹静脉血5 ml，对照组常规抽取空腹静脉血5 ml，分离血清后置于-20℃冰箱中待检。IL-18、IL-35和TNF-α检测均应用酶联免疫吸附实验(ELISA)法。样本均于2 w内集中检测，并由同一检验师完成操作。

1.3病变程度分组依据按脓毒血症的严重程度分为脓毒症、严重脓毒症和脓毒性休克。判断标准：严重脓毒症为脓毒症伴有器官功能障碍、组织灌注不良或低血压。脓毒性休克为严重脓毒症给予足量的液体复苏后仍然伴有无法纠正的持续性低血压。

1.4统计学方法应用SPSS13.0统计软件进行t检验、方差分析、线性相关性分析。

2结果

2.1两组血清IL-18、IL-35和TNF-α的表达比较两组血清中IL-18、IL-35和TNF-α的表达差异显著(P<0.001)。即观察组中见IL-18和TNF-α高表达，IL-35低表达。见表1。

2.2不同病变程度患者血清中IL-18、IL-35和TNF-α表达量的比较不同病变程度患者血清中IL-18、IL-35和TNF-α的表达差异有统计学意义。见表2。

表1　两组血清中IL-18、IL-35和

表2　不同病变程度患者血清中IL-18、IL-35和

2.3是否伴有严重并发症患者血清IL-18、IL-35和TNF-α表达量的比较观察组是否伴有严重并发症患者血清中IL-18、IL-35和TNF-α的表达差异有统计学意义。见表3。

表3　是否伴有严重并发症患者血清中IL-18、

2.4随访存活组与死亡组患者血清中IL-18、IL-35和TNF-α表达量的比较不同预后分组患者血清中IL-18、IL-35和TNF-α的表达量差异有统计学意义。见表4。

表4　随访存活组与死亡组患者血清中IL-18、IL-35和

2.5观察组IL-18、IL-35和TNF-α表达的相关性分析观察组中IL-18和IL-35(r=-0.49，P=0.041 2)、IL-35和TNF-α(r=-0.46，P=0.038 7)均具有负相关性。

3讨论

脓毒症是指由感染所诱发的全身炎症反应，多种细胞因子形成相互作用〔7〕。老年人由于免疫力低下和抵抗力低下，感染时常较重。IL-18是机体中的促炎物质，表达升高时可以对NK细胞的增殖有一定影响〔8〕。有观点认为IL-18可以诱导淋巴细胞的增殖过程，即促进Th0细胞向Th1细胞分化。有学者认为IL-18可以启动炎性级联反应，诱导淋巴细胞的克隆性增生和活化〔9,10〕。IL-35是IL家族的新成员，主要由Treg分泌，在正常机体中的表达稳定，主要发挥抑制炎性反应及免疫因子活性的负向调节作用〔11,12〕。有研究认为IL-35可以抑制炎症反应，并防止过度的自身免疫反应的发生〔13〕。动物实验研究显示IL-35在经树突细胞刺激后产生，可以抑制外周血中CD4和CD8阳性的T细胞反应，抑制过敏性病变的进展〔14〕。TNF-α在炎性病变时可以引起前列腺素和基质金属蛋白酶的增多，促进各器官纤维组织的重塑，同时引起成纤维细胞的增生〔15,16〕。也有观点认为TNF-α能刺激机体成纤维细胞分泌多种IL，有效降解蛋白多糖，同时刺激血管内皮细胞表达黏附分子，加速炎症的进展〔17〕。

本实验结果提示血清中IL-18、TNF-α、IL-35异常表达对促进脓毒血症病变进展有重要作用。IL-18和TNF-α的高表达是机体炎性高反应状态的一个指标，可以激活细胞因子的“瀑布效应”，同时引发炎症的进展〔18〕。IL-35正常表达对于免疫系统和免疫反应具有负向调控的作用，可以抑制过度的炎症反应及过度的自身免疫反应〔19〕。有学者发现IL-35表达下降的机体Treg 细胞数量明显低于正常机体〔20〕，因此脓毒症患者Treg 细胞量对IL-35表达有直接影响，推测脓毒血症患者Treg 细胞可能受到一定损伤。IL-18、IL-35和TNF-α的生物活性与宿主感染密切相关，一方面表现为IL-18和TNF-α 诱导干扰素-γ生成而保护宿主，并在非特异性反应中作为免疫刺激因子协助特异性B淋巴细胞介导免疫反应〔21〕，另一方面IL-35表达下降后，引起相关抗炎介质表达下降，炎性介质对机体的损伤加重，同时可以对抗相关治疗〔22,23〕。也有研究认为IL-18和TNF-α的水平是判断细菌和病毒感染的较好指标〔24〕。

综上，脓毒血症老年患者血清中IL-18和TNF-α高表达、IL-35低表达，IL-18、IL-35和TNF-α三者间具有协同作用，共同促病变的进展。联合检测IL-18、IL-35和TNF-α的表达在一定程度上可以判断预后。

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〔2014-03-11修回〕

(编辑苑云杰)