针刺对哮喘模型大鼠呼吸功能的影响

针刺对哮喘模型大鼠呼吸功能的影响

孙娜崔建美刘慧娟林清高秀娟

(河北联合大学中医学院，河北唐山063000)

摘要〔〕目的观察针刺大椎、风门、肺俞对哮喘模型大鼠呼吸功能的影响。方法用卵蛋白诱导哮喘大鼠模型，针刺组针刺大椎、风门、肺俞,隔日1次；假针刺组针刺只刺入皮下1 mm，不予行针。2 w后，用卵蛋白激发气道高反应性，测定大鼠肺功能变化。结果针刺组大鼠肺顺应性、弹性阻力、每分通气量与呼吸率均有所改善，而假针刺组无明显改善。结论针刺大椎、风门、肺俞能有效减慢呼吸频率,改善呼吸功能,对哮喘大鼠有明显的治疗作用，而仅刺入皮下的假针刺组则无此效果。

关键词〔〕针刺；哮喘大鼠模型；肺顺应性；弹性阻力

中图分类号〔〕R246.1〔

基金项目：河北省中医药管理局科研计划项目(2014191；201340701)；河北省自然科学基金资助项目(C2010001797)

通讯作者：崔建美(1978-)，女，博士，副教授，主要从事针灸教学及针灸效应的研究。

第一作者：孙娜(1981-)，女，硕士，讲师，主要从事针灸的基础与临床研究。

哮喘是临床最常见的慢性气道非特异性炎症性疾病，发病原因尚不清楚，从哮喘发病机制上寻找特异性防治和根治哮喘的方法一直是人们努力的方向。中医尤其是针灸防治哮喘的大量临床报道疗效肯定了其对哮喘的治疗作用〔1，2〕。本实验观察针刺大椎、风门、肺俞对哮喘大鼠肺顺应性、弹性阻力、每分通气量、呼吸率的影响。

1实验材料

1.1实验动物清洁级雄性SD大鼠40只，体重(120±10)g，由天津市山川红实验动物科技有限公司提供〔(SCXK(津)2009-0001)〕;饲养于河北联合大学实验动物中心，屏障环境动物实验设施中〔(SYXK(冀)2010-0038)〕，环境温度20℃～25℃，湿度60%～70%，通风良好。饲料由北京华阜康生物科技股份有限公司提供〔(SCXK(京)2009-0008)〕，饮水为超滤系统处理的无菌水。实验动物采取“3R”原则进行饲养及使用，并给予人道主义的关怀。

1.2实验仪器及试剂medlab生物信号采集处理系统(南京美易科技有限公司)；TDL-5-A型离心机(上海安亭科学仪器厂)；华佗牌0.35 mm×25 mm毫针。卵蛋白(Sigma公司，批号A5378)； Al(OH)3凝胶(天津欧博凯化工有限公司，批号：20110711)。

1.3分组实验大鼠随机分为空白对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、针刺组(C组)、假针刺组(D组)共4个实验组，每组10只。

1.4哮喘模型制作与针刺方法B组、C组、D组一次性腹腔注射含卵蛋白1 mg和Al(OH)310 mg的生理盐水1 ml,2 w后B组、C组、D组于颈外静脉内注射卵蛋白(5 mg/kg)激发哮喘发作〔3〕。C组自造模之日起,针刺大椎、肺俞(双侧)、风门(双侧),用75%酒精消毒后刺入8 mm，平补平泻，每次留针20 min,每隔5 min行针1次(以200次/min捻转速度捻针20次为行针1次),隔日针刺1次,共针刺7次。D组针刺穴位同C组，只刺入皮下1 mm，不予行针，留针20 min。

1.5呼吸功能的检测大鼠腹腔注射10%的水合氯醛(3.5 ml/kg)麻醉后，用橡皮筋捆绑四肢后仰卧位固定于实验台上，剪开颈部皮肤,暴露左侧颈外静脉，用静脉留置针行颈静脉穿刺并固定,用于注射卵蛋白。暴露气管和食管,剪斜口,插入气管插管和食管插管,用手术线扎紧固定,连接呼吸流量测定仪和血压换能器,连接计算机,打开medlab生物信号采集处理系统，准备测定。各组大鼠稳定5 min后,连续采样3 min，将其平均值作为激发前正常数据，然后以5 mg/kg体重为标准，B组、C组、D组于颈外静脉内注射卵蛋白，进行激发。激发后，连续采样30 min,由计算机系统分析计算肺顺应性、气道弹性阻力、每分通气量与呼吸率。

1.6统计学方法采用SPSS13.0软件进行独立样本t检验、单因素方差分析及LSD检验。

2结果

2.1 大鼠哮喘模型的复制结果见图1、图2。卵蛋白激发前，A组与B组肺顺应性(P=0.605)与气道弹性阻力(P=0.05)无明显差异。卵蛋白激发后,B组大鼠气道弹性阻力上升(P=0.00)、肺顺应性下降(P=0.00)。

2.2针刺对哮喘大鼠肺顺应性、气道弹性阻力、每分通气量与呼吸率的影响见表1。B组与C组相比肺顺应性(P=0.00)、每分通气量(P=0.00)增加，气道弹性阻力(P=0.00)减小，呼吸率(P=0.00)减慢。C组与B组相比肺顺应性(P=0.20)、气道弹性阻力(P=0.90)、每分通气量(P=0.14)、呼吸率(P=

0.91)无明显改变。针刺大椎、风门、肺俞能有效减慢呼吸频率,改善呼吸功能,对哮喘大鼠有明显的治疗作用，而假针刺组则无此明显改变。

-3、-1表示卵蛋白激发前3 min和1 min，下图同 图1　卵蛋白激发对哮喘模型大鼠肺顺应性的影响

图2　卵蛋白激发对哮喘模型大鼠气道弹性阻力的影响

组别肺顺应性(ml/cmH2O)弹性阻力(cmH2O/ml)每分通气量(ml)呼吸率(次/min)A组9.497±0.3150.267±0.0130.129±0.01878.1±3.9B组6.363±0.4991)0.546±0.0131)0.086±0.0111)3)130.1±5.11)C组8.4±0.3372)0.277±0.0132)0.126±0.0232)81.9±2.22)D组6.975±0.4371)3)0.572±0.0091)3)0.085±0.0111)3)129.9±5.21)3)F/P值122.330/0.00089.94/0.00021.788/0.000452.007/0.000

与A组比较：1)P<0.05，与B组比较：2)P<0.05；与C组比较：3)P<0.05

3讨论

支气管哮喘属中医的哮证,喘证,咳嗽,肺胀等范畴，发病机制复杂,但广泛气道狭窄是产生哮喘临床症状最重要的基础，其主要表现为气道阻力增加和肺顺应性下降。针刺选取大椎、风门、肺俞3个穴位,大椎为督脉、手足三阳经交会穴位,风门系足太阳膀胱经和督脉交会穴，肺俞为足太阳膀胱经之背俞穴。 三穴在治疗哮喘时常配伍应用且屡收奇效〔4〕。本实验结果说明针刺可以改善哮喘大鼠的呼吸道狭窄情况，为针刺治疗哮喘的机制之一。假针刺对于哮喘大鼠无治疗效果，说明针刺得气是针灸起到治疗作用的关键，其机制有待于进一步研究。

4参考文献

1韩健.针刺鱼际穴对支气管哮喘患者肺功能的影响及即刻平喘效应观察〔J〕.中国针灸，2012；32(10)：891-4.

2谭程，赵吉平，张昶.近十年针刺治疗支气管哮喘的临床及实验研究现状〔J〕.针刺研究，2011；36(4)：302-12.

3崔龙苹,杨永清,马淑兰,等.过敏性哮喘大鼠模型的制备〔J〕.上海实验动物科学,2000；20(2):69-71.

4邵素菊，权春分，邵素霞，等.一腔热血育桃李，妙手回春济黎民〔J〕.中国针灸，2010；30(8)：687-91.

〔2013-11-06修回〕

(编辑赵慧玲/曹梦园)