绝经后老年骨质疏松患者血清脂联素与骨代谢生化指标的相关性

绝经后老年骨质疏松患者血清脂联素与骨代谢生化指标的相关性

王景蒋欣峰1李小梅洪苑2

(肇庆医学高等专科学校，广东肇庆526020)

摘要〔〕目的探讨绝经后老年骨质疏松患者血清脂联素(ADP)与骨代谢生化指标的相关性及其发病机制。方法测定112例绝经后老年骨质疏松患者(实验组) 和60例绝经后健康老年妇女(对照组) 的血清APP、血清骨钙素(BGP)、骨特异性碱性磷酸酶(BAP)、抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRACP-5b)、25 羟基维他命 D(25-OH-VD)和骨密度(BMD) 等指标。结果实验组与对照组比较，各个检查部位BMD均有显著差异(均P<0.05) 。实验组血清ADP、BGP、BAP显著高于对照组(P<0.05)，而TRACP-5b和25-OH-VD显著低于对照组(P<0.05)。绝经后老年骨质疏松患者的血清ADP与BGP、BAP呈显著正相关(r=0.658,0.573,均P<0.01)，与髋部BMD、腰椎BMD呈显著负相关(r=-0.476,-0.391,P<0.01,P<0.05)。绝经后健康老年妇女的血清ADP与髋部BMD、腰椎BMD呈显著负相关(r=-0.327,-0.425,均P<0.05)。结论 血清ADP水平与骨代谢生化指标密切相关，可能成为反映骨代谢状态的新型预测因子。

关键词〔〕骨质疏松；绝经后；脂联素；骨密度；骨代谢指标；血清骨钙素骨特异性碱性磷酸酶；抗酒石酸酸性磷酸酶-5b；25 羟基维他命 D

中图分类号〔〕R580〔

1四川师范大学2肇庆市第一人民医院

第一作者：王景 (1985-)，女，讲师，硕士，主要从事妇产科临床教育及研究。

血中骨代谢生化检查在绝经后骨质疏松(PMOP)的早期诊断中具有重要价值。目前其发病机制尚不明了。血清脂联素(ADP)是由脂肪细胞分泌的一种特异性蛋白。成骨细胞是ADP的作用靶细胞〔1〕。ADP可直接作用于骨、诱导人成骨细胞增殖分化和直接刺激细胞核因子κB受体活化基因配体(RANKL)而抑制骨保护素(OPG)生成〔2〕，表明ADP与骨代谢密切相关。本研究观察绝经后女性血清ADP与骨代谢生化指标,血清中段骨钙素(BGP)、骨特异性碱性磷酸酶(BAP)、抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRACP-5b)、25 羟基维他命 D(25-OH-VD)间的关系,进一步探讨ADP对骨代谢的影响作用。

1资料与方法

1.1研究对象选择2009 年2月至2012 年10月肇庆医学高等专科学校附属医院妇产科门诊就诊的绝经后老年骨质疏松妇女112例为实验组，平均年龄(66.3±10.2)岁,体质量指数(BMI)(23.5±1.3)kg/m2,平均绝经时间(10.7±4.8)年,体质量(61.7±3.2)kg。双能 X 线骨密度仪免费检查骨密度(BMD)。符合《中国人骨质疏松的建议诊断标准》中的相关要求〔3〕，无可影响骨转换生化指标的疾病者(甲状腺功能亢进、甲状旁腺功能亢进、骨肿瘤、类风湿关节炎等)；半年内无服用过可影响骨代谢的药物(维生素D、雌激素、肝素、氟化物、二膦酸盐和肾上腺皮质激素、钙制剂、二磷酸盐等)；无心血管系统、肝、肾和血液系统等严重原发性疾病；无已确诊或怀疑的雌激素依赖性肿瘤或有雌激素依赖性肿瘤家族史；1年内无骨折和卵巢摘除史。选择同期参加体检的绝经后健康妇女60例作为对照组，平均年龄(65.7±11.5)岁，BMI(22.7 ±1.6)kg/m2，平均绝经时间(9.9±4.4) 年，体质量( 60.8±3.6)kg。腰椎BMD 和胸腰椎X 线片结果正常。两组受试者一般资料的差异无统计学意义(P>0.05) ，具有可比性。

1.2方法

1.2.1BMD测量美国 Hologic 双能 X 线BMD测量仪测量腰椎L1～L4、左侧髋部总体、左侧前臂面积BMD。BMD的测定采用DXA仪进行，并将BMD值(g/cm2)换算成T值。每天测量前用体模进行校正。所有部位的变异系数(CV) 平均值为(0.93%±0.37%),95%可信区间为0.76%～ 1.12%。由1名专业技术人员进行BMD测定。峰值BMD(P)采用青岛地区的BMD数据库作为标准〔4〕：正常组(T值≥ -1)，低骨量(-1>T值>-2.5)，骨质疏松(T值≤-2.5)。

1.2.2血清ADP 检测抽血前隔夜空腹，于第2天7点到9点间抽取静脉血，血液凝固后进行离心，分离血清，将分离得到的血清分成若干等份并置于-70℃待检测。检测试剂盒购于美国millipore 公司,采用美国雷杜公司RT- 6000 全自动酶标仪测定,采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定，该ELISA试剂盒检测ADP的批内和批间CV分别为5.04%和6.01%，实验步骤严格按照说明书进行。

1.2.3骨代谢标志物测试当天早上在空腹的状态下采静脉血10 ml，放置于4℃保存24 h，低温高速离心机3 000 r/min离心25 min，取离心后的血清分装置于-80℃低温保存。BGP、BAP、TRACP-5b、25-OH-VD采用S200 型酶标仪、酶联免疫试剂盒，用ELISA法进行测定。BGP试剂盒批内和批间CV分别为5.1%和6.5%、BAP试剂盒批内和批间CV分别为4.1%和5.3%、TRACP-5b试剂盒批内和批间CV分别为批内 7.5%和8.6%、25-OH-VD 试剂盒批内和批间CV分别为批内 6.1% 和7.3%。实验步骤严格按照说明书进行。

1.3统计学方法应用SPSS15.0软件进行t检验，Pearson相关分析。

2结果

2.1BMD测量结果两组比较各个检查部位BMD均有显著性差异(均P<0.05) 。见表1。

2.2两组血清ADP及骨代谢生化指标结果实验组血清ADP、BGP、BAP显著高于对照组(P<0.05)，而TRACP-5b和25-OH-VD显著低于对照组(P<0.05)。见表1。

表1　两组BMD、血清ADP及骨代谢生化指标比较

2.3血清ADP的相关性分析绝经后老年骨质疏松患者的血清ADP与BGP、BAP呈显著正相关(r=0.658,0.573,均P<0.01)，与髋部BMD、腰椎BMD呈显著负相关(r=-0.476,-0.391,P<0.01,P<0.05)。绝经后健康妇女的血清ADP与髋部BMD、腰椎BMD呈显著负相关(r=-0.327,-0.425,均P<0.05)。

3讨论

在正常的骨代谢周期中,成骨细胞不断地形成新骨，破骨细胞对旧骨进行持续地吸收，这两个环节构成一种动态的平衡过程，不断地进行骨重建。一旦这种平衡被打破，破骨细胞的骨吸收速率超过了骨形成的速率，就会导致常见的骨质疏松。近些年，随着分子生物学和细胞生物学等领域的不断深入研究，人们越来越重视到细胞因子在骨代谢过程中的重要作用。细胞因子通过自分泌和旁分泌两种形式作用于骨组织中的成骨细胞、破骨细胞和髓腔未分化间充质细胞，以调节骨形成与骨吸收〔5〕。ADP便是新近发现的一种细胞因子。人类ADP基因位于3q27 ，大小为17 kb，由3 个外显子、2 个内含子组成，转录翻译后形成的单体是由247个氨基酸组成的胶原蛋白。ADP是由脂肪细胞特异性分泌的一种脂肪因子，其受体AdipoR广泛存在于全身多种组织。AdipoR1 分布广泛,在骨骼肌中含量最多；而AdipoR2 则以肝脏中分布为主。研究表明,成骨细胞两种受体均有表达。ADP通过AdipoR1/ p38MAPK 径路诱导人类成骨细胞RANKL,抑制护骨素的表达,从而诱导破骨细胞分化〔6〕。另一方ADP可以增加MC3T 3- E1 成骨细胞碱性磷酸酶mRNA 的表达水平和骨基质的矿化〔7〕。Shinoda等〔8〕证实ADP通过自分泌，旁分泌和内分泌3条途径综合作用于骨代谢。

BMD检测是骨质疏松诊断的金标准，但变化缓慢，不能及时反映出治疗后骨代谢的结果。比较而言，血中骨代谢的生化检查能够较早地察觉到骨代谢的异常，在PMOP的早期诊断中具有非常重要的价值。常用的实验室用来测量骨代谢生化的标志物包括BGP、BAP、TRACP-5b、25-OH-VD。其中BGP是反映骨转换和骨形成的一项敏感指标。BAP是一种重要的标志性酶类，标识着细胞向成骨细胞分化的过程，是成骨活性的重要指标。TRACP-5b可反映骨吸收的状况。维生素D是催进钙吸收的重要物质。血清25-OH-VD水平是测定机体维生素D状态的关键指标〔9〕，既能体现成骨细胞活性又能体现破骨细胞活性。如果25-OH-VD 的生成与活性降低，会对肠道对钙的吸收产生重要影响，打破平衡使得骨吸收增多。

综上所述,ADP 与骨质疏松的发生相关，可能成为在骨代谢过程中反映骨转换状态的新型生化指标，值得进一步研究。

4参考文献

1Berner HS,Lyngstadaas SP,Spahr A,etal.Adiponectin and its receptors are expressed in bone-forming cells〔J〕.Bone，2004;35(4):842-9.

2Magni P,Dozio E,Galliera E,etal.Molecular aspects of adipokine-bone interactions〔J〕.Curr Mol Med,2010;10(6):522-32.

3刘忠厚,杨定焯,朱汉民,等.中国人骨质疏松症的建议诊断标准(第2稿)〔J〕.中国骨质疏松杂志，2000;6(1):1-3.

4杨乃龙,阎胜利,曲宁,等.青岛地区成年女性多部位骨密度数据库的建立及骨折风险预测〔J〕.中华内分泌代谢杂志，2006;22(3):209-12.

5Mundy GR.Osteoporosis and inflammation〔J〕. Nutr Rev，2007;65(12-2):147-151.

6Luo XH,Guo LJ,Xie H,etal.Adiponectin stimulates RAN-KL and inhibits OPG expression in human osteoblasts through the MAPK signaling pathway〔J〕.J Bone Miner Res,2006;21(10):1648-56.

7Oshima K,Nampei A,Matsuda M,etal.Adiponectin increases bone mass by suppressing osteoclast and activating osteoblast〔J〕.Biochem Biophys Res Commun,2005;331(2):520-6.

8Shinoda Y,Ogata N,Kawaguchi H.Regulation of bone formation by adiponectin through autocrine/ paracrine and endocrine pathways 〔J〕.Nihon Rin Sho,2007;65(9):90-4.

9Wang X,Shen X,Li X,etal.Age-related change in the collagen net work and toughness of bone〔J〕.Bone,2002;31(1):1-7.

〔2013-12-13修回〕

(编辑袁左鸣)