NOS及NO在分泌性中耳炎引起的感音神经性聋中的作用

NOS及NO在分泌性中耳炎引起的感音神经性聋中的作用

广州医科大学附属深圳沙井医院耳鼻咽喉科深圳518104

【摘要】目的研究NO及NOS在分泌性中耳炎导致的感音神经性聋中所起的作用或影响。方法选取58例分泌性中耳炎患者，其中29例为单纯性分泌性中耳炎患者(A组)，29例为分泌性中耳炎所致的感音神经性聋患者(B组)，分别抽取A、B 2组的中耳积液，试剂盒检测NO的含量及NOS的活性，探讨NO及NOS在分泌性中耳炎导致感音神经性聋中所起的作用。结果A组中耳积液中NO含量为(138.71±40.98)μmol/L，NOS的活性为(74.28±27.00)U，B组耳积液中NO含量为(176.18±42.68)μmol/L，NOS的活性为(98.78±30.02)U，B组NO含量大于A组，差异有统计学意义(P<0.01)；NOS活性比较，B组>A组,差异有统计学意义(P<0.05)；结论NO及NOS在分泌性中耳炎引起的感音神经性聋中发挥着重要作用，可能参与感音神经性聋的炎症病理发病过程。

【关键词】NO； NOS；中耳炎；感音神经性聋

通讯作者张文渊李远航姜翠菊殷亚磊蔡永明()

【中图分类号】R764.43+1

本文就中耳炎引起的感音神经性聋患者耳积液中NOS及NO的含量或活性，探讨NOS及NO在分泌性中耳炎引起的感音神经性聋中的作用。

1资料与方法

1.1一般资料选取2014-01—2015-01来我院就诊的单纯性分泌性中耳炎患者29例为A组，分泌性中耳炎伴随感音神经性聋的患者29例为B组。A组男21例，女8例；年龄22～46岁，平均36.5岁；平均发病时间12 d；病程≤4周。B组男15例，女14例；年龄21～44岁，平均34.5岁；平均发病时间为11.4 d，病程≤4周； 2组一般资料差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2感音测试2组病患均为单耳，纯音听力测试结果为0.24～7.9 kHz；A组连续频率鼓导听阀<30 dB，鼓导平均听阀<25 dB。B组5例连续频率鼓导听阀≥30 dB，鼓导平均听阀≥25dB，2组鼓室导抗图均为B型，同侧镫骨肌反射未引出，中耳积液提取量>0.15 mL。2组均无家族性耳聋史，均无服用耳毒性药物史以及其他遗传耳病史，无可能导致咽鼓管长期阻塞(如鼻息肉、腺体肥大等)的慢性病史，来院诊断前2个月未使用激素类免疫抑制药物。

1.3治疗方法实验前均考察A、B 2组病例的病史及用药情况，并进行纯音测试，结果无特殊性后，方可抽取各组病患中耳积液，鼓膜穿刺抽取积液时，向鼓室注射泼尼松龙，并口服抗生素、糖皮质激素等进行治疗。

1.41NO含量及NOS活性的测定2组病患均以抽取中耳积液，试剂盒检测的方法测定NO含量及NOS活性。具体程序为对外耳酒精消毒后，对鼓膜用适量浓度的丁卡因进行表面麻醉，采用1 mL的医用注射器连接接7号长针头刺入鼓膜，缓慢抽取中耳积液，体积>0.15 mL，收集积液后密封保存于-20℃备用。检测方法为用试剂盒检测NOS的活性，用硝酸还原法测定NO代谢产物含量，最后计算积液中NO含量。

2结果

2.12组治疗结果比较见表1。

表1　2组治疗前后气骨导平均听阈变化比较　

注：与治疗前相比，P<0.01

2.22组耳积液NO含量及NOS活性检测结果比较通过用硝酸还原法测定NO代谢产物NO2-或NO3-的含量计算积液中NO含量，发现B组病例耳积液中NO的含量为(176.18±42.68)μmol/L，A组为(138.71±40.98)μmol/L，与A组比较，B组明显高于A组，差异有统计学意义(P<0.01)。试剂盒检测2组病例耳积液中NOS活性，结果发现B组耳积液中NOS的活性为(98.78±30.02)U，A组为(74.28±27.00)U，与A组比较，B组耳积液中NOS活性明显高于A组，差异有统计学意义(P<0.05)。

3讨论

分泌性中耳炎所致的感音神经性聋中，炎性介质在致病过程中起重要作用，但影响机制尚未确定。目前，关于分泌性中耳炎所致的感音神经性聋的发病机制有多种假设，包括病毒及细菌感染、NO机制、除NO外的细胞因子因素以及缺氧因素等。

NO由氧气、氨基酸、NADPH以及其他辅助因子在不同NO合酶催化下进行生化合成，NO合酶有几种亚型，包括eNOS、nNOS和iNOS，与eNOS、nNOS被激活的方式不同，iNOS的产生是由多种细胞因子(如TNF-α)进行诱导后由血管内皮产生，当炎症刺激时，血管内皮释放大量NO，NO本无毒性，但在与白细胞代谢产物结合时能生成NO2，N2O3等氧化物，这些氧化物有较强的细胞毒性。John等[1]发现，在黏液分泌性中耳炎患者以及化脓性中耳炎患者的中耳积液中NO及NO代谢物的含量有很大差别，黏液分泌性中耳炎患者中耳积液中NO及NO代谢物的含量要明显高于化脓性中耳炎患者，说明NO参与了分泌性中耳炎的发病机制。此外，研究显示[2]，伴有感音神经性聋的中耳炎患者与不伴有感音神经性聋的中耳炎患者相比，前者中耳积液中NO及NO合酶的含量远远高于后者，说明NO极有可能通过与其他炎性介质共同参与炎症的局部反应。Yilmazl等[3]通过测定分泌性中耳炎模型豚鼠和对照组豚鼠血红细胞内的 NO含量及NO合酶活性，结果显示在模型组中两种物质的含量均比对照组高，表明NO对细胞及组织具有较强的损伤作用。关于NO的释放机制，目前尚无明确的结论支持，但有研究发现[4]，IL-1β和TNF-α等细胞因子能刺激分泌性中耳炎患者积液表达iNOS，而大量研究[5-6]也表明许多高表达的细胞因子在分泌性中耳炎患者中耳积液中被检测到。Kim等[7]研究发现，NOS的活性能显著影响中耳积液的分泌量，以上研究表明当NOS活性增强时，能促进NO的大量释放，导致炎性反应增强，患者听力下降。Popa等[8]曾将内毒素注入小鼠耳内，并发现NO能使耳蜗损伤，还发现使用NO抑制剂能缓解耳蜗损伤程度，这一现象表明NO参与了耳蜗损害的发病机制。此外内耳自身产生的参与炎性反应的细胞因子也是内耳损伤的重要因素[9]，如TNF-α等[10]。

本文结果发现，伴有感音神经性聋的分泌性中耳炎患者中耳积液中NO含量较单纯性分泌性中耳炎高，NOS活性也较单纯性分泌性中耳炎高，表明NO含量及NOS活性能参与分泌性中耳炎及分泌性中耳炎导致的感音神经性聋的发病机制。通过抑制NOS的活性以及NO的含量，能降低炎症反应程度，减缓细胞或组织损伤，对治疗分泌性中耳炎所致的感音神经性聋提供了一个治疗方向，值得推广及重视。

参考文献4

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[8]Yamasoba T,Sugasawa M,Kikuchi S,et al.An elec-trocochleographic study of acute low-tone sensorineural hearing loss.Eur Arch Otorhinolaryngol,1993,250:418-422.

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[10]Yilmaz1 A,Uslu C,Akyuz M,et al.Nitric oxide synthase activity and nitric oxide level in erythrocytes of guinea pigs with experimental otitis media with effusion[J].Cell Biochem Funct,2006,24(5):471-473.

(收稿2014-12-01)