Ki-67在癌前病变及胃腺癌中的表达及意义

·论著·

院副主任医师，医学学士，从事临床病理学研究。

Ki-67在癌前病变及胃腺癌中的表达及意义

贾振军1，李其海2，曲勇2，周平3，韩红梅4，周祖平5

(1.山东铝业公司医院病理科，山东 淄博 255069；2.山东铝业公司医院内科，山东 淄博 255069；3.山东省淄博市第一医院病理科，山东 淄博 255200；4.山东省淄博市中心医院病理科，山东 淄博 255000；5.淄博矿业集团中心医院病理科，山东 淄博 255120)

[摘要]目的分析Ki-67在胃癌前病变及胃腺癌中的表达，探讨Ki-67与胃腺癌发生、胃腺癌分化程度和浸润深度的关系。方法采用SP免疫组织化学方法,对102例慢性胃炎、158例胃黏膜异型增生和130例胃腺癌患者进行Ki-67检测，分析其相关关系和临床病理意义。结果Ki-67在胃炎、低级别异型增生、高级别异型增生及胃腺癌中阳性表达率明显递增，且随着病变加重，强阳性表达显著增多(P<0.05)。130例胃腺癌组织高中分化腺癌Ki-67阳性表达率低于低分化腺癌(P<0.01)。未侵及全层者Ki-67阳性表达率低于侵及全层或突破浆膜者(P<0.01)。结论Ki-67在胃腺癌的发生中发挥重要作用，胃腺癌Ki-67表达与肿瘤分化程度和浸润深度有关。

[关键词]胃肿瘤；胃炎；Ki-67抗原；免疫组织化学doi:10.3969/j.issn.1007-3205.2015.08.014

[收稿日期]2015-02-06；[修回日期]2015-03-06

[基金项目]山东铝业公司2014年科技计划项目(SLYF 2014-3)

[作者简介]贾振军(1967-)，男，山东淄博人，山东铝业公司医

[中图分类号]R735.2[文献标志码]A

Expression and significance of Ki-67 in precancerous lesion and gastric adenocarcinoma

JIA Zhen-jun1，LI Qi-hai2，QU Yong2,ZHOU Ping3,HAN Hong-mei4,ZHOU Zu-ping5

(1.Department of Pathology，the Hospital of Shandong Aluminum Industry Company,Zibo 255069,China;

2.Department of Internal Medicine,the Hospital of Shandong Aluminum Industry Company,Zibo

255069,China;3.Department of Pathology,the First Hospital of Zibo City，Shandong Province,

Zibo 255200,China;4.Department of Pathology,Central Hospital of Zibo City，

Shandong Province,Zibo 255000,China; 5.Department of Pathology,

Central Hospital of Zibo Mining Group,Zibo 255120,China)

Abstract[] ObjectiveTo analyze the expression of Ki-67 in precancerous lesion and gastric adenocarcinoma and to investigate the relationship between Ki-67 expression and gastric adenocarcinoma,tumor differentiation and invasion depth.MethodsSP immunohistochemical method was applied to detect the expression of Ki-67 in chronic gastritis(102 cases),gastric dysplasia(158 cases) and gastric adenocarcinoma(130 cases) and to analyze its relationship and clinical pathological significance.ResultsImmunohistochemical results showed that the rates of positive expression of Ki-67 in chronic gastritis,gastric low grade dysplasia,high grade dysplasia and gastric adenocarcinomas showed obviously progressive increase with lesion degree(P<0.05).In 130 cases with gastric adenocarcinoma,the positive expression rate of well-differentiated adenocarcinoma of Ki-67 was lower than that of poor-differentiated adenocarcinoma(P<0.01).The positive rate of Ki-67 in not invaded full-thickness was lower than that in invaded full-thickness or breakthrough of serous membrane(P<0.01).ConclusionKi-67 plays important roles in gastric carcinogenesis.The positive expression of Ki-67 in gastric adenocarcinoma related with the tumor differentiation and invasion.

[Key words]stomach neoplasms；gastritis；Ki-67 antigen；immunohistochemistry

胃腺癌是最常见的消化道肿瘤之一，主要与遗传、自身免疫、幽门螺杆菌感染、生活环境和饮食等多种因素有关，其确切病因还不完全清楚。胃腺癌的发生是一个漫长的过程，胃黏膜细胞癌变通常认为经历浅表性胃炎→萎缩性胃炎→肠上皮化生→低级别异型增生→高级别异型增生→腺癌等衍变阶段。在肿瘤的形成过程中，异型增生是显微镜下第1个可以发现的解剖学改变[1]。低级别异型增生，多发生在黏膜表面,细胞核紧密排列在基底，染色质密集深染，核增大,分裂象较少，细胞核常位于细胞的一半或2/3以下，保持一定的极性，腺体结构稍不规则，很少出现背靠背及共壁。高级别异型增生，含有肿瘤细胞，通常是立方形，核浆比高，核仁明显双嗜性，结构紊乱更明显，大量核分裂(其中很多呈异型性)，重要的是胞核经常延伸至细胞的胞腔，核极性通常消失。低级别异型增生和高级别异型增生是主要的胃癌前病变，是正常胃黏膜癌变的必经过程，同时伴随基因的改变。对胃腺癌的有效防治一直是医学界相关领域研究的重点，对胃腺癌实施针对病因的一级预防比较困难，因此，对胃癌前病变的研究就成了胃腺癌二级预防的重要内容之一。对胃癌变过程不同阶段Ki-67基因表达及量异常的研究可能为病变的进展提供预测指标。Ki-67为目前较为肯定的核增殖标志基因，多用于判断肿瘤的良、恶性及恶性程度，也用于探讨细胞增殖活性、细胞周期与肿瘤的分化程度、浸润深度、复发及转移等，在胃腺癌的发生发展中起到了重要的作用，分化程度、浸润深度都是影响胃癌患者预后的主要因素，应用免疫细胞化学技术检测不同分化程度胃腺癌组织中Ki-67的表达情况，分析其在胃腺癌的发生和胃腺癌分化程度、浸润深度中的意义至关重要。报告如下。

1资料与方法

1.1一般资料2009年1月—2014年1月共收集慢性胃炎102例，男性57例，女性45例，年龄28～79岁，平均(47.50±3.42)岁；胃黏膜异型增生158例，男性91例，女性67例，年龄31～79岁，平均(49.52±2.85)岁；胃腺癌根治标本130例(其中山东铝业公司医院病理科收集胃腺癌组织标本60例、淄博市中心医院病理科收集胃腺癌组织标本29例、淄博市第一医院病理科收集胃腺癌组织标本20例、中国人民解放军第一四八医院病理科收集胃腺癌组织标本11例、淄矿集团中心医院病理科收集胃腺癌组织标本10例)，男性78例，女性52例，年龄35～65岁，平均(51.50±1.41)岁，腺癌肿物直径1.00～13.50 cm,平均(4.50±2.53) cm。选择胃腺癌标本均为分化型腺癌，所有患者均未经化疗。胃腺癌组织未侵及浆膜42例，侵及或突破浆膜88例；高中分化腺癌43例，低分化腺癌87例。上述标本均经原单位取材后，收集到山东铝业公司医院病理科，统一取材进行免疫组织化学染色，由课题组2名副主任医师阅片，确定诊断。3组性别、年龄比较差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2免疫组织化学方法所有标本均经10%中性甲醛固定，常规脱水、浸蜡、包埋，3 μm连续切片。常规HE染色，观察胃癌组织的的病理形态。单克隆抗体Ki-67及PV6000 检测试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司，免疫组织化学染色采用SP二步法。阳性对照为已知的阳性组织切片，以PBS代替一抗作为阴性对照。

1.3免疫组织化学结果判断方法取3个400倍高倍镜视野，计算阳性细胞所占细胞百分比的平均值，Ki-67阳性为细胞核着色，呈棕黄色，阳性细胞数<10%为阴性(-),阳性细胞占10%～25%为阳性(+),阳性细胞占>25%～75%为阳性(++),阳性细胞>75%为阳性(+++)。

1.4统计学方法应用SPSS 13.0软件包对数据进行分析。计数资料比较采用χ2检验；等级资料比较采用秩和检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1Ki-67在胃炎、低级别异型增生、高级别异型增生及胃腺癌中的表达Ki-67在胃炎、低级别异型增生、高级别异型增生及胃腺癌中阳性表达率明显递增，且随着病变加重，强阳性表达显著增多(P<0.05)，见表1。Ki-67表达分级情况见图1～4。

2.2Ki-67在不同胃腺癌分化程度和浸润深度中的表达130例胃腺癌组织高中分化腺癌Ki-67阳性表达率低于低分化腺癌，差异有统计学意义(P<0.01)。未侵及全层者Ki-67阳性表达率低于侵及全层或突破浆膜者，差异有统计学意义(P<0.01)。见表2。

表1　Ki-67在胃癌衍变过程中的表达

* P<0.05与胃炎比较　# P<0.05与低级别异型增生　△ P<0.05与高级别异型增生(χ 2检验)

3讨论

Ki-67是目前公认的重要核增殖标志基因，可以作为一种评估恶性肿瘤治疗与预后的分子靶标[2],其表达量的高低对胃腺癌的分化程度及浸润深度有着重要的临床意义,其定位于10号染色体,是从霍奇金淋巴瘤细胞系L428的粗核成分免疫鼠中制备分离出的抗体[3]，在增殖细胞的G1、S、G2和M期表达，G0期不表达。Ki-67的表达与细胞增殖状态密切相关，是反映细胞增殖的主要生物学指标，很多关于胃腺癌分化程度、淋巴结转移、浸润深度、肿瘤大小、年龄、性别等生物学行为以及判断其危害性具有重要意义的研究，结论并不完全一致。

本研究结果显示，Ki-67在胃炎、低级别异型增生、高级别异型增生和胃腺癌中的阳性表达率明显递增(P<0.05)。这与苗龙等[4]和陈昊等[5]的研究结果相符合。王彩霞等[6]研究表明胃腺癌细胞的增殖活性远远大于非肿瘤性胃黏膜。目前的研究已发现在多种实体恶性肿瘤中Ki-67的表达远高于正常组织[7]及良性病变组织，显示Ki-67有可能成为确定癌前人群高危个体的生物标志物[8]。

有研究显示Ki-67的阳性表达与组织学分化程度和淋巴结转移无关，但与临床分期和浸润深度有关[9]。也有资料显示Ki-67阳性表达与胃腺癌是否转移之间有显著相关性，Ki-67 在低分化组的阳性表达率高于中高分化组[10]。本研究结果显示，Ki-67在胃高中分化腺癌的阳性表达率低于低分化腺癌，在未侵及全层者的阳性表达率低于侵及全层或突破浆膜者，差异有统计学意义(P<0.01)。Ki-67为敏感的细胞核增殖标记物，常用于判断肿瘤的增殖活性。Ki-67表达阳性率随着肿瘤分化程度的下降而升高，随肿瘤浸润深度的增加而逐渐升高[11]。有研究指出，癌细胞分化程度越低，伴有淋巴结转移者Ki-67表达越强[12]。国外资料显示,在胃镜活组织检查标本与胃癌切除标本中进行免疫组织化学检测差异无统计学意义[13]，胃镜活组织检查标本可以进行Ki-67检测。

综上所述，Ki-67在胃腺癌的发生发展中发挥着重要作用，且在胃腺癌分化程度和浸润深度中具有重要意义。因此，检测胃镜活组织检查组织中Ki-67在胃低级别异型增生组织、高级别异型增生组织中的表达,对鉴别癌变的发展趋势具有重要意义，有利于对胃腺癌活组织检查标本患者的浸润深度进行评估，可帮助胃腺癌患者选择治疗方案，Ki-67高表达提示更易出现胃腺癌浸润深度增加，更表现为低分化，恶性程度更高，其表达水平高低对判断和估计患者的预后将具有重要的参考作用。(本文图见封三)

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(本文编辑：赵丽洁)