乳酸菌微生态制剂对白羽王鸽生产性能及免疫机能的影响

陈功义 郝振芳

(河南农业职业学院，郑州 451450)

微生态制剂(microecologics)是运用微生态原理制成的含有有益活菌制剂，能有效补充畜禽动物消化道内的益生菌，改善消化道菌群平衡［1－3］。乳酸菌是微生态制剂中应用最早、目前种类最多、应用最广泛的一种益生菌，在改善饲料利用率、改善畜禽生产性能和增强免疫机能等方面发挥着重要作用［4］。幼鸽的传统喂养是靠母鸽采食后再从嗉囊、口腔吐出后哺育幼鸽，幼鸽成活率高、生长发育快，是因为母鸽嗉囊内有大量乳酸菌，乳酸菌不仅可以维持幼鸽菌群平衡，还能促进食物的消化吸收，产生多种维生素，并促进微量元素的吸收，增强幼鸽的免疫力［5］，但传统幼鸽喂养方式并不适合大规模养殖。白羽王鸽是国内生产性能最好的肉用鸽种之一，生长速度快，一般18～21 d即可出栏。本研究通过添加不同剂量的乳酸菌微生态制剂，探讨对白羽王鸽生产性能和免疫机能的影响，为其在实际生产中提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

乳酸菌微生态制剂中乳酸菌的有效活菌数量为5×108CFU/g，由河南农业职业学院牧业工程学院实验室提供。鸽子血清免疫球蛋白G(IgG)酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒购自美国MARKET有限公司。

1.2 试验动物及饲粮

试验动物选取产鸽自然孵化1日龄白羽王鸽60只，随机分成3个组，每组20只鸽。预试期2 d，饲喂基础饲粮，饮用凉透的白开水;正试期16 d。为精确比较不同剂量试验结果，试验组每日每只口腔滴入乳酸菌微生态制剂1 mL，第1组为对照组，每日每只口腔滴入生理盐水1 mL;第2和3组分别补充剂量是2×106和5×106CFU的乳酸菌微生态制剂。鸽群采用多层笼养，免疫程序按常规进行，1～6日龄采用注射器灌喂饲粮，每日8 次(08:00、10:00、12:00、14:00、16:00、18:00、20:00、22:00进行)，7～19日龄自由采食饲粮，定时提供，每日 5 次(08:00、11:00、14:00、17:00、22:00进行)，保健砂自由采食，自由饮水，保证卫生和充足的光照。

基础饲粮参照NRC(1994)家禽营养需要配制，饲粮组成及营养水平见表1。保健砂组成:中粗砂60%、黄泥25%、熟石膏8%、木炭粉4%、明矾1%、龙胆草1%、甘草1%。

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet(air-dry basis) %

1.3 测定指标和方法

1.3.1 生产性能

分别于乳鸽11和19日龄07:00时空腹进行称末重(FBW)，计算各组平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。

1.3.2 免疫器官重量级免疫器官指数测定

分别于乳鸽11和19日龄称重后，每组随机抽取6只乳鸽，摘取脾脏、胸腺、法氏囊，剔除脂肪组织后用滤纸吸取表面水分，迅速称其鲜重。免疫器官指数计算公式为:

免疫器官指数=免疫器官鲜重(mg)/活重(g)。

1.3.3 血清IgG含量测定

分别于乳鸽11和19日龄称重后，每组随机抽取6只乳鸽剥离免疫器官后，心脏采血2 mL，37℃水浴1 h后，3 000 r/min离心15 min，分离血清，按购自美国MARKET有限公司的鸽子血清IgG ELISA试剂盒方法测定血清IgG含量。

1.3.4 肠道菌群的测定

于乳鸽11和19日龄称重后，每组随机抽取6只乳鸽剥离免疫器官、采血后，无菌采集乳鸽盲肠内容物 0.5 g，进行倍比稀释，取10－5、10－6、10－73个稀释度，每个稀释度3个重复，分别滴入伊红美蓝培养基(EMB)平板于37℃恒温培养24 h和乳杆菌培养基(MRS)平板于厌氧培养箱36℃培养72 h［6］。分别计数测定肠道内容物中大肠杆菌和乳酸菌的数量，以lg(CFU/g)表示。

1.4 数据处理

试验结果以“平均值±标准差”表示，用SPSS 13.0软件进行统计分析，采用LSD单因素方差分析(one-way ANOVA)，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果与分析

2.1 乳酸菌微生态制剂对各组乳鸽生产性能的影响

由表2可知，11日龄时，第3组乳鸽的平均日增重、末重最高，均显著高于第2组和对照组(P＜0.05)，第3组料重比显著低于第2组和对照组(P＜0.05);第2组乳鸽料重比显著低于对照组(P＜0.05)，但平均日增重、末重与对照组差异不显著(P＞0.05)。19日龄时，第3组乳鸽末重最高，高出第2组6.37%(P ＜0.05)，高出对照组15.1%(P＜0.05)，试验组第2组和第3组平均日增重和料重比均显著优于对照组(P＜0.05)，但第2组乳鸽平均日增重和料重比与第3组差异不显著(P＞0.05)。

表2 微生态制剂对乳鸽生产性能的影响Table 2 Effects of microecologics on growth performance of pigeons

2.2 乳酸菌微生态制剂对乳鸽免疫器官的影响

由表3可知，11日龄时，脾脏指数、法氏囊指数和胸腺指数各组间差异均不显著(P＞0.05)。19日龄时，脾脏指数各组间差异不显著(P＞0.05);第3组乳鸽法氏囊指数和胸腺指数最高，均显著高于第2组和对照组(P＜0.05)，第2组乳鸽法氏囊指数显著高于对照组(P＜0.05)，但胸腺指数与对照组相比无显著差异(P＞0.05)。

表3 微生态制剂对乳鸽免疫器官指数的影响Table 3 Effects of microecologics on index of immune organs of pigeons mg/g

2.3 乳酸菌微生态制剂对乳鸽血清IgG含量的影响

由表4可知，11日龄时，乳鸽血清IgG含量各组间差异不显著(P＞0.05)。19日龄时，第3组乳鸽血清IgG含量最高，显著高于第2组和对照组(P＜0.05);第2组乳鸽血清IgG含量显著高于对照组(P ＜0.05)。

表4 微生态制剂对乳鸽血清IgG含量的影响Table 4 Effects of microecologics on serum IgG concentration of pigeons ng/mL

2.4 乳酸菌微生态制剂对乳鸽肠道菌群的影响

由表5可知，11日龄时，乳鸽肠道内容物中大肠杆菌的数量各组间差异不显著(P＞0.05);第3组乳鸽肠道中乳酸菌的数量最高，显著高于第2组和对照组(P＜0.05)，但第2组与对照组对比差异不显著(P＞0.05)。19日龄时，第3组乳鸽肠道内容物中大肠杆菌的数量最低，显著低于第2组和对照组(P＜0.05)，第2组乳鸽肠道大肠杆菌的数量显著低于对照组(P＜0.05);第3组乳鸽肠道中乳酸菌的数量最高，显著高于第2组和对照组(P＜0.05)，第2组乳鸽肠道乳酸菌的数量显著高于对照组(P ＜0.05)。

表5 微生态制剂对乳鸽肠道菌群的影响Table 5 Effects of microecologics on intestinal microflora of pigeons lg(CFU/g)

3 讨论

3.1 乳酸菌微生态制剂对乳鸽生产性能的影响

国内外关于乳酸菌在动物生产中应用的报道很多，主要从动物生产性能、肠道菌群、免疫器官和指标等方面研究。大部分研究认为，乳酸菌能产生蛋白酶和淀粉酶等物质，可将分子量较大的蛋白质降解为易于吸收的小分子肽和游离氨基酸，促进肠道对饲料中营养物质的消化，提高饲料的利用率。同时产生大量的B族维生素和氨基酸等营养物质，能明显提高动物生产性能［7］。也有研究认为，饲粮中添加乳酸菌能降低动物肠道的pH，调节肠道菌群平衡，可促进营养物质的代谢和吸收，从而提高动物生产性能［8］。

Kalavathy 等［9］和徐海燕等［10］研究均表明，饲粮中添加乳酸菌可使肉鸡体重、平均日增重等显著提高。楚青惠等［11］和 Gianga 等［12］研究表明，母猪饲粮中添加乳酸菌可使仔猪断奶重、平均日增重、仔猪皮毛发育状况评分较对照组均极显著提高，其腹泻率均有降低趋势。曹玮娜等［13］研究表明，在饮水中添加乳酸菌能提高獭兔生产性能。本研究中添加不同浓度的乳酸菌微生态制剂，当添加量在5×106CFU/d时，11和19日龄乳鸽的平均日增重、末重最高，料重比最低，表明乳酸菌微生态制剂能显著提高乳鸽的生产性能。

刚出生的乳鸽肠道中是无菌的，传统的喂养方式是母鸽喂养，成活率高，生长发育良好，可能与母鸽嗉囊中存在大量乳酸菌关系密切。给乳鸽灌服一定剂量的乳酸菌，可使乳酸菌在肠道中较早植入，并有效竞争性地抑制病原菌的附着，有利于降低腹泻等疾病的发病率，促进生长发育。

3.2 乳酸菌微生态制剂对乳鸽免疫器官指数的影响

益生菌主要通过2个途径提高动物机体的免疫力，一是通过促进免疫细胞、组织和器官生长发育;二是刺激机体产生抗体，提高免疫细胞活性［14］。脾脏是禽类最大的外周免疫器官，参与全身的细胞免疫和体液免疫，法氏囊是禽类特有的体液免疫器官，胸腺是细胞免疫的中枢器官。Rivas等［15］研究表明脾脏、法氏囊和胸腺的重量和相对重量越大，说明禽类机体的细胞免疫和体液免疫机能越高。乳酸菌在肠道中繁殖后，不断合成对动物生长发育所需要的B族维生素、氨基酸等营养物质，不仅保证了动物免疫器官发育的物质所需，还可以作为抗原物质刺激免疫器官的发育。石峰等［16］研究表明，饮水中添加乳酸菌微生态制剂能显著提高肉鸡的脾脏、法氏囊和胸腺指数。李文立等［17］研究表明，添加复合乳酸菌制剂可提高蛋雏鸡的胸腺指数。本研究结果表明，日添加量为5×106CFU时，19日龄乳鸽法氏囊指数和胸腺指数有一定程度的提高，表明乳酸菌微生态制剂能提高乳鸽的免疫力，增强其抗病能力。

3.3 乳酸菌微生态制剂对乳鸽血清IgG含量的影响

免疫球蛋白是介导动物体液免疫的主要免疫分子，能够特异性地与相应的抗原结合，血清中IgG、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)的含量是反映机体免疫功能的重要指标。其中IgG主要由脾脏和淋巴结中的浆细胞合成和分泌，约占总免疫球蛋白总量的70%～80%，是鸽子抗感染免疫的主力抗体［18］。IgG是体液免疫反应的主要抗体，在结合补体、增强免疫细胞吞噬能力和中和细菌毒素方面，具有重要作用。徐海燕等［10］研究表明，复合微生物制剂可提高鸡血清 IgG含量。刘辉等［19］和Kunavue等［20］研究发现，猪采食含微生态制剂的饲粮后，血清IgG含量显著提高。本研究结果表明，乳酸菌微生态制剂能够提高白羽王鸽血清IgG含量的作用，尤其是日添加量为5×106CFU时效果最为明显。

3.4 乳酸菌微生态制剂对乳鸽肠道菌群的影响

传统的乳鸽饲养是靠母鸽哺育乳鸽，乳鸽成活率高、生长发育快，是因为母鸽嗉囊内有大量乳酸菌，能促进食物的消化吸收，增强幼鸽的免疫力［5］。乳酸菌是健康鸽肠道正常菌群的优势菌群［6］，主要存在嗉囊、盲肠和直肠。乳酸菌定植于肠道大量繁殖后，可竞争性抑制伤寒杆菌等致病菌在肠道内的繁殖，可使肠道形成一个稳定的环境，减少疾病的发生。Mogilner等［21］研究表明，微生态制剂中的活菌进入动物肠道内迅速形成优势菌群，并产生大量代谢产物如有机酸等降低了肠道pH，不利于大肠杆菌的生长。谢全喜等［22］研究发现，肉鸡采食含微生态制剂的饲粮后，盲肠乳酸菌数量显著增加。本研究结果也证实，乳酸菌微生态制剂可增加白羽王鸽肠道中乳酸菌数量，而对大肠杆菌有明显的抑制作用。表明乳酸菌微生态制剂能促进肠道益生菌的生长，竞争性抑制有害菌生长，维持正常肠道菌群，促进乳鸽生长，提高其免疫力。

4 结论

添加乳酸菌微生态制剂能提高白羽王鸽生产性能，提高乳鸽法氏囊指数和胸腺指数，提高血清中IgG含量，提高肠道内容物中乳酸菌的数量，并减低大肠杆菌的数量，增强白羽王鸽的免疫力。本试验条件下，白羽王鸽日添加量为5×106CFU时效果最为显著。

［1］ 刁其玉.微生态制剂在幼龄反刍动物营养与饲料中的应用［J］.动物营养学报，2014，26(10):3159－3167.

［2］ 马春阳，罗正，李鸿博，等.微生态制剂对蛋鸡生长性能和肠道菌群及抗体效价的影响［J］.中国畜牧杂志，2015，51(5):60 －64.

［3］ 毕英佐，谢青梅.动物肠道微生物及微生态制剂发展动态［J］.中国家禽，2015，37(4):1 －4.

［4］ WONDMENEH E，GETACHEW T，TADELLE D.Immunomodulatory effect of Effective Microorganisms(EM)in Chickens［J］.Research Journal of Immunology，2012，5(1):17 －23.

［5］ 董雅琴，牛钟相.添加乳酸菌人工饲喂幼鸽效果研究［J］.山东科学，2006，19(6):76 －78.

［6］ 易力，汪洋，范春永，等.健康鸽肠道正常菌群的调查研究［J］.黑龙江畜牧兽医，2008(7):95－96.

［7］ 赵树平，高鹏飞，包维臣，等.乳酸菌在反刍动物应用中的研究进展［J］.畜牧与兽医，2015，47(3):130－132.

［8］ 李秋艳，夏先林，黄伟.日粮中添加微生态制剂对瘦肉型繁殖母猪生产性能的影响［J］.贵州农业科学，2012，40(8):145 －147，150.

［9］ KALAVATHY R，ABDULLAH N，JALALUDIN S，et al.Effects of lactobacillus cultures and oxytetracycline on the growth performance and serum lipids of boiler chickens［J］.International Journal of Poultry Science，2008，7(4):385 －389.

［10］ 徐海燕，辛国民，王红，等.复合微生态制剂对肉鸡生长性能和免疫性能的影响［J］.畜牧与饲料科学，2013，34(4):45 －48.

［11］ 楚青惠，汪官保，曾勇庆，等.饲喂乳酸菌对母猪和哺乳仔猪生长性能、血清生化指标及粪便微生物数量的影响［J］.动物营养学报，2014，26(11):3362－3370.

［12］ GIANGA H H，VIETB T Q，OGLEC B，et al.Growth performance，digestibility，gut environment and health status in weaned piglets fed a diet supplemented with potentially probiotic complexes of lactic acid bacteria［J］.Livestock Science，2010，129(1/2/3):95 －103.

［13］ 曹玮娜，任战军，李亚力，等.乳酸菌对獭兔生长性能、肉品质及肌肉胰岛素样生长因子－1、胰岛素样生长因子1受体、生长激素受体mRNA相对表达量的影响［J］.动物营养学报，2014，26(9):2902－2910.

［14］ 周盟，张乃锋，董晓丽，等.益生菌对断奶仔猪生长性能、免疫器官指数及胃肠道pH的影响［J］.动物营养学报，2014，26(2):445 －452.

［15］ RIVAS A，FABRICANT J.Indication of immunodepression in chicken infected with various strain of Marek;s disease virus［J］.Avian Disease，1985(32):1－8.

［16］ 石峰，王涛，牛钟相.乳酸菌微生态制剂对肉鸡生产性能及免疫机能的影响［J］.山东农业大学学报:自然科学版，2011，42(1):79 －83.

［17］ 李文立，任景乐，宋晓娜，等.复合乳酸杆菌制剂对蛋雏鸡生长性能、免疫机能和盲肠微生物的影响［J］.中国家禽，2014，36(21):36 －40.

［18］ 焦红梅，崔治中.抗鸽IgG单克隆抗体的制备及鉴定［J］.中国兽药杂志，2000，34(2):9 －13.

［19］ 刘辉，季海峰，王四新，等.益生菌对生长猪生长性能、粪便微生物数量、养分表观消化率和血清免疫指标的影响［J］.动物营养学报，2015，27(3):829－837.

［20］ KUNAVUE N，LIEN T F.Effects of fulvic acid and probiotic on growth performance，nutrient digestibility，blood parameters and immunity of pigs［J］.Journal of Animal Science Advances，2012，2(8):711 －721.

［21］ MOGILNER J G，SRUGO I，LURIE M，et al.Effect of probiotics on intestinal regrowth and bacterial translocation after massive small bowel resection in a rat［J］.Journal of Pediatric Surgery，2007，42(8):1365 －1371.

［22］ 谢全喜，张建梅.微生态制剂固本康对肉鸡生产性能、盲肠菌群、免疫指标及抗氧化能力的影响［J］.中国畜牧杂志，2014，50(1):58－62.