南宁市18005例新生儿α地中海贫血筛查结果分析

罗超　李东明　玉晋武　李旺　林彩娟　俸诗瀚　陈少科　郑陈光

[摘 要] 目的：了解南宁市新生儿α地贫筛查情况。方法：使用全自动毛细管电泳仪对18005例新生儿血样进行筛查，筛查出Hb Barts>0者召回进行基因确诊。结果：检出Hb Barts>0 共1932例，检出率为10.73%；其中静止型（0.2%～0.9%）608例，标准型（1%～6%）1259例，HbH病（6%～30%）53例。共召回647例阳性患儿进行基因检测，确诊622例，确诊率96.14%。结论：通过新生儿足跟血可以准确快速地筛查出α地贫，为临床提供参考。

[关键词] 新生儿疾病筛查；α地中海贫血；全自动毛细管电泳仪

中图分类号：R729 文献标识码：A 文章编号：2095-5200（2015）02-029-02

地中海贫血（简称地贫）是广西地区常见遗传性疾病[1]。α地贫是由于α珠蛋白链缺失或合成不足导致的一种溶血性贫血，临床上按照症状轻重不同分为：静止型、标准型、HbH病和HbBarts水肿胎[2]。新生儿α地贫筛查意义在于及时发现HbH病地贫患儿，早发现早治疗，提高地贫患儿生活质量，同时也为下次妊娠提供资料。本研究对广西南宁18005例新生儿α地贫筛查结果进行分析，为临床提供参考。

1 对象和方法

1.1 对象

2013年1月1日至2014年5月31日在广西区妇幼保健院、妇产医院、儿童医院出生及就诊的新生儿疾病筛查血样[3]18005例。血样采集自出生72h后，经充分哺乳6次以上新生儿的足跟血。每个新生儿采集3个血斑，滴于S&S 903滤纸上，每个血斑直径需>8 mm，室温下自然晾干后，24h内送至广西新生儿疾病筛查实验室。

1.2 筛查方法与判断标准

筛查所用仪器为法国Sebia Capillarys 2 neonat fast全自动毛细管电泳仪，所用试剂均为该公司配套的新生儿地中海贫血检验试剂盒，仪器维护及实验操作均严格按照试剂说明书进行。

以毛细管电泳法Hb Barts的含量将α地贫分为正常（无Hb Barts带），静止型（0.2%～0.9%），标准型（1%～6%），HbH病（6%～30%），Barts水肿胎（>60%）。对于非正常的电泳结果的新生儿召回进行基因确诊。

1.3 确诊方法与判断标准

确诊采用gap-PCR基因诊断技术，基因诊断试剂盒为深圳益生堂生物公司提供，实验操作、质量控制及结果判断均严格按照试剂说明书进行。对3种常见的缺失型α地贫血基因 （ --SEA/-α3.7和-α4.2） 和HbCS（CD142TAA→CAA）、HbQS（125CTG→CCG）及HbWS（CD122CAA→CAG）进行突变检测。

1.4 统计学方法

所有数据均采用SPSS 17.0进行统计分析，计量资料采用x±s表示。

2 结果

18005例地贫筛查样本中，检出Hb Barts>0 共1932例，检出率为10.73%；其中静止型（0.2%～0.9%）608例，标准型（1%～6%）1259例，HbH病（6%～30%）53例，未发现Barts水肿胎（>60%）患儿。共召回647例阳性患儿进行基因检测，确诊622例，确诊率96.14%。其中静止型召回205例，确诊193例，确诊率94.15%；标准型召回423例，确诊412例，确诊率97.40%；HbH病召回18例，确诊17例，确诊率94.44%（见表1）。根据基因型对应毛细管电泳筛查数据，得出静止型、标准型、HbH病HbBarts平均含量分别为0.55±0.35、2.4±0.89、12.48±4.15。

3 讨论

目前对于地中海贫血确诊的主要方法是PCR基因诊断[4]，该技术由于其费用较高，操作方法繁琐等原因不适合用于常规的新生儿疾病筛查，因此，毛细管电泳技术很好弥补了这一缺陷。目前常用的新生儿地贫筛查样本是脐带血[5-6]，很少见到使用足跟血筛查的报道，因此本研究可以为毛细管电泳与基因检测的符合率方面提供参考。

18005例新生儿血样中，α地贫初筛阳性1932例，检出率为10.73%，高于北海、柳州、玉林等[7-9]地区的新生儿血样筛查结果。基因检测与毛细管电泳筛查的α地贫符合率为96.14%，高于广州、中山等[10-11]地区的新生儿脐血地贫筛查符合率，这可能与样本类型、仪器情况等有关。有研究指出新生儿α地贫符合率较成人高[12]，这是由于Hb Barts只特异的存在于新生儿时期，随着年龄的增大该峰自然消失，因此可以说Hb Barts是新生儿α地贫筛查的金标准。本研究显示南宁市α地贫患儿主要以标准型为主，未检测到重型α地贫患儿，可以反映出南宁市产前地贫筛查的成效。Hb Barts水平与α-珠蛋白基因缺失数目成正相关，Hb Barts水平越高α地贫的情况越严重。然而本研究中还是存在结果不符合的情况，因此需要根据临床表型重新计算Hb Barts水平，经计算静止型、标准型、HbH病Hb Barts水平分别为：0.2%～0.9%、1.51%～3.29%、8.33%～16.63%。这个切值与之前新生儿脐血筛查地贫的研究结果[13-14]稍微有些出入，这可能与样本类型、实验人群、筛查方法等有关[15]，因此每个实验室应当建立自己的α地贫筛查切值。

参 考 文 献

[1] 李东明，玉晋武，韦媛，等. 南宁地区14096例儿童地中海贫血筛查与基因诊断分析[J]. 中国小儿血液与肿瘤杂志. 2013，18（6）：259-263

[2] 陈方平主编. 临床检验血液学[M]. 北京：高等教育出版社， 2006：167-168.

[3] 中华人民共和国卫生部. 新生儿疾病筛查规范[S]. 北京： 中华人民共和国卫生部， 2010.

[4] 张翠梅，王莹，高建慧，等. 中山市户籍人群中α-地中海贫血的分子流行病学调查[J]. 中国儿童保健杂志， 2010，5（18）：361.

[5] Munkongdee T， Pichanun D， Butthep P， et al. Quantitative analysis of Hb Barts in cord blood by capillary electrophoresis system[J]. Ann Hematol， 2011，90（7）：741-746.

[6] Liao C， Zhou JY， Xie XM， et al. Cord blood analysis for rapid prenatal confirmation of Hb Barts disease using sebia capillary electrophoresis system[J]. Hemoglobin. 2012，36（2）：186-191.

[7] 安家嘉. 北海地区新生儿脐血血红蛋白电泳实验结果分析[J]. 西南国防医药. 2011，21（1）：46-48.

[8] 陈大宇，蔡稔，郑敏，等. 全自动毛细管电泳技术在柳州市新生儿地中海贫血筛查的应用及价值[J]. 中国优生与遗传杂志. 2014，22（1）：70-71.

[9] 邓国生. 4411例新生儿血红蛋白毛细管电泳地中海贫血筛查的探讨[J]. 中国优生与遗传杂志. 2013，21（11）：71-72.

[10] 陈星，初德强，梁开艳，等. 全自动毛细管电泳技术在筛查地中海贫血中的临床诊断价值[J]. 中国实验诊断学. 2014，18（4）：635-638.

[11] 姚英姿，方小武，万志丹，等. 广东省中山市新生儿α-地中海贫血筛查回顾性分析[J]. 中国优生与遗传杂志. 2013，21（6）：82-83.

[12] 梁华铭，黎金美. 1826例育龄妇女地中海贫血筛查结果分析[J]. 中国实用医药. 2012，5（17）：776-777.

[13] 姚英姿，方小武，庄丑菊，等. 毛细管电泳技术在新生儿α-地中海贫血筛查中的应用[J]. 中国妇幼保健. 2012，27（35）：5742-5746.

[14] 万志丹，黄湘，吴学威，等. 全自动毛细管电泳仪在新生儿α珠蛋白生成障碍性贫血筛查中的应用[J]. 国际检验医学杂志. 2012，33（11）：1308-1309.

[15] Xiong F， Sun M， Zhang X， et al. Molecular epidemiological survey of haemoglobinopathies in the Guangxi Zhuang Autonomous Region of southern China[J]. Clin Genet， 2010，78：139-148.