肺癌患者外周血DNT细胞和T淋巴细胞亚群检测的临床意义

胡小倩 王素霞 曹明善

054001 邢台市，邢台医学高等专科学校第二附属医院检验科（王素霞）

054001 邢台市，邢台市第三医院检验科（曹明善）

肺癌是当今世界上对职业人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。肺癌的发病率和病死率不断上升，但其发病机制尚不明确，因此肺癌的早期诊断尤为重要。研究［1］发现，机体抗肿瘤的主要免疫方式是细胞免疫，T淋巴细胞及其亚群是细胞免疫的主要效应细胞。双阴性T淋巴细胞（double－negative T－cell，DNT）已经被证实是一种免疫调节性T细胞，其抗肿瘤作用是目前研究的热点课题［2］。本文研究收集我院2013年7月至2014年7月共120例肺癌患者及80例健康体检者的外周血样本，采用流式细胞术分别检测其T淋巴细胞亚群及DNT的表达水平，通过分析肺癌患者与健康对照者的细胞免疫功能状况，为患者选择手术、放化疗、生物治疗等临床方案提供依据。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2013年7月至2014年7月我院收治的肺癌患者120例，均经过病理确诊，且没有进行手术及放化疗，其中，男性65例，女性55例。年龄 32～74 岁，平均年龄（48.32±9.65）岁。选取同期健康体检者80例作为对照组，其中男性44例，女性36例，年龄 25～72 岁，平均年龄（45.19±8.26）岁。两组间性别、年龄经平衡检验，差异均无统计学意义（P均＞0.05），具有可比性。

1.2 仪器与试剂 采用四色流式细胞术检测CD3＋、CD4＋、CD8＋T 淋巴细胞和DNT 细胞（CD4－CD8－），仪器购自贝克曼－库尔特公司，型号为FC500，荧光标记单克隆抗体均购自贝克曼－库尔特公司。

1.3 方法 所有研究对象均采集空腹静脉血2 ml置于含有乙二胺四乙酸抗凝剂的真空采血管中。标本在采集后6 h内处理。按照检测要求，分别向编好号的流式试管中加入20μl单克隆抗体，随后加入混匀的100μl抗凝血，混匀，避光，室温孵育15 min，分别加入溶血剂，溶解未标记细胞及红细胞。按操作程序上机检测。

1.4 统计学处理 采用SPSS16.0统计软件对数据进行处理，计量资料以±s表示，组间比较采用两样本均数t检验。以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 肺癌患者与对照组外周血T淋巴细胞亚群检测结果比较 肺癌患者外周血CD3＋T淋巴细胞、CD4＋T 淋巴细胞及 CD4＋／CD8＋T 细胞数量较对照组均明显下降，而CD8＋T淋巴细胞数量显著高于对照组，且差异均有统计学意义（P均＜0.05），见表1。

表1 肺癌组与对照组T淋巴细胞亚群检测结果比较（±s）

表1 肺癌组与对照组T淋巴细胞亚群检测结果比较（±s）

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2.2 肺癌患者与对照组外周血DNT细胞检测结果比较 120例肺癌患者DNT细胞数量显著高于对照组，且差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

3 讨论

表2 肺癌组与对照组外周血DNT细胞检测结果比较（±s）

表2 肺癌组与对照组外周血DNT细胞检测结果比较（±s）

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近年来，研究人员试图从遗传、环境、生活习惯以及基因等角度解释肺癌的发病机制，同时也在不断努力开发更准确、更快速的诊断技术以及更高效的治疗药物。肿瘤的发生发展与机体免疫状态密切相关，恶性肿瘤患者免疫功能低下，而淋巴细胞亚群的数量和比例是衡量机体免疫状态的重要指标。

细胞免疫是机体抗肿瘤免疫的主要方式。T淋巴细胞亚群是细胞免疫的主要免疫应答形式，在免疫应答过程中起抗原识别、细胞免疫和免疫调节的作用［3］。其缺陷或功能不良会引起细胞免疫功能异常，而且也会影响其调节B淋巴细胞的功能，导致抗体缺陷，患者经常表现一系列临床症状，如容易反复感染，自身免疫病或恶性肿瘤的发病率增加等。CD3＋T细胞的数量代表了机体总的细胞免疫状态，CD3＋T 淋巴细胞包括 CD4＋和CD8＋两个亚群，CD4＋T淋巴细胞为辅助性T细胞，辅助机体完成抗肿瘤免疫；CD8＋T淋巴细胞为抑制性T细胞，其功能为抑制机体的免疫应答［4］。两个亚群之间有着相互制约和相互辅助的关系，任何一方的增多和减少都会造成机体免疫功能的紊乱。若CD4＋／CD8＋比值降低，则患者的免疫功能低下，容易引起肿瘤的增殖［5］。

本文研究结果显示，肺癌患者外周血CD3＋T淋巴细胞、CD4＋T 淋巴细胞和CD4＋／CD8＋T 淋巴细胞数量较对照组明显下降，而CD8＋T淋巴细胞数量明显增多，差异均有统计学意义（P均＜0.05）。这说明肺癌患者机体抗肿瘤免疫水平低下，且机体处于免疫抑制状态。

DNT细胞是最近研究学者们非常感兴趣的免疫细胞，虽然对于其来源还没有定论，但其在维持自身免疫耐受和下调各种免疫应答中的作用已经被证实。有资料［6］表明，DNT细胞在免疫调节、器官移植、排斥反应、自身免疫性疾病及肿瘤免疫耐受过程中发挥重要作用，是当前免疫学领域研究的热点之一。有研究［7］发现DNT细胞在体外经过非己抗原刺激后可以特异性抑制同种同源CD4＋和CD8＋T淋巴细胞的增殖。因此，DNT细胞是一种抑制性的免疫调节细胞。本文研究结果显示，肺癌患者DNT细胞比例显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），这与吴晓莲［8］的研究结果相一致。说明肺癌的发生、发展过程中存在有DNT细胞的异常表达。其可能通过抑制同种同源性的CD8＋T淋巴细胞对机体抗肿瘤起抑制性免疫调节作用，但其具体机制尚不明确，有待进一步研究。

综上所述，肺癌患者存在细胞免疫功能紊乱及DNT细胞的高表达，这可能会影响治疗和预后。因此，深入研究肺癌患者免疫机制可为其治疗开拓新思路，提供新依据。

1 陈筱凡.肝癌患者DNT细胞和T细胞亚群检测的临床意义.浙江实用医学，2012，17：398－399.

2 董进浪，谭炜炜.胃癌患者DNT细胞和T细胞亚群变化及临床意义.检验与临床，2012，50：88－91.

3 时瑛，李薇.消化道恶性肿瘤患者外周血免疫细胞的检测.继续医学教育，2013，27：23－24.

4 陈派强.外周血T细胞亚群检测在恶性肿瘤中的价值.医药论坛杂志，2012，33：118－119.

5 任林广，张健，徐广伟，等.肺癌患者外周血T细胞亚群与NK、NKT细胞检测的临床意义.中国实验诊断学，2013，10：1873－1874.

6 刘坤，杨亚萍，刁青，等.慢性重型乙型肝炎患者外周血DNT细胞及 T 细胞亚群的表达及意义.河北医药，2014，36：2248－2250.

7 赵雪，吴丽娟，刘毓刚.外周血双阴性T细胞升高与临床疾病的关系.重庆医学，2012，41：3702－3706.

8 吴晓莲.肺癌患者DNT细胞、T细胞亚群检测及临床意义.放射免疫学杂志，2013，26：84－85.