泰淑红 何路 邵艳 李辉 贾莉婷
300000 天津市,天津医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系(何路)
目前女性生殖道感染发病率越来越高,耐药的菌群也越来越多,为了能更好地明确女性生殖道感染常见病原菌及其耐药情况,便于指导治疗。本文对我院2011年1月-2014年6月妇科门诊及住院患者送检的宫颈分泌物标本中分离出的396株病原菌及其药敏结果进行分析,现将结果报告如下。
1.1 临床资料 收集2011年1月-2014年6月我院妇科门诊及住院需进行宫颈检查的患者396例,年龄 18~50 岁,平均年龄(33.52±7.65)岁。采集患者的宫颈分泌物进行细菌培养和药敏试验。剔除同一患者相同部位的重复标本。
1.2 仪器与试剂 所有菌株采用DL-96细菌鉴定分析系统(珠海迪尔生物工程有限公司)进行鉴定及药敏试验。血琼脂平板、真菌显色平板购于郑州安图生物有限公司。
1.3 方法
1.3.1 分离培养与药敏试验 将标本分别转种于血琼脂平板,真菌显色平板,放入隔水式二氧化碳恒温培养箱培养24-48 h后分离纯菌,经革兰染色镜检后,选择相应的DL-96试剂板。取纯培养单个菌落于稀释液瓶内研磨成菌悬液,均匀滴于试剂板小孔内,然后将试剂板放入35~37℃的温箱孵育18-24 h,最后将试剂板放入DL-96细菌鉴定分析系统,判读菌种种属及抗菌药物最低抑菌浓度结果。药敏试验结果判断标准按照2013年版CLSI标准判读。
1.3.2 质控菌株 质控菌株大肠埃希菌 ATCC 25922、金黄色葡萄球菌ATCC 25923、铜绿假单胞菌ATCC27853均购自卫生部临检中心。
1.3.3 超广谱 β 内酰胺酶(extended-spectrum betalactamases,ESBLs)检测 通过头孢他啶、头孢噻肟和头孢他啶/克拉维酸、头孢噻肟/克拉维酸复合纸片对待检菌的抑制作用进行测定,当任何一种复合纸片抑菌圈直径大于或等于其单独药敏纸片抑菌圈直径5 mm时,可确证该菌株为产ESBLs菌。
1.4 统计学处理 采用WHONET 5.5统计软件对菌株的药敏试验结果进行统计学分析。
表1 396株细菌中革兰阳性球菌的菌种分布与检出率
表2 396株细菌中革兰阴性杆菌的菌种分布与检出率
表3 396株细菌中真菌的菌种分布与检出率
2.1 女性生殖道分离细菌的菌种分布情况 396株病原菌中,革兰阳性球菌137株(34.60%),其中粪肠球菌检出率最高,为 9.34%(37株),其次为屎肠球菌(33 株,8.33%);革兰阴性杆菌 102 株(25.76%),其中大肠埃希菌的检出率最高,为12.63%(50株),其次为肺炎克雷伯菌(13株,3.28%);真菌 157 株(39.65%),其中白假丝酵母菌的检出率最高,为27.27%(108株),其次为光滑假丝酵母菌(36 株,9.09%),见表1~3。
2.2 396株病原菌中粪肠球菌、大肠埃希菌和白假丝酵母菌的药敏试验结果分析 对革兰阳性球菌、革兰阴性杆菌和真菌中检出率最高的粪肠球菌、大肠埃希菌和白假丝酵母菌进行药敏试验。其中37株粪肠球菌对红霉素的耐药率最高,达91.89%,其次为四环素(78.38%),而对替考拉宁的耐药率为0.00%;50株大肠埃希菌对氨苄西林的耐药率最高,达80.00%,其次为四环素和复方新诺明,耐药率均为74.00%,而对亚胺培南和美罗培南的耐药率均为0.00%,50株大肠埃希菌中产ESBLs菌株为28株;108株白假丝酵母菌对伊曲康唑的耐药率最高,为59.26%,对两性霉素 B 的耐药率最低,为 1.85%,见表4~6。
表4 37株粪肠球菌对常见抗菌药物的耐药情况
表5 50株大肠埃希菌对常见抗菌药物的耐药情况
表6 108株白假丝酵母菌对常用抗菌药物的耐药情况
女性下生殖道感染菌的主要来源是阴道微生态群落中的条件致病菌,如大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、β溶血性链球菌、假丝酵母菌、滴虫以及支原体等。目前对滴虫、支原体、衣原体、加德纳菌感染的治疗效果较好,然而其他细菌、真菌引起的生殖道感染,由于其耐药性普遍存在,需要临床根据药敏结果来选用适宜的药物进行治疗。对于B族溶血性链球菌引起的生殖道感染已经得到普遍重视,认为该种细菌感染可导致严重母儿并发症[1-3],对于其他细菌引起的生殖道感染认为有自觉症状且细菌培养阳性者,需进行规范抗生素治疗。国外有文献[4,5]报道细菌性阴道疾病会导致不良围产结局,包括自然流产、早产、胎膜早破、宫内感染以及围产儿并发症等。因此,了解女性生殖道感染致病菌的情况,并及时有效地进行治疗是降低女性围产期不良妊娠结局可能性的重要措施之一。
本文研究对我院妇科生殖道感染患者分离出的396株病原菌进行检测,结果显示,革兰阳性球菌、革兰阴性杆菌和真菌均有检出,其中粪肠球菌、大肠埃希菌和白假丝酵母菌的检出率最高,分别为9.34%(37/396),12.63%(50/396)和27.27%(108/396)。由此可见,粪肠球菌、大肠埃希菌和白假丝酵母菌是临床女性生殖道细菌感染最常见的致病菌。药敏试验结果显示,粪肠球菌对红霉素和四环素的耐药率较高,对氨苄西林耐药率仅为8.11%,然而对高浓度庆大霉素耐药率高达59.46%,对于重症肠球菌感染患者联合用药出现协同效应的概率只有40.54%,故检测肠球菌高浓度氨基糖苷类药敏试验,对临床用药具有重要的指导意义。本文研究发现1例耐万古霉素的粪肠球菌,未发现耐替考拉宁的粪肠球菌;大肠埃希菌对氨苄西林、氨苄西林/他唑巴坦、阿莫西林/克拉维酸、头孢呋辛、头孢噻肟、头孢他啶、头孢曲松、头孢吡肟、左氧氟沙星、环丙沙星、庆大霉素、氨曲南、四环素和复方新诺明的耐药率均高于40.00%,因此均不能作为临床经验性治疗的首选药物,对头孢西丁、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、亚胺培南、美罗培南和头孢哌酮/舒巴坦的敏感率较高,其中对亚胺培南和美罗培南的敏感率达100.0%;白假丝酵母菌对伊曲康唑的耐药率最高,为 59.26%,其次为氟康唑(10.19%),而真菌中检出率位列第二的光滑假丝酵母菌对氟康唑的耐药率为63.89%,可见不同真菌对不同的抗真菌药物的耐药性有一定的差异,因此临床上应高度重视生殖道真菌感染的病原菌培养和药敏试验结果,合理用药,才能够有效地控制耐药现象快速发展的趋势。
不同病原菌对各种抗菌药物的耐药率差别很大,因此及时了解女性生殖道感染细菌的分布和耐药情况,对临床合理使用抗菌药物,做好抗菌药物的宏观管理,避免对其滥用,减少耐药现象的发生有极其重要的意义。
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