苗药组方二岩虎果汤的止咳平喘作用

饶 海 桂珊珊 周 镁 黄秀平 覃容贵 (贵阳市云岩区人民医院，贵州 贵阳 550003)

二岩虎果汤是贵阳医学院附属医院名老中医饶天培经验方，其复方组成均为苗药，药味较为简单，由岩豇豆、岩白菜、虎杖、岩果四味组成，具有清热、止咳、化痰平喘功效。主治风热犯肺、痰热内蕴所致咳嗽 、哮喘。本方性凉，为支气管炎、肺炎、哮喘常用方。方中以岩豇豆，味辛微甘，性平，入肺、脾二经，辛凉解表，宣肺止咳，为君药;岩白菜清血热，补虚止咳为臣药;虎杖清热解毒，化痰止咳为佐药;岩果养阴清肺、化痰止咳，为使药。诸药合用共奏清热除邪、宣肺止咳、降气化痰、润肺泻火之效。该方临床用于治疗急性支气管炎、大叶性肺炎、小儿哮喘等，无不应手取效，且临床应用多年未见不良反应。本研究拟验证二岩虎果汤的止咳、祛痰、平喘、抗炎等药理作用，为二岩虎果汤的推广应用奠定实验基础。

1 材料与方法

1.1药物 岩豇豆、岩白菜、虎杖、果上叶均购于贵阳市万东桥药材市场，由云岩区人民医院副主任医师饶海鉴定为正品。盐酸氨溴索分散片(30 mg/片，珠海经济特区生物化学制药厂，批号:20111001);阿司匹林肠溶片(25 mg/片，江苏平光制药有限责任公司，批号:120302);复方岩白菜素片(125 mg/片，云南白药集团大理药业有限责任公司，批号:20120201)。

1.2试剂 苯酚红(天津市大茂化学试剂厂，批号:20120623);浓氨水(重庆川江化学试剂厂，批号:20100928);二甲苯(中国上海试剂厂，批号:80-07-01);NaHCO3(西陇化工股份有限公司，批号:111022-1);羧甲基纤维素钠(中国医药公司北京采购供应站，批号:881018)。

1.3仪器 721紫外分光光度计(型号:UV-3100，上海美普达仪器有限公司);旋转蒸发仪(型号:R308，上海申生科技有限公司);数字控温电热套(型号:98-1-C，天津市泰斯特仪器有限公司);电子分析天平(型号:AL204，梅特勒-托利多仪器有限公司);超声雾化器(型号:402AI，江苏鱼跃医疗设备);打孔器(直径:5 mm)。

1.4实验动物 昆明种小鼠体质量18～22 g，豚鼠体质量180～220 g，均雌雄兼用(贵阳医学院实验动物中心提供)。

1.5方法

1.5.1供试药物剂量设计及制备 ①剂量设计:二岩虎果汤原方组方为:岩豇豆、岩白菜、虎杖、果上叶各30 g，单味药人用剂量为0.5 g/kg，换算小鼠用量为5 g/kg，以此为低剂量组，中、高剂量组分别设计为10 g/kg和20 g/kg。换算豚鼠用量为2.5 g/kg，以此为低剂量组，中、高剂量组分别设计为5 g/kg和10 g/kg。②药物制备:按组方配比以10倍量水煎煮两次，每次2 h，过滤，滤液浓缩，用蒸馏水稀释至所需浓度。

1.5.2对浓氨水喷雾致小鼠咳嗽的影响〔1～3〕取小鼠50只，雌雄各半，随机分成5组，分别为正常对照组、二岩虎果汤低、中、高剂量组(5、10、20 g/kg)、阳性对照复方岩白菜组(56 mg/kg)，每组10只。灌胃给予相应药物，正常对照组给予等体积的蒸馏水，各组按20 ml/kg体重灌胃给药，每日一次，连续7 d。于末次给药60 min后将小鼠逐只置于喷雾室中，以浓氨水定量恒压喷雾10 s后立即取出，记录小鼠开始出现咳喘的时间，即咳喘潜伏期，继续观察并记录3 min内的咳喘次数。以腹肌收缩，同时张开大口为指标计咳嗽一次。

1.5.3对小鼠气管酚红排泌量的影响〔1，2，4，5〕取小鼠50只，雌雄各半，随机分成五组，分组及给药同1.5.2，阳性对照组给予盐酸氨溴索(100 mg/kg)。于末次给药30 min后按0.1 ml/10 g，腹腔注射5%酚红-生理盐水溶液，30 min后处死小鼠，分离气管，取喉结至气管分叉处一段气管约1 cm置于2.0 ml 5%NaOHCO3溶液中，超声波清洗30 min，使器管段中的酚红完全释放，再以2 000 r/min离心5 min，用紫外可见分光光度计于558 nm处测吸光度，根据标准曲线方程计算酚红排泌量。

1.5.4对磷酸组胺和氯化乙酰胆碱混合液致豚鼠咳喘潜伏期的影响〔6，7〕动物筛选:将豚鼠60只，雌雄兼用，依次置于密闭容器内，待安静后，启动超声雾化器，恒压将0.1%磷酸组胺-2%氯化乙酰胆碱混合液(1∶1)喷入容器中，喷雾时间为15 s，继续密闭容器观察。观察豚鼠的引喘潜伏期(从喷雾到哮喘发作，呼吸极度困难，直至抽搐跌倒的时间)，选用引喘潜伏期小于150 s的豚鼠备用。取经过筛选的50只豚鼠，雌雄各半，随机分为五组，每组10只，分别为正常对照组、二岩虎果汤低、中、高剂量组(2.5、5、10 g/kg)、阳性对照氨茶碱组(0.1 g/kg)。灌胃给予相应药物，正常对照组给予等体积的蒸馏水，各组按10 ml/kg体重灌胃给药，每日1次，连续7 d。末次给药30 min，将豚鼠逐只置于密闭容器内，按预选条件喷雾致喘，观察和记录豚鼠引喘潜伏期。

1.5.5对二甲苯致小鼠耳肿胀率的影响〔1～3，8〕取小鼠50只，雌雄各半，随机分成5组，分组及给药同1.5.2，阳性对照组给予阿司匹林(0.2 g/kg)。于末次给药40 min后在小鼠右耳两面涂二甲苯0.04 ml致肿，左耳不涂为正常对照耳，1 h后脱颈椎处死，用直径5 mm打孔器打下左耳和右耳同一部位的耳片，电子分析天平上称重，计算耳肿胀率。

1.6统计学方法 采用SPSS17.0统计软件包行t检验。

2结果

2.1对浓氨水喷雾致小鼠咳嗽的影响 二岩虎果汤中、高剂量能延长小鼠咳嗽潜伏期，各剂量均能降低小鼠3 min内咳嗽次数(P＜0.05)。见表1。

表1 二岩虎果汤对浓氨水喷雾致小鼠咳嗽的影响(x ± s，n=10)

2.2祛痰实验结果 正常对照组小鼠气管酚红排泌量为(0.82±0.32)μg/ml，二岩虎果汤中、高剂量能增加小鼠气管酚红排泌量与正常对照组差异显著〔(1.75±0.29)、(2.24±0.46)μg/ml，P＜0.05〕，二岩虎果汤低剂量组与正常对照组无显著差异〔(1.08±0.23)μg/ml，P ＞0.05〕。

2.3对磷酸组胺和氯化乙酰胆碱混合液致豚鼠咳喘潜伏期的影响 氨茶碱及二岩虎果汤低、中、高剂量均能延长豚鼠咳喘潜伏期，与正常对照组差异显著〔(325.7±9.1)、(249.2±13.6)、(259.4 ±12.4)、(232.4 ±10.2)vs(94.8 ±6.4)s，P ＜0.05〕。

2.4对二甲苯致小鼠耳肿胀率的影响 阿司匹林二岩虎果汤低、中、高剂量均能降低小鼠耳肿胀率，与正常对照组〔(33.8±10.0)%、(85.7±8.6)%、(70.4±9.4)%、(37.5±9.2)%vs(135.2±18.5)%，P ＜0.05〕。

3讨论

本实验结果可知，二岩虎果汤有显著的止咳、祛痰、平喘、抗炎作用。组方中岩豇豆主要成分石吊兰素具有抗炎、抗结核的作用〔9〕;岩白菜主要成分岩白菜素具有止咳、免疫增强、抗氧化作用〔10〕;虎杖含有白藜芦醇、白藜芦醇苷等物质，具有抗菌、镇咳平喘作用〔11〕;果上叶含有三萜类化合物，具有镇痛、抗氧化、抑制NO生成、止咳作用〔12〕。二岩虎果汤组方的药效涵盖了四味药物的药理作用，该方临床用于治疗急性支气管炎、大叶性肺炎、小儿哮喘等，具有良好的疗效，实验结果与临床疗效一致。组方的药理活性与其化学成分密切相关，研究结果为复方的物质基础研究提供了依据，也为其开发、利用提供了理论基础。

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