班立桐,杨红澎,黄亮,王玉,童应凯
(天津农学院,天津300384)
新疆和天津产香菇中氨基酸和多糖的对比分析
班立桐,杨红澎*,黄亮,王玉,童应凯
(天津农学院,天津300384)
分析比较新疆和天津产香菇的氨基酸和多糖含量。结果表明:新疆产香菇子实体中氨基酸和多糖含量高于天津产香菇,两种蘑菇子实体中氨基酸总含量分别为22.28%和17.4%。它们所含氨基酸含量的高低有所差别。两种蘑菇子实体中多糖含量分别为9.61%和7.51%。新疆与天津产香菇相比较,天门冬氨酸(2.14%)、亮氨酸(1.44%)、赖氨酸(1.30%)、精氨酸(1.17%)含量明显高于天津产香菇,天津产香菇中谷氨酸含量高于新疆产香菇,分别为5.52%和4.85%。
香菇;氨基酸;多糖;对比分析
香菇[Lentinus edodes(Berk)Sing],又名香蕈、香椹、香信、合蕈、陈仁玉、台蕈,是著名的食用兼药用真菌,早在一千多年前就开始采集利用。《本草纲目》中有:香菇“甘、平、无毒”;《医林纂要》记载:香菇“甘、寒”,“可托痘毒”;《日月本草》认为香菇“益气、不饥、治风破血”;《本经逢原》认为香菇为补偿VD的要剂,预防佝偻病,并治贫血。香菇含有多种有效药用成分,所含麦角甾醇(VD原,其含量比一般食物高)被人体吸收后,在光照下能转变为VD,可增强人体的抵抗力,并能促进儿童骨骼和牙齿的生长,预防佝偻病[1]。香菇所含的香菇素(Lentinacin,C9H11O4N5),具有降低血中胆固醇的作用,可预防因动脉硬化引起的冠心病、高血压等中老年人常见病;香菇多糖(Lentinan)能刺激机体的免疫系统,使免疫功能得到恢复和提高,从而起到防癌、抗癌作用。香菇还含有一种诱导机体产生干扰素的双链核糖核酸,可预防由病毒引起的多种疾病[1-2]。
本试验对新疆和天津产香菇的氨基酸和多糖含量进行了分析测定,为香菇不同产地,尤其可对气候差别非常大地区的种植及评价提供一定理论参考。
1.1材料
新疆和天津产的香菇分别来自于天津市金三农农业科技开发有限公司凯润食用菌园区和新疆和田地区策勒县食用菌园区(两产地香菇栽培菌棒配方均为:木屑64%、棉籽壳20%、麸皮13%、石膏1%、磷肥1%、含水量60%、pH自然)。
1.2主要仪器
AEZ00电子天平:瑞士METTLER公司;L-8800型全自动氨基酸分析仪:日立公司;真空干燥箱:上海博迅;TU-1901紫外分光光度计:北京普析;超声波细胞粉碎机:宁波新芝生物科技。
1.3方法
1.3.1样品处理
样品去除子实体的带泥部45℃烘干至重量没有变化后,用植物粉碎机粉碎,过60目筛备用。
1.3.2多糖测定方法及条件
本研究采用苯酚-硫酸法检测样品子实体多糖。标准曲线的制作:
1)在电子天平上准确称取葡萄糖0.1 g,用100 mL的容量瓶定容配成1.0 mg/mL的葡萄糖溶液,并分别稀释成0、0.02、0.04、0.06、0.08、0.1 mg/mL浓度梯度的葡萄糖作为基准物。
2)每种浓度的葡萄糖溶液取2 mL分别加入1 mL 5%苯酚和5 mL硫酸混匀,然后于25℃水中加热20 min,流水冷却后于紫外分光光度计489 nm处测光密度值。
3)以葡萄糖浓度为横坐标,光密度值为纵坐标作标准曲线。
样品的提取:
采用超声波辅助热水提取技术提取样品子实体中的多糖。准确称取样品子实体粉末(60目)1 g放入50 mL的离心管中,按一定料液比向离心管中加入蒸馏水,在恒温水浴锅中加热5 min,然后放入超声波细胞粉碎机中超声提取。为了在超声波处理过程中维持料液的温度,所以每隔5 min对料液进行一次加热。本试验采用提取时间35 min、功率150 W、温度70℃、料液比1∶20(mg/mL)、二级提取,合并两次上清液,用于多糖测定。
1.3.3氨基酸测试方法及条件
样品用6 mol/L HCl于110℃水解24 h,提取蛋白水解氨基酸;用水溶液提取游离氨基酸。合并提取液,在氨基酸分析仪上测定氨基酸含量。
显色剂:茚三酮。泵1压力:6.90 kPa~7.90 kPa,流速:4.0 mL/min。泵2压力:0.89 kPa~1.00 kPa,流速:3.5 mL/min。分离柱柱温:57℃。反应柱柱温:134℃。
2.1葡萄糖标准曲线测定结果
将所测数据以吸光度对葡萄糖浓度求算线性回归方程,得标准曲线回归方程为y=13.095x(R2= 0.998 6)。试验表明,葡萄糖在0 mg/mL~0.1 mg/mL范围内呈现良好的线性关系。结果见图1。
图1 葡萄糖标准曲线Fig.1Result of standard curve
2.2子实体中多糖含量测定结果
经检测,在新疆与天津产香菇蘑菇子实体中多糖含量分别为9.61%和7.51%,见表1。
表1 新疆与天津产香菇子实体多糖含量测定结果Table 1Polysaccharides content of Lentinus edodes from Xinjiang and Tianjin
2.3子实体中氨基酸测定结果
经检测,在新疆与天津产香菇蘑菇子实体中分别含有17种氨基酸,总含量分别为22.28%和17.4%。新疆产香菇含量高于1%的氨基酸为谷氨酸、天门冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、丙氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、精氨酸。天津产香菇含量高于1%的氨基酸为谷氨酸、天门冬氨酸和丙氨酸。子实体氨基酸色谱图见图2、图3,结果见表2、表3。
表2 新疆产香菇子实体氨基酸含量Table 2The content of amino acids in Lentinus edodes from Xinjiang
续表2新疆产香菇子实体氨基酸含量Continue table 2The content of amino acids in Lentinus edodes from Xinjiang
图2 新疆产香菇子实体氨基酸色谱图Fig.2The chromatogram of amino acids in Lentinus edodes from Xinjiang
表3 2013年天津产香菇子实体氨基酸含量Table 3The content of amino acids in Lentinus edodes from Tianjin
图3 天津产香菇子实体氨基酸色谱图Fig.3The chromatogram of amino acids in Lentinus edodes from Tianjin
上述结果表明,新疆产香菇子实体中氨基酸含量高于天津产香菇,但它们所含十七种氨基酸含量的高低有所差别。新疆产香菇与天津产香菇相比较,天门冬氨酸(2.14%)、亮氨酸(1.44%)、赖氨酸(1.30%)、精氨酸(1.17%)含量明显高于天津产香菇,但天津产香菇中谷氨酸含量高于新疆产香菇,分别为5.52%和4.85%。
本研究所测结果表明,由于栽培环境的不同导致同一品种蘑菇的氨基酸含量和多糖含量发生明显变化。国内外已经有很多对不同光照下和跨海拔条件下次生代谢产物变化的研究。有研究报道,不同光照强度下,半夏化学成分含量有显著的差异,全光照处理有利于半夏生物碱、鸟苷和蛋白质的积累[3]。在1 000 m以上西洋参总皂甙含量显著回升,西洋参总糖、还原糖均随海拔的增加而增加[4]。在大叶碎米荠研究中,有研究者发现大叶碎米荠光合速率随着海拔升高而呈下降趋势,随着海拔升高,可溶性糖含量升高[5]。古世禄等[6]在研究海拔对谷子粗蛋白含量与氨基酸的影响中,得出较高海拔谷子粗蛋白和氨基酸含量较高,品质较优的结论。韩发等[7]在测定不同海拔矮嵩草粗蛋白含量中发现,青藏高原4个不同海拔地区的矮嵩草,其粗蛋白的含量在高海拔含量最高。
本研究中新疆产香菇是在新疆和田地区策勒县栽培所得,策勒县属极端干旱型大陆荒漠气候,气候干燥、昼夜温差大、日照长、降水量少、蒸发量大,年均气温11.9℃,年均降水33 mm,有得天独厚的水土光热资源,年平均风速1.9 m/s,平均海拔1 365 m。我们的研究结果说明次生代谢产物和粗蛋白的含量与生态条件有很大关系。不同海拔高度造成生境条件差异,在海拔高的地区,气候凉爽,阳光充足,昼夜温差大,适宜的温度能促进氨基酸及多糖等物质的合成[5]。当然还有很多因素(如营养的供给)与次生代谢产物生成有密切关系。这些因素也需进一步的研究。
[1]徐锦堂.中国药用真菌学[M].北京:北京医科大学-中国协和医科大学联合出版社,1997:625-644
[2]董晓宇,宁安红,曹婧,等.香菇及其药理作用研究进展[J].大连大学学报,2005,26(2):263-268
[3]张跃进,孟祥海,杨东风,等.不同光照强度下半夏化学成分含量的比较研究[J].武汉植物学研究,2009,27(5):533-536
[4]朱仁斌,宛志沪,丁亚平.皖西山区西洋参有效成分含量与栽培地海拔高度的关系[J].中草药,2002,33(2):163-166
[5]张宇.不同海拔高度对大叶碎米荠营养成分和生理特性影响的研究[D].四川:四川农业大学,2006
[6]古世禄,古晓红,耿聚平.不同土壤与海拔高度对谷子(粟)蛋白质氨基酸组成的影响[J].生态农业研究,2000,8(3):32-35
[7]韩发,贲桂英,师生波.青藏高原不同海拔矮嵩草蛋白质、脂肪和淀粉含量的变异[J].植物生态学报,1997,21(2):97-104
Comparison and Analysis of Amino Acid and Polysaccharides in Lentinus edodes from Xinjiang and Tianjin
BAN Li-tong,YANG Hong-peng*,HUANG Liang,WANG Yu,TONG Ying-kai
(Tianjin Agricultural University,Tianjin 300384,China)
The content of amino acid and polysaccharides in Lentinus edodes from Xinjiang and Tianjin was investigated and compared.The result indicated amino acid and polysaccharides in Lentinus edodes from Xinjiang was higher than that from Tianjin。The total content of amino acids in the two places were 22.28%and 17.4%.The total content of polysaccharides in the two places of mushroom fruiting bodies were 9.61%and 7.51%.The level kinds of amino acid in the two kinds of mushroom fruiting bodies were different.Compared with the content of amino acid in Lentinus edodes from Tianjin,the higher levels of amino acids in Lentinus edodes from Xinjiang was aspartic acid(2.14%),leucine(1.44%),lysine(1.30%)and argnine(1.17%).But glutamic acid(5.52%)in Lentinus edodes from Tianjin was higher than that(4.85%)from Xinjiang.
Lentinus edodes;amino acid;polysaccharides;comparison and analysis
10.3969/j.issn.1005-6521.2015.14.003
2014-02-27
天津市农业科技成果转化与推广项目(201101200);天津市科技支撑计划项目(13ZCZDNC 09700);新疆自治区科技厅科技支疆项目:食用菌优良品种在新疆干旱地区示范推广(201291131)
班立桐(1972—),男(汉),教授,本科,主要从事食用菌栽培研究。
杨红澎(1976—),男(汉),副教授,博士,主要从事植物及食用菌次生代谢产物的分离鉴定研究。