乳腺癌ASAH1、CDC6蛋白表达及其临床意义

齐 攀　靳 艳　曹兴玥　张 冰　谢振斌

（1 新乡市中心医院，河南 新乡 453002；2 新乡医学院组胚教研室，河南 新乡 453002）

乳腺癌ASAH1、CDC6蛋白表达及其临床意义

齐 攀1靳 艳2曹兴玥2张 冰1谢振斌1

（1 新乡市中心医院，河南 新乡 453002；2 新乡医学院组胚教研室，河南 新乡 453002）

目的 探讨乳腺癌组织中ASAH1、CDC6蛋白表达和意义。方法 免疫组化方法检测73例乳腺癌石蜡标本中ASAH1及CDC6蛋白的表达，分析其与临床病理特征的关系。结果 ①ASAH1阳性表达率：乳腺癌中72.6%，正常乳腺组织中44%，表达具有差异性（P＜0.05）；CDC6阳性表达率：乳腺癌中65.8%，正常乳腺组织中40%，表达具有差异性（P＜0.05）。②ASAH1蛋白表达与HER-2蛋白表达呈正相关，与ER表达呈负相关；CDC6蛋白表达与HER-2蛋白表达呈正相关。③ASAH1与CDC6蛋白表达具有正相关性。④ASAH1及CDC6蛋白表达增强预示5年生存率低。结论 ASAH1、CDC6蛋白表达与乳腺癌关系密切，联合检测其表达对进一步了解乳腺癌的生物学行为及判断预后有一定价值。

乳腺癌；ASAH1；CDC6

乳腺癌严重威胁女性健康，且发病年龄有年轻化趋势。早期预防，早期诊断，早期治疗是防治乳腺癌的主要手段。本研究通过探讨ASAH1及CDC6蛋白在乳腺癌组织中的表达，研究他们在乳腺癌诊治中的价值及作为一种新型肿瘤标志物或治疗靶点的可能性。

1　材料与方法

1.1实验材料：收集乳腺癌标本73例，均为蜡块，其中71例为浸润性癌，2例为导管内癌；25例对照组为正常乳腺组织。

1.2试验步骤和结果判定方法及统计方法：应用免疫组化方法检测标本中ASAH1及CDC6蛋白的表达，染色过程中设阳性和阴性对照。CDC6以胞核和胞质出现清晰的棕黄色颗粒为阳性，ASAH1以胞质中出现澄清的棕黄色颗粒为阳性，采用半定量积分法判断结果。统计软件SPSS 13.0，应用卡方检验比较组间差异。

2　结 果

2.1ASAH1及CDC6在乳腺正常组织及乳腺恶性肿瘤中的表达情况，见表1。

2.2ASAH1及CDC6表达与乳腺癌临床病理指标的关系，见表2。

表2　ASAH1及CDC6表达与乳腺癌临床病理指标的关系

表1显示，73例乳腺癌ASAH1蛋白阳性率为72.6%，CDC6蛋白阳性率为65.8%，二者在乳腺组织及正常组织中表达差异具有统计学意义。表2显示，ER、HER-2不同状态间，ASAH1表达差异具有统计学意义（P＜0.05），ER表达增强，ASAH1表达减弱，HER-2表达增强，ASAH1表达增强；HER-2不同状态间，CDC6的表达差异具有统计学意义（P＜0.05），HER-2表达增强，CDC6表达增强。ASAH1及CDC6蛋白二者间表达成正相关关系（P＜0.05）。

3　讨 论

3.1ASAH1与乳腺癌临床病理指标的关系：ASAH1（N-酰基鞘氨醇酰胺水解酶1）是一个成熟的异二聚体酶。本次试验发现，乳腺癌组织及正常乳腺组织中ASAH1表达具有显著性差异（P＜0.05），提示ASAH1蛋白在乳腺癌表达上调，可能参与乳腺癌的发生。ASAH1是细胞内水解神经酰胺的关键酶，ASAH1表达增加，神经酰胺分解增加，凋亡信号受到抑制，反过来促进增值。ASAH1在小鼠L929细胞中的过度表达就抑制了肿瘤坏死因子所诱导的细胞凋亡［1］，ASAH1抑制剂能诱导前列腺癌细胞的凋亡［2］。

我们可以观察到分化中的细胞内神经酰胺含量升高，加入外源性神经酰胺促使细胞分化［3］。目前，神经酰胺促进细胞分化的机制尚不明确，ASAH1分解神经酰胺的过程中受哪些因素影响也不清楚。ASAH1蛋白表达与HER-2表达成正相关，其表达增高提示预后不良，但也可能受到与肿瘤大小及组织学分级正相关的影响；实验还显示ASAH1蛋白表达与ER水平成负相关，ER蛋白表达提示乳腺癌细胞尚在雌激素作用范围内，雌激素拮抗剂可控制癌细胞增殖，提示癌细胞恶性程度低，而ASAH1表达增高可能为不良预后因素。

3.2CDC6与乳腺癌临床病理指标的关系：CDC6（细胞周期分裂蛋白6）在真核细胞中是一种重要的DNA复制调节器。它完成细胞从G1期到分裂期DNA复制起始物的组装［4］。研究发现CDC6表现出原癌基因的特征，参与肿瘤的形成机制CDC6的异常可造成染色体组的不完整。CDC6缺乏，DNA复制停止，细胞凋亡或进入DNA复制的假分裂状态［5］。本次实验证实CDC6与HER-2表达成正相关，预示不良预后，其可以成为监测癌症病情、评价疗效的重要分子生物学指标。

3.3ASAH1与CDC6的关系：本实验得出，ASAH1表达越高，CDC6蛋白表达越高，当然二者的作用机制可能各自独立，也可能相互影响、相互协同，但因为影响肿瘤发生发展的因素常常是相互联系、相互作用的，所以将两个指标联合应用能克服单一指标的不足之处，能更好地阐明肿瘤的发生发展过程，判断预后。

4　结 论

乳腺癌组织中，ASAH1、CDC6蛋白表达较正常组织中强，肿瘤组织HER-2蛋白表达强，则ASAH1蛋白表达增强，ER表达增强则ASAH1表达减弱；HER-2蛋白表达强，则CDC6蛋白表达增强；联合检测ASAH1及CDC6可用于更好的判断预后及指导治疗。

表1　ASAH1及CDC6在乳腺癌及正常乳腺组织中的表达

［1］Strelow A，Bernardo K，Adam-Klages S，et al.Overexpression of acid ceramidase protects fromtumor necrosis factor-induced cell death［J］.J Exp Med，2000，192（5）:601-612.

［2］Maeda I，Takano T，Matsuzuka F，et al.Rapid screening of specific changes in mRNA inthyroid carcinomas by sequence specificdifferential display: decrease dexpression of acid ceramidase mRNA in malignant and benign thyroid tumors［J］.Int J Cancer，1999，81（5）:700-704.

［3］Feng L，Barnhart JR，Seeger RC，et al.CDC6:fromDNA replication to cell cycle checkrpoints an oncogenesis［J］.Carcinogenesis，2008，29（2）:237-243.

［4］Mathias S，Younes A，Kan CC，et al.Activation of the sphingomyelin signaling pathway in intact EL4 cells and in a cell-free system by IL-1 beta［J］.Science，1993，259（5094）:519-522.

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R737.9

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1671-8194（2015）20-0114-02