顶空气相色谱法测定富马酸喹硫平的残留溶剂

张晶蓉

(天津市中医药研究院附属医院，天津 300120)

富马酸喹硫平(QTP)是一种非经典抗精神病药物，化学结构和药理学特性与氯氮平较相似［1］，为脑内多种神经递质受体拮抗剂。因其可阻断中枢多巴胺D2和5－HT5受体，具有安定和抗抑郁双重机理，临床上通常用于治疗各型精神分裂症和急性双相躁狂等症［2］。2008年获欧盟批准该药用于治疗双相情感障碍的临床治疗。2004年FDA批准该药作为双相躁狂发作单一或合并心境稳定剂的临床应用，本品在国内外有很广阔的应用市场。富马酸喹硫平在生产合成过程中使用了丙酮和乙酸乙酯，虽经回收，但这两种溶剂对人体有很大的伤害，且《中国药典》(2010年版)已对限度做出规定，因此在质量控制中要考查其有机溶剂残留的问题，并对其方法进行验证。目前尚未见报道有关富马酸喹硫平中乙酸乙酯和丙酮残留量的测定方法。本文参照《中国药典》2010年版二部残留溶剂检查法［3］，在参考相关文献［4－6］的基础上采用了顶空进样气相色谱法对这两种有机溶剂进行测定，方法简便易行，数据准确合理，重现性较好，可对富马酸喹硫平中有机溶剂残留进行有效控制，为药品生产企业制定质量标准和改进生产工艺提供有力的依据。

1 仪器与试药

安捷伦 7890B气相色谱仪，丙酮、乙酸乙酯、N，N－二甲基甲酰胺都为色谱纯试剂，富马酸喹硫平样品(批号 141201、141202、141203)由国内某药厂提供。

2 方法和结果

2.1 气相色谱条件与系统适用性的试验 色谱柱:DB－FFAP 石英毛细管柱(30 m ×0.25 mm，0.25 μm);程序升温，60℃保持3 min，然后以5℃/min的速度升至120℃，最后以40℃/min的速度升至180℃，保持 5 min;进样口:230℃;检测器:FID，280 ℃;载气:氦气;分流比:25∶1;流速:1.5 m l/min;顶空瓶加热温度:75℃;进样环温度:95℃;传输线温度:100℃;加热时间:35 min。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品储备液及对照溶液的制备 精密量取乙酸乙酯 252.6 μl(约相当于 200 mg)、丙酮 254.0 μl(约相当于200 mg)，置200 ml量瓶中，加N，N－二甲基甲酰胺至刻度，摇匀，作为对照品储备液。精密量取对照贮备液5 ml，置50 ml量瓶中，用N，N－二甲基甲酰胺稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。

2.2.2 供试品溶液的制备 精密称定本品0.5 g，置顶空瓶中，精密加N，N－二甲基甲酰胺10 ml，超声，作为供试品溶液。

2.3 专属性试验 精密量取上述对照品储备液，用N，N－二甲基甲酰胺逐步稀释，按“2.1”项下色谱条件测定，出样顺序依次为乙酸乙酯、丙酮。取“2.2.1”项下的对照溶液进样，两成分之间的分离度均大于2.0，理论板数以乙酸乙酯峰计，不得低于8 437。丙酮、乙酸乙酯分离度应符合规定，溶剂对实验无干扰。见图1。

图2 对照品(A)供试品(B)气相色谱图

2.4 标准曲线的建立 精密量取对照品贮备液0.5、2.5、4、5、6 和 10 ml分别置于 50 ml量瓶中，加 N，N －二甲基甲酰胺至刻度，摇匀，制成一系列浓度的对照溶液;分别量取上述各浓度对照溶液1 μl，注入气相色谱仪，依“2.1”项下色谱条件测定，以对照溶液浓度为横坐标(X)，对照峰面积为纵坐标(Y)，进行线性回归。结果显示乙酸乙酯和丙酮均在10～200 μg/ml的范围内线性关系良好，线性方程分别为Y=6.86×10－1X+10.92(r=0.999 1)、Y=7.01 ×10 －1 X+15.03(r=0.999 0)。

2.5 重复性试验 取批号为141201供试品适量，依“2.2.2”项下方法配制6 份供试品溶液，依“2.1”项下色谱条件进样，得丙酮和乙酸乙酯峰面积的RSD分别为 1.8%和 1.3%。

2.6 稳定性试验 取“2.2.1”项下对照溶液，于2、4、6、8、12和24 h进样测定，在对照溶液中，各色谱峰面积基本不变，表明溶液在24 h内稳定，丙酮与乙酸乙酯峰面积的RSD分别为0.9%和1.4%。

2.7 最小检出限 精密量取”2.2.1”项下对照品贮备液0.5 ml，置于50 ml量瓶中，加 N，N －二甲基甲酰胺至刻度，摇匀，再根据实际测定情况逐步稀释。依“2.1”项下色谱条件测定，丙酮的最低检出限为2.0 μg/ml，乙酸乙酯的最低检出限为 2.1 μg/ml。

2.8 回收率试验 精密称取本品0.25 g，共9份，分别置于顶空瓶中;另精密量取对照品贮备液4、5和6 ml，分别置于50 m l量瓶中，用N，N－二甲基甲酰胺至刻度，振摇混匀，精密量取上述一系列浓度各5 ml，置已有样品0.25 g的顶空瓶中，摇匀，依“2.1”项下色谱条件测定，按外标法计算回收率，结果见表1和表2。乙酸乙酯与丙酮平均回收率分别为 100.7%和100.9%。RSD 分别为0.7%和0.2%。

表1 乙酸乙酯回收率试验结果(n=9)

2.9 样品中乙酸乙酯与丙酮残留量的检查测定法取对照溶液和供试品溶液，75℃加热35 min，取上层气体1 ml注入气相色谱仪，照残留溶剂测定法(《中国药典》2010年版二部附录Ⅷ P 第三法)［3］，依“2.1”项下色谱条件测定。按外标法以峰面积计，含乙酸乙酯与丙酮均不得过0.2%。试验结果显示，3批样品残留溶剂均符合规定，见表3。

表2 丙酮回收率试验结果(n=9)

表3 样品测定结果

3 讨论

富马酸喹硫平在提取、分离等工艺使用了乙酸乙酯、丙酮，后续生产工艺中对这两种溶剂进行了回收。乙酸乙酯和丙酮对人体五官、中枢神经系统有抑制、麻醉作用，高浓度接触或长期接触均会对人体造成肝肾以及其他方面的损伤。因此《中国药典》(2010年版二部)对这两种残留溶剂的限度做了规定，不能超过0.5%。

3.1 进样方法的选择 采用顶空进样法，既可以经加热使残留的丙酮和乙酸乙酯在短时间内充分溶解于溶剂中，又避免了直接进样法可能带来的各种杂质的干扰，提高柱效，延长色谱柱的使用时间，可以节约生产厂家的成本。

3.2 柱温及条件的优化 实验中考查了不同柱温对样品溶液中乙酸乙酯、丙酮出峰时间的影响，综合检验灵敏度、测定误差以及供试品分析时间等因素。由于恒温实验分离效果不好，因此采用程序升温进行实验，依“2.1”项下色谱条件进行验证。

3.3 稀释剂的选择 采用顶空进样法测定样品时，一般使用二甲亚砜和N，N－二甲基甲酰胺作为稀释剂，考虑到样品在二甲亚砜中溶解性差，所以将稀释用溶剂换为N，N－二甲基甲酰胺，实验才能得以顺利进行，实验结果正常，数据合理。因此，本法适用于富马酸喹硫平残留溶剂的测定。

1 江开达.精神药理学［M］.北京:人民卫生出版社，2007:303－367

2 张象鳞.药物临床信息参考［M］.四川:四川科学技术出版社，2005:1100－1101

3 中国药典［S］:二部.2010:附录61

4 付芳，李太平.气相色谱法测定硫普罗宁中乙酸乙酯的残留量［J］.中国药业，2010，19(21):28

5 周蕾，雷永涛，郝小燕，等.淫羊藿总黄酮中乙酸乙酯、正丁醇溶剂残留量的测定［J］.贵阳医学院学报，2012，37(2):123 －126

6 李丽敏，钱大公，王柯，等.毛细管气相色谱法测定原人参二醇中有机溶剂残留物［J］.中成药，2010，32(5):821－822