八珍益母草涂膜剂提取工艺的优化

吴俊业

【摘要】目的：优化八珍益母草涂膜剂的制备工艺。方法采用正交试验综合评分法筛选八珍益母草涂膜剂制备的最佳提取工艺进行金葡球菌、大肠肝菌的抑制实验，并从成品的外观性状、成膜时间、稳定性、皮肤刺激性等一系列指标评价涂膜剂的质量。结果：75%的乙醇回流提取两次，每次1小时为制备该涂膜剂的质控步骤；该涂膜剂在体外抑菌试验，外观性状、成膜时间、稳定性、皮肤刺激性均有良好表现。结论：该制备工艺可靠，质量稳定。

【关键词】八珍益母草涂膜剂 提取工艺 优化

【中图分类号】R285.5 【文献标识码】B【文章编号】1004-4949（2015）02-0656-01

八珍益母草由多种成分的药物构成，比如当归、白术等，共有9味中药。八珍益母草有益身心健康，其主要的功能有益气养血以及抗菌等。现代医术研究证明，这种药物还具有止血、抗炎等功效，所以其市场需求也就越来越高，因此对其提取工艺进行研究，提取更多的药物，以满足市场需求。中药涂膜剂与我国中药很长一段时间以来使用的外用剂型相比，优势十分突出，其容纳的中药容量特别大，因为治疗效果更加明显，再加之，我国目前重要的生产现状的主要是中药与植物药复方相结合，而中药涂膜剂的提取正好适合这种生产现状。

一材料

益母草、当归、川育、甘草、熟地、党参、炒白术、袂等、酒炒白芍，上述这些材料均来自于正轨的企业；除了上述几种必备的材料之外，还应该准备牛肉，市场上销售的牛肉即可；聚乙烯醇以及丙三醇，乙醇（其含量应该达到95%），上述试剂均来自于正规的医药公司；牛肉膏以及琼脂等，均来自正规的实验室；大肠杆菌以及葡萄球菌等均来自于正规某学校的实验室。

二八珍益母草涂膜剂提取工艺

1.1正交试验的设计

本实验选用乙醇为提取溶剂用回流法进行提取。选择三因素三水平的正交表Lg（34）进行实验选择乙醇浓度（A）、提取时间（B）、提取次数（C）作为考察因素海个因素选择三个水平进行考察。

1.2中药提取液的制备

将上述9味药材饮片粉碎后称取益母草409、党参59、炒白术59、袂等59、甘草2.59、当归109、炒白芍59、川育59、熟地黄1摊然后混合均匀；共准备9份上述混合样品药物。将上述混合样品药物在相同操作条件下，以不同浓度的乙醇为提取溶剂汾别所列的不同工艺组合进行回流提取后将获得的提取液进行合并、过滤，减压回收乙醇至无醇味浓缩成浸膏59。

1.3八珍益母草涂膜剂的制备

在查阅资料和预试验研究结果的基础上，确定八珍益母草涂膜剂的各成分比例为：浸膏19、聚乙烯醇1.59、无水乙醇1.sml、蒸馏水sml，附加剂为少量的甘油和山梨酸。将获得的八珍益母草浸膏59均用蒸馏水定容成25ml放入冰箱中备用。称取聚乙烯醇（AH一26）7.59，纯净后加入45ml的蒸馏水和少量甘油（1一2滴），使其充分膨胀在水浴上（85T）加热直至完全溶解，随后加入前面定容的益母草浸膏5ml边加边搅拌待其均匀溶解后加入7.5ml的无水乙醇和少量山梨酸，搅拌均匀后迅速分装密闭，八珍益母草涂膜剂即制得标记备用。另取一份聚乙烯醇（AH一26），不加药液，改加入50ml的蒸馏水其他操作均相同制成不含药液的空白涂膜剂作为对照品备用。

3、性状考察

首先，外观，提取完成的八珍益母草涂膜剂一般呈现出来的颜色是浅绿色，还有些呈现出来的是棕绿色，黏性比较强，属于液体，香气独特，有一种清凉的感觉；其次，成膜实验，将所提取的八珍益母草涂膜剂分别涂抹于两个不同的地方，一个是皮肤，另一个是玻璃板，并且做好相关记录，上述几组不同的提取工艺其成膜的时间大致相同，多则5分钟，，少则3分钟，成膜之后其延展性能优良，除此之外，其可塑性以及黏附性都非常好，而且没有颗粒的感觉；再次，皮肤刺激性实验研究，利用随机抽取的方法，选择9名实验者，分别其手部以及胳膊等地方进行实验，涂抹时间为10小时，持续3天，实验人员的皮肤没有不良反应，所以使用这种制剂非常安全，对皮肤几乎没有任何的刺激性；最后，稳定性，将提取完成的八珍益母草涂膜剂进行分装，每个包装都要适量，将其放在是室内进行储存，3个月之后，进行观察，发现每个指标都没有出现异常情况，也没有出现霉变等情况，除此之外，也无异味，细菌在其中也没有滋生，从中可知八珍益母草涂膜剂稳定性能非常好。

4、抑菌实验

采用平皿挖洞灌药法比较复方益母草涂膜剂、水煎剂、空白涂膜剂的抑菌效果。

4.1牛肉膏蛋白膝培养基的配制

分别称取蛋白陈1摊、牛肉膏39、氯化钠59、琼脂粉159，取少于总量的水于烧杯中将各培养基成分（琼脂除外）逐一加入水中待溶，用文火加热溶解并不断搅拌，溶解后定容至1000ml。初配好的牛肉膏蛋白陈培养液属微酸性，需用NaOH溶液调pH至7.2一7.4，用pH试纸调节其酸碱值。配制好的培养基分装在相应的三角瓶内加棉塞，包扎三角瓶。将待灭菌的培养基放入加压灭菌锅内2小时。贮存供培养细菌用。

4.2菌悬液的配制

将供试菌种移接入相应的试管斜面培养基上将大肠杆菌、金黄色葡萄球菌置36-37T恒温培养箱内培养24小时，用接种环挑取少许菌体于装有无菌生理盐水的试管内震动均匀，制成菌悬液。

4.3体外抗菌试验结果

分析本次研究的八珍益母草涂膜剂在稳定性、皮肤刺激性、外观上的差异不大对其制备工艺的筛选主要是通过在抑菌效果上的差异来确定其醇提工艺。从以上分析可以得出结论：各因素对实验指标（抑菌效果）的影响按大小次序来说应当为A（乙醇浓度）>（提取次数）>B（提取时间下最好的方案为AZC3BI，即乙醇浓度75%提取3次提取2小时。可以看出这里分析出来的最好方案在已经做过的9次试验中并没有出现与它比较接近的第4号实验和第5号实验。但是实验的抑菌效果4号实验比第5号实验略好而且从节约资源考虑，宜选择4号实验为最佳方案。

所以可以得出结论选取75%的乙醇回流提取两次，每次回流1小时，作为八珍益母草涂膜剂的最佳提取制备工艺。因此此涂膜剂的主要制备工艺是：选取75%的乙醇回流两次每次回流1小时其他同2.3项下同法操作后制备3批显示良好的工艺重现性。

三讨论

八珍益母草涂膜剂的提取工艺相对比较简单，通常情况下，都是使用浓度差异比较明显的乙醇，将看当作是溶剂，利用这种溶剂进行药材的提取，精确的制备，最终达到最佳的浓缩状态，直到呈现出糖浆状态，之后再将其他类型的附加剂共同放入到乙醇溶液中，缓慢添加一定量的乙醇，进入到搅拌环节，注意搅拌的速度，快慢适宜，同时要注意均匀性，搅拌结束之后，进行质量检查，分来进行包装，密封好。完成上述一系列步骤之后，即可说完成八珍益母草涂膜剂提取的工作。这种涂膜剂的提取有别与其他制剂的提取工艺，其他制剂需要将溶剂挥发取得，但是八珍益母草涂膜剂的提取却不需要此步骤，也正是因为如此，浸膏提取的方法对八珍益母草提取工艺有着非常巨大的影响，所以为了避免这种影响，本文所研究的八珍益母草涂膜剂提取工艺最终选择不使用浓度不一致的乙醇溶液，这是实验研究的重要一步。

八珍益母草涂膜剂是由多种不同的药材构成，其中最重要的有益母草以及熟地黄等，这类药材都具有非常大的功能，比如抗菌以及抗炎等，因此本文实验研究的重要指标是體外抑菌指标，经过上述的实验研究认为乙醇含量达到75%，同时回流2次，每次回流的时间都控制在1小时，这种提取工艺能够取得最佳的效果。

参考文献

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