高效液相色谱分析三类保健食品中常见违禁药物的方法研究

蔡苇

【摘要】在人们生活水平不断提升的过程中保健食品受到的关注面越来越大，一方面保健食品确实能够从一定程度上补充人体所需营养使受众的健康水平得以提升，另一方面市场上部分商家受到利益驱使而在保健食品中添加相关违禁药物，这给受众的健康同时也带来了威胁。高效液相色谱法是一类常见的化学检测方法，在样品检测中具有较好的效果，本文对高效液相色谱分析三类保健食品中常见违禁药物的方法进行了分析并提出了相关观点，供以参考。

【关键词】高效液相色谱；保健食品；违禁药物

【中图分类号】TQ460.72 【文献标识码】B【文章編号】1004-4949（2015）02-0276-01

0.引言

目前市场上保健食品主要以补益类、减肥类以及控血糖类食品居多，在这些食品中化学成分较为复杂，部分商家为了节约成本以获取非法利益存在以次充好的情况，而所加入的违禁药物不仅仅会使药物质量降低，同时会直接影响到服用者的健康情况，若服用周期较长甚至可能使受众的生命安全受到威胁，因此需要通过有效的检出手段对保健食品进行检测，确保保健食品的质量达到标准[1]。

1高效液相色谱概述

高效液相色谱技术是最为常见的检测分离技术，细分又涵盖了吸附色谱、分配色谱离子、交换色谱以及凝胶色谱。该技术具有分离纯度高、灵敏度高、高效性等特点，但相对成本也偏高[2]。一般情况下高效液相色谱分离遵循以下流程：先对样品情况进行大致掌握并确定分离目的，然后对样品进行预处理及特殊处理再筛选合适的检测仪器并对检测参数进行调控[3]，对色谱进行有效筛选并进行预实验同时评估最佳分离条件，优化分离条件，对分离过程中出现的问题进行分析并进行定量校正。

2相关实验分析

以补益类药品为例进行具体实验分析，如下所示：

2.1实验仪器及试剂

西力士标准品，伐地那非标准品、新阳碱、还阳碱、甲醇、乙醇、磷酸、蒸馏水等；高效液相色谱仪、检测器、超声波清洗器、去离子水制备系统、相关工作站等。

2.2实验步骤

对他达那非、伐地那非等对照品进行准确称量，质量为0.0500g。将所取5份样品分别置于50ml量瓶中，向瓶中置入甲醇（40ml）溶解，溶解时间为5min，冷却后进行稀释，获取浓度为1mg/ml的对照品液，于4℃条件下进行保存。之后配置标准液，用甲醇液对对照品进行稀释，得到梯度浓度溶液（4.0ug/ml，10.0ug/ml，20.0ug/ml，40.0ug/ml，100.0ug/ml，200.0ug/ml）作为工作液。

色谱柱规格为250mm*4.6mm，5um，柱温设定为30℃，样品温度为室温，每次进样20ul，色谱柱流速为1.0ml/min。流动相取乙腈：磷酸缓冲液（0.02%）=1：3。

取相关胶囊内容物研磨充分，精确称取0.10g，将其置于50ml容量瓶中，添加甲醇进行溶解，利用超声波提取，冷却，继续加甲醇定容，利用微孔滤膜过滤作为固体样品溶液。在上述色谱条件下对他达那非、伐地那非、新阳碱、还阳碱等样品及标准品提取液进行测定。

2.3讨论

经过光谱分析发现甲磺酸西地那非与新阳碱在波长为225nm处存在最大吸收，他达那非在波长为199nm出存在最大吸收，伐地那非在波长为215nm条件下存在最大吸收，还阳碱在波长为280nm下存在最大吸收。由于在225nm处还阳碱吸收能力较强，可选225nm作为检测波长对上述样品进行实际分析。在色谱柱筛选方面通过横向比较发现不同流动相以及不同色谱柱条件下样品出峰顺序、保留时间以及峰形包括响应值等都存在较大差异，经综合研判发现安捷伦C18柱效果最优，柱规格为250mm*4.6mm，5um。流动相方面选取乙腈：磷酸缓冲液（0.02%）摒弃了缓冲液调节pH操作，并且不会受到挥发性影响。柱温30℃可保证样品波峰清晰分离，不会出现重叠情况并延长了波峰保留时间。流速方面采取1.0ml/min进行过柱操作，可保证波峰清晰分离，具有较为理想的分离度。经过线性回归处理得到上述化合物的线性回归方程分别为：

伐地那非（A=6.38*10^4C-11.4*10^4，r2=0.9991，线性范围为4.0-200.0ug/ml）；

还阳碱（A=3.57*10^4C-7.56*10^4，r2=0.9994，线性范围为4.0-200.0ug/ml）；

甲磺酸西地那非（A=6.56*10^4C-8.97*10^4，r2=0.9993，线性范围为4.0-200.0ug/ml）；

新阳碱（A=5.99*10^4C-1.51*10^4，r2=0.9997，线性范围为4.0-200.0ug/ml）；

他达那非（A=10.4*10^4C+2.85*10^4，r2=0.9995，线性范围为4.0-200.0ug/ml）。

通过上述处理可使得相关检测物质达到基线分离目的，同时对色谱条件进行优化，控制柱温与pH来获取理想分离效果，在分离过程中通过对样品液进行适当稀释可更好的对样品进行定性与定量测定，在PDA检测器基础上可提升容错率，特别是对复杂样品测定提供了有力的支持。

3结语

HPLC（High Performance Liquid Chromatography）高效液相色谱法在保健食品检测过程中承载了十分重要的作用，利用该方法可准确捕捉到保健食品中的违禁药物含量，为食品安全提供了重要保障

参考文献

[1] 严爱花，李贤良. 液相色谱-串级质谱法同时检测中成药及保健食品中非法添加的22种苯二氮卓类药物[J]. 分析化学. 2013（04）

[2] 葛宝坤，张群谦，赵孔祥. 高效液相色谱法同时测定减肥类保健食品中盐酸西布曲明和酚酞[J]. 药物分析杂志. 2012（11）

[3] 朱小红，马鹏飞，徐翔. 气相色谱-质谱联用定性检测保健食品和中成药中非法添加的镇静催眠类药物[J]. 中国药业. 2012（19）