孙淑娜1 席桂才1 王春生2 陈景超2
【摘 要】目的:比较相同树龄、相同采收期、不同产地银杏叶药材质量的差异。方法:参照2010版药典和舒血宁注射液质量标准检测银杏叶主要质量指标,包括总黄酮醇苷,萜类内酯、总灰分、指纹图谱和黄酮苷元峰面积比。结论:山东和江苏的银杏叶最适合作为生产舒血宁注射液的原料。
【关键词】银杏叶;总黄酮醇苷;黄酮苷元峰面积比;萜类内酯;指纹图谱
[Abstract]Objective:To research difference of the same age ginkgo biloba leaf quality in the same picking period and different area.Method:According to the 2010 edition of Pharmacopoeia and Shu xue ning injection quality standard,to measure main quality indexes of ginkgo biloba leaf,which includes total flavone glycosides,terpene lacton,total ash,fingerprint similarity,peak area ratio of flavone.Conclusion:
The Ginkgo biloba leaf in Shandong and Jiangsu is the most suitable for production of raw materials of Shuxuening injection.
[Key words]ginkgo biloba leaf;terpene lacton;peak area ratio of flavone;total ginkgo biloba;fingerprint similarity
银杏Ginkgo biloba L.为银杏叶科银杏属植物,主要产于我国[1],其主要有效成分为黄酮醇苷和萜类内酯。目前国内外以银杏叶作为原料生产的药品和保健品以达几十种,由于其药理活性显著,广受欢迎,如德国的金大多注射液,國内的舒血宁注射液和银杏叶片等。
国内种植银杏叶的地区较多,目前已形成规模种植的省份有山东、江苏、陕西、安徽和贵州等地。前期研究表明银杏叶最佳采收期为7月下旬到8月下旬,最佳树龄为4 -10年,但目前关于以上产地最佳采收期和最佳树龄银杏叶药材质量差异的对比研究尚未见报道,故笔者参照2010版药典和舒血宁注射液质量标准考察以上地区银杏叶药材的质量情况,希望为银杏叶相关药品的生产提供坚实的数据支持。
1 实验材料和仪器
银杏叶:2011年8月采收的山东、江苏、陕西、安徽和贵州5-7年树龄银杏叶(经过烘干处理)。
对照品:槲皮素、山奈素、异鼠李素、萜类内酯A、萜类内酯B、萜类内酯C、白果内酯(中国药品生物制品检定所)。
仪器:HPLC 为安捷伦公司1200液相色谱仪(UV检测器和ELSA检测器)、十万分之一电子分析天平为赛多利斯公司BT-125D 型。
试剂:甲醇(色谱纯),四氢呋喃(色谱纯),三氯甲烷(分析纯),丙酮(分析纯),HCl(分析纯),H3PO4(分析纯)等。
1 主要指标的检测
1.1总黄酮醇苷:按照2010版药典(297页)处理银杏叶样品制备总黄酮醇苷供试品,并进行检测和计算。
1.2黄酮苷元峰面积比:按照总黄酮醇苷项下的色谱峰计算,槲皮素与山奈素的峰面积比。
1.3萜类内酯:按照2010版药典(297页)处理银杏叶样品制备萜类内酯供试品,并进行检测和计算。
1.4指纹图谱:取银杏叶样品,粉碎,精密称取本品1g,加活性炭0.008g,精密加入75%的乙醇100ml,称定重量,置水浴中加热回流提取40分钟,取出,放冷,再称定重量,用75%的乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液25ml,蒸干,残渣加水2ml使溶解,置已处理好的聚酰胺柱(30~60目,3g,内径1cm),用水50ml洗脱,弃去水液,再用75%乙醇100ml洗脱,收集洗脱液,蒸干,残渣加流动相B适量使溶解,定量转移至5ml量瓶中,用流动相B稀释至刻度,摇匀,即得供试品。在按照舒血宁注射液质量标准检测和计算指纹图谱供试品的相似度。
1.5总灰分:按照2010版药典附录IX K处理银杏叶样品制备总灰分供试品,并计算。
2 结果与分析
由表-1可见,除安徽总灰分数据稍高外,其他地区基本相当;陕西地区总黄酮醇苷含量最高,山东、江苏和安徽次之,贵州最差,均符合2010版药典标准(不低于0.40%);陕西地区黄酮苷元峰面积比最高,但不适于生产舒血宁注射液的原料(标准为0.8-1.2),安徽、山东和江苏次之,贵州最差;陕西地区萜类内酯最高,山东和江苏次之,贵州和安徽分列第四、五位,均符合2010版药典要求(不低于0.25%);山东和江苏指纹图相似度谱基本相当,安徽第三,陕西和贵州分列第四、五位,均可满足舒血宁注射液的生产需求。
表-1 相同采收期(8月),相同树龄(5-7年),不同产地银杏叶质量对比情况
采收期
编号
总灰分
总黄酮
峰面积比
萜类内酯
指纹图谱
山东
201113
8.1%
0.953%
0.87
0.433%
0.942
201114
9.1%
0.899%
0.81
0.436%
0.935
201115
9.5%
0.978%
0.94
0.427%
0.945
江苏
201128
9.0%
0.927%
0.89
0.469%
0.957
201129
8.9%
0.917%
0.87
0.465%
0.949
201130
9.4%
0.926%
0.91
0.470%
0.959
陕西
201131
9.3%
1.064%
1.37
0.762%
0.889
201132
8,6%
1.123%
1.29
0.699%
0.888
201133
9.1%
1.018%
1.31
0.702%
0.895
贵州
201134
9.6%
0.429%
0.53
0.361%
0.887
201135
9.3%
0.457%
0.62
0.366%
0.891
201136
9.4%
0.422%
0.58
0.359%
0.880
安徽
201137
11.1%
0.941%
1.21
0.314%
0.912
201138
10.9%
0.888%
0.89
0.327%
0.915
201139
9.8%
0.976%
1.09
0.321%
0.916
注:以上各项指标均扣除水分后数值
2 结论
8月采收的山东、江苏、陕西、安徽和贵州5-7年树龄银杏叶的检验指标均符合2010版药典要求,其中山东和邳州的银杏叶药材最适合作为生产舒血宁注射液的原料。
3 讨论
山東和江苏地理位置相邻,故两地银杏叶质量接近,理论上,陕西和四川的银杏叶质量也应接近,但需进一步验证。
本文讨论相同采收期,相同树龄,不同产区的银杏叶的质量情况,为合理栽培和采收银杏叶提供了科学依据。
参考文献:
[1]《全国中草药汇编》上册.北京:人民卫生出版社,1982.295.