测定盐酸倍他司汀原料及制剂中盐酸倍他司汀含量的反相高效液相色谱法

乔艳萍

测定盐酸倍他司汀原料及制剂中盐酸倍他司汀含量的反相高效液相色谱法

乔艳萍

目的 探析盐酸倍他司汀原料及制剂中盐酸倍他司汀含量检测中应用反相高效液相色谱法的效果及意义。方法 采用C18色谱柱以混合溶液-乙腈-己胺为流动相，波长为261nm，流速设定为1．0ml/min，柱温设定为50℃，进样量为100ul。结果 盐酸倍他司汀和杂志峰分离良好，倍他司汀在0．05-0．55mg/ml范围内线性良好（r=0．99998）。结论 反相高效液相色谱法简便快速、准确灵敏、专属性强，可适用于测定盐酸倍他司汀原料及制剂中盐酸倍他司汀的含量。

盐酸倍他司汀；反相高效液相色谱法；含量

盐酸倍他司汀是临床一种常用的血管扩张药物，主要用于治疗椎基底动脉供血不足、美尼尔氏综合症、脑动脉硬化、不稳定心绞痛，取得了一定的治疗效果。根据2005年版《中华人民共和国药典》，多采用有汞污染的高氯酸滴定法测定原料含量，紫外分光光度法测定片剂含量。本文笔者采用反相高效液相色谱法测定盐酸倍他司汀原料及制剂含量，结果准确可靠，现将结果报告如下。

1 材料和方法

1.1 检测仪器 Flexar液相色谱仪，TGL-18C高速台式离心机，实验室温度控制器，08890-XX超声波清洗器，KHW-D-ILC精密拉伸水浴锅；FA124电子分析天平；JTU-1901双光束紫外可见分光光度计。色谱柱使用奥泰公司C18色谱柱（220mm×4.6mm，5um）。

1.2 试验试剂 盐酸倍他司汀对照组品、盐酸倍他司汀原料、盐酸倍他司汀片、甲醇、庚烷磺酸钠、醋酸钠、三乙胺、乙腈、试验用水为高纯水。

1.3 测定方法

1.3.1 色谱条件 流动相选择甲醇-庚烷磺酸钠--醋酸钠溶液- 冰醋酸 - 三乙胺 （25∶40∶35∶0.01∶0.01），调整 Ph=3.3；检测波长=261nm；流速 =1.0ml/min；柱温 =30℃。

1.3.2 对照品溶液 精密称取0.1mg倍他司汀对照品后加入1ml流动相配制成0.1mg/ml对照品标准液。

1.3.3 供试品溶液 精密称取装量差异项下盐酸倍他司汀10mg，以P2O5为干燥剂于100℃减压干燥2h，置于10ml量瓶内，精密加入流动相100ml超声（240W，40kHz）30min溶解，定容，再精密量取2ml并加流动相稀释至100ml刻度，摇匀，滤过，制备供试品溶液。取盐酸倍他司汀片剂辅料制取空白辅料溶液，过滤进样。

1.3.4 专属性考察 参照1.3.3项供试品标准液制备流程制备去除倍他司汀的阴性溶液，按法测定。

1.3.5 精密度考察 精密称取0.1mg倍他司汀加入1ml加流动相配制成浓度为0.1mg/ml供试品标准液，在设定的色谱条件下每次吸取10ul，连续进样6次，观察记录峰面积。

1.3.6 对照平线性考察 配成1ml流动相内含 0.05、0.15、025、0.35、0.55mg的倍他司汀对照组品溶液，精密吸取上述每浓度溶液10ul并注入液相色谱仪，在同等色谱条件下观察并记录色谱峰，纵坐标为峰面积（γ），横坐标为对照组品进样量（χ），绘制标准曲线。

1.3.7 重现性考察 精密称取适量同一批次盐酸倍他司汀样品6份，遵照测定方法项下相关操作制备盐酸倍他司汀样品溶液，测定倍他司汀含量并计算RSD值。

1.3.8 准确度考察 精密称取适量对照品、原料（已知纯度）9份，置于容量瓶内，同时精密加入适量盐酸倍他司汀对照品，按项下规范化制备成80%、100%、120%溶液，取模拟样品参照“含量测定”项下试验操作规范进行检测，计算回收率和RSD值。

1.3.9 样品含量测定 遵照上述检测方法，在利用外标法以峰面积计算样品的含量。

2 结果

倍他司汀出峰处阴性液无色谱峰，阴性试验无感染，提示专属性良好。精密度良好，RSD=0.95%。倍他司汀于0.05-0.55mg、ml范围线性联合，r=0.99998，见图1。重现性试验样品RSD=0.58%，提示重现性良好。准确度试验计算回收率=99.6%，RSD=0.66%。三批样品含量标示量分别为100.1%、99.5%、99.8%。

图1 盐酸倍他司汀工作曲线

3 讨论

本次试验笔者采用紫外分光光度法，于190-400nm波长范围依次扫描，结果发现在波长为206、216nm处吸收率最大，但是波长为206nm扫描时不能准确将盐酸倍他司汀和溶剂峰分开，故笔者认为选择波长216nm作为本次紫外检测的波长。流动相亦会影响检测准确性，冰醋酸、三乙胺、甲醇均为影响因素，笔者通过各种不同比例配置成溶液相，发现以盐酸倍他司汀色谱峰拖尾因子、保留时间、半峰宽、理论板数为考察指标，甲醇-0.01mol/L醋酸钠溶液-0.04mol/L庚烷磺酸钠 - 冰醋酸 - 三乙胺（25∶35∶40∶0.01∶0.01）为流动相，供试品各峰分离效果最好。结果显示，盐酸倍他司汀和杂志峰分离良好，倍他司汀在0.05-0.55mg/ml范围内线性良好（r=0.99998）。

综上所述，反相高效液相色谱法简便快速、准确灵敏、专属性强，可适用于测定盐酸倍他司汀原料及制剂中盐酸倍他司汀的含量。

作者单位：454750孟州市食品药品检验所

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