正交试验优选藏药六味大托叶云实散中挥发油的包合工艺

马宏伟+田汝芳+魏爱云

【摘 要】 目的：探讨六味大托叶云实散中肉桂、豆蔻和荜茇的混合挥发油包合工艺。方法：采用正交设计，以包合物收率和包合率综合评分为指标，考察挥发油与β-环糊精比例、包合温度、包合时间等3个因素对包合工艺的影响。结果：最佳包合工艺为挥发油与β-环糊精的比例为1∶ 6（V∶ m），40℃搅拌包合90min。结论：优选的包合工艺合理、可行，可为六味大托叶云实散的二次开发提供参考。

【关键词】 六味大托叶云实散；挥发油；β-环糊精；包合工艺

【中图分类号】R283-6 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2015）18-0023-02

Optimization of the Inclusion Technology for Volatile Oil from Liuwei Datuoyeyunshi Powder By Orthogonal Experment

MA Hongwei1 TIAN Rufang2 WEI Aiyun1

1-Shandong Arura Pharmceutical Research & Development Co.， Ltd.， Jinan 250101， China；

2-Shandong Health Pharmaceutical Co.，Ltd.， Jinan 250021，China

Abstract：Objective To optimize the inclusion technology of volatile oil compounds of Cinnamomi cortex， Amomi fructus rotumdus and Piperis longi fructus in Liuwei Datuoyeyunshi Povder.Methods The inclusion technology was optimized by orthogonal design with the ratio of volatile oil to β-cyclodextrin， inclusion temperature and inclusion time as factors using utilization ratio of volatile oil and the yield of inclusion compound as index. Results The optimal inclusion conditions were： applying the saturated aqueous solution method，the proportion of volatile oil to β-cyclodextrin was 1∶ 6（V∶ m）， lasting 90 minutes at 40℃. Conclusion The inclusion technology of volatile oil is reasonable， feasible， and suitable for industrial production.

Keywords：Liuwei Datuoyeyunshi Power； volatile oil；β-cyclodextrin； inclusion technique

六味大托叶云实散是藏医治疗妇科病的常用制剂[1]，由大托叶云实、石榴籽、肉桂、红花、豆蔻、荜茇组成。但产品的制备工艺及质量标准简单落后，为提高产品质量，对该产品进行了二次开发。挥发油是方中的主要药效成分，其中肉桂含挥发油1-2%，豆蔻含挥发油5-0%[2]，荜茇含挥发油1-0%[3]。为防止挥发油的挥发、氧化，掩盖不良气味，提高稳定性以及便于制剂，现对β-环糊精包合六味大托叶云实散中肉桂、豆蔻和荜茇挥发油工艺进行优化，为六味大托叶云实散的二次开发提供参考。

1 仪器与材料

1-1 仪器 挥发油提取器（四川蜀玻集团）；BT123D电子分析天平（德国·赛多利斯）；KDM型控温电热套（鄄城华鲁电热仪器有限公司）；DF-101S恒温磁力搅拌器（巩义市予华仪器有限责任公司）；101型电热鼓风干燥箱（北京市永光明医疗仪器厂）。

1-2 材料 肉桂（批号：20141003）、豆蔻（批号：20141112）、荜茇（批号：20140801）均由金诃藏药股份有限公司提供；β-环糊精（β-CD，北京索莱宝科技有限公司）；其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2-1 挥发油的提取与纯化[4-5] 按照处方比例称取肉桂、豆蔻、荜茇，浸泡1h，然后用水蒸汽蒸馏法提取6 h，得芳香水。将所得芳香水用石油醚（30～60℃）萃取，加无水硫酸钠脱水，挥干石油醚，得挥发油（ρ=0-975g/ml），密闭保存。

2-2 挥发油包合工艺研究

2-2-1 因素水平的选择 根据挥发油性质及预试验，选取挥发油与β-CD的比例，包合温度，包合时间为影响因素，按L9（34）正交表设计试验，以挥发油包合率和包合物收率作为考察指标[6]，优选挥发油包合工艺。因素水平见表1。

表1 因素水平表

2-2-2 包合物的制备 采用饱和水溶液法包合挥发油。精密量取挥发油2 ml，加无水乙醇制成挥发油的50%（V/V）无水乙醇溶液。按表1要求，制备规定温度下的β-CD的饱和水溶液，在一定转速下，缓慢加入挥发油的50%无水乙醇溶液，边加边搅拌至规定时间[7]，在0～4℃冷藏放置24 h，抽滤，再加适量石油醚（30～60℃）、水分别洗涤至无挥发油味、抽滤，40℃恒温干燥1 h，即得包合物。

2-2-3 挥发油空白回收试验 取挥发油的50%（V/V）无水乙醇溶液（油∶ 醇=1∶ 1）2 ml，置250 ml圆底烧瓶中，加蒸馏水100 ml，水蒸汽蒸馏法提取至挥发油量不再增加。测得提取的挥发油量为0-98 ml（n=3），挥发油的空白回收率为98%。

2-2-4 包合物含油量的测定 取挥发油包合物，置于250 ml圆底烧瓶中，加入蒸馏水100ml，水蒸汽蒸馏法提取挥发油至挥发油量不再增加。测量挥发油量，按实验号依次为1-49、1-63、1-59、1-55、1-58、1-60、1-51、1-64、1-75 ml。

2-2-5 包合物收率和挥发油包合率的测定 取“2-2-2”项下的挥发油包合物，精密称定重量，置500 ml圆底烧瓶中，加入蒸馏水250 ml，水蒸汽蒸馏法测定挥发油的实际含量[2]。

包合物收得率[8]=包合物重量/（β-CD重量+投油量）×100%

挥发油包合率[8]=包合物实际含油量/（投油量×空白回收率）×100%

挥发油的包合率和包合物收率都是挥发油包合时的重要指标。包合率反映了包合效果的好坏，收得率对实际生产具有重要的指导意义，因此，将包合物收得率和挥发油包合率的权重系数均定为0-5，对2个指标进行综合评分，试验结果见表2，方差分析见表3。

表2 正交试验结果

表3 方差分析表

注：P0-05（2，2）=19-00

由表2、3可知，三种因素对包合工艺的影响由大到小的顺序为：包合温度>油与β-CD的比例>包合时间，其中包合温度和油与β-CD的比例为显著性因素，直观最佳工艺为A3B2C2，但A2为A3的98-37%，从经济角度考虑，优选工艺为A2B2C2，即油与β-CD的比例为1∶ 6（V∶ m），40℃控温搅拌90min。

2-2-5 验证试验 根据正交试验结果，分别以直观最佳工艺和优选工艺对包合工艺进行验证，各平行做3份，结果直观最佳工艺挥发油包合率分别为：89-05%、90-31%、89-70%，包合物收得率分别为84-97%、84-65%、84-48%，优选工艺挥发油包合率分别为：89-50%、89-98%、89-67%，包合物收得率分别为84-66%、84-20%、84-43%，直观最佳工艺与优选工艺的值没有差异，且与正交试验的结果吻合，说明优选工艺是合理、稳定、可行的。

3 讨论

挥发油的β-CD包合技术是中药制剂的常用技术。六味大托叶云实散处方中肉桂和豆蔻含有大量挥发油，在散剂中容易散失或氧化，对挥发油进行提取和β-CD包合后，可以提升产品质量，提高疗效；荜茇有辛辣味，导致产品顺应性差，对荜茇挥发油进行包合后，产品口感有了很大改观；脂溶性的挥发油被包合后，其在水中的溶解性也大大改善[9-10]。

六味大托叶云实散是藏医治疗肾寒、胃寒引起的月经不调、白带异常的常用药物，但原制剂工艺以药材全粉入药，长期保存会导致制剂泛油，影响药物的疗效。实验通过对六味大托叶云实散的挥发油成分进行β-CD包合工艺的研究，可以对制剂的质量有所改善，并提高原制剂的疗效，为六味大托叶云实散的二次开发提供参考。参考文献

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（收稿日期：2015-06-09）