GC—MS法对金线兰挥发油化学成分的分析

张海等

摘要：利用索氏提取法和超声辅助提取法，分别通过非极性溶剂（石油醚）、极性溶剂（乙醇）来提取金线兰[Anoectochilus raxburghii （Wall.） Lindl]挥发油，并采用气相色谱-质谱联用法测定化合物组成。结果表明，石油醚索氏提取法效果最佳，共检出34种成分，鉴定出26种化合物，占挥发油总量的86.3%，主要成分为叶绿醇32.823%，油酸28.759%，植物醇5.271%，油酸酰胺4.797%，反式角鲨烯3.484%，植酮2.787%，2-单棕榈酸甘油1.789%。该结果将为金线兰的进一步开发提供基础数据。

关键词：金线兰[Anoectochilus raxburghii （Wall.） Lindl]；挥发油；索氏提取；超声辅助提取；化学成分

中图分类号：R282.71 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2015）-18-4581-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.18.048

金线兰[Anoectochilus raxburghii（Wall.）Lindl]别名金蚕、石蚕、金线莲等，是兰科开唇兰属的植物，中文学名是花叶开唇兰，主要分布于中国福建、广东、广西、浙江、江西、云南、四川、贵州、台湾等地[1]。金线兰是一种珍贵的稀有药材，全株都可入药，药性温和、味道甘甜，具有清热解毒、祛风利湿功效。近年来，金线兰逐渐用于促进儿童生长发育[2]，预防治疗高血压、高尿酸血症[3]、糖尿病[4]、急慢性肝炎、肾炎、癌症[5]等，另外，金线兰用于治疗临床上的一些疾病也取得了良好效果[6，7]。但迄今为止，对该植物的研究主要集中在人工栽培、组培、药理等方面，其有效成分与挥发性成分报道较少。该试验以野生金线兰为材料，采用索氏提取、超声辅助提取的方法，分别以乙醇、石油醚为提取剂，通过索氏提取、超声辅助提取挥发油，气相色谱-质谱联用技术分析挥发油的化学组成，以期为金线兰的开发和利用提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

药材为野生金线兰，采自福建，由遵义师范学院生命科学学院何林副教授鉴定为兰科开唇兰属植物花叶开唇兰Anoectochilus roxburghii （Wall.）Lindl。

试验所用试剂均为国产分析纯。

1.2 仪器

TRACE ISQ型气相色谱-质谱联用仪（美国热电公司）、电子天平（梅特勒—托利多仪器上海有限公司），粉碎机、烘箱、磁力搅拌器（上海科升仪器有限公司），旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂），循环式真空泵（巩义市予华仪器有限责任公司），高频数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。

1.3 方法

1.3.1 样品前处理 金线兰样品用去离子水洗净，于80 ℃烘箱中干燥8 h后，粉碎并过80目筛，待用。

1.3.2 索氏提取法提取 称取10 g金线兰粉末用滤纸包好，置于索氏提取器中，加入乙醇100 mL（V/V=1∶10），加热回流提取5 h，收集全部提取液，继续重复2次，直至提取液无色，合并提取液，浓缩。溶剂改为石油醚，重复上述试验。

1.3.3 超声提取法提取 称取10 g金线兰粉末于具塞锥形瓶中，加入乙醇100 mL，超声波（100 W，80 KHz，30 ℃）提取1 h，分别用滤纸，0.45 μm微孔滤膜过滤，合并滤液，浓缩。溶剂改为石油醚，重复上述试验。

1.3.4 金线兰挥发油的GC-MS分析 色谱柱TR-5MS（30 m×0.25 mm×0.25 μm；柱温：70 ℃（1 min），以5 ℃/min升温至300 ℃（10 min）；气化室温度280 ℃；载气为高纯度He（99.99%）；流速1.0 mL/min；进样量1 μL；分流比为20∶1。质谱条件：离子源为EI源；离子源为280 ℃；电子能量70 eV；传输线温度280 ℃；质量扫描范围为50～500 amu。定性分析通过Xcalibur色谱工作站检索标准MS图库，同时结合有关MS图文献解析，确认金线兰挥发性物质的化学成分。同时按峰面积归一化法计算，求出金线兰各化学成分的峰面积相对百分含量。

2 结果与分析

石油醚索氏提取金线兰挥发油总离子流见图1。

GC-MS检出的各化学成分及其峰面积相对百分含量，见表1～表4。

该试验分析了不同方法、不同溶剂提取的金线兰挥发油的结果。其中乙醇的索氏提取挥发油中检出16个成分，鉴定出11个化合物，并用气相色谱峰面积百分比法测定了各种组分的相对百分含量，占挥发油总量的75.17%（表1）。石油醚索氏提取的挥发油中检出34个成分，鉴定出26个化合物，占挥发油总量的86.3%（表2）。乙醇超声辅助提取的挥发油中检出16种成分，鉴定出8种化合物，占挥发油总量的82.66%（表3）；石油醚超声辅助提取的挥发油中检出26种成分，鉴定出10种化合物，占挥发油总量的47.48%（表4）。

由表1～表4中可知，野生金线兰的挥发油中，主要成分为萜类化合物和链状芳香族化合物（脂肪酸、醇类、烷烃类、醛以及酯）等。对比研究表明，4种提取工艺中石油醚索氏提取法效果最佳，共检出34种成分，鉴定出26种化合物，其中含量最高的为叶绿醇32.823%，油酸28.759%，植物醇5.271%，油酸酰胺4.797%，反式角鲨烯3.484%，植酮2.787%，2-单棕榈酸甘油1.789%。其中叶绿醇及其代谢产物不仅是机体氧化代谢的重要能量来源，而且在糖脂代谢、脂肪细胞分化聚酯调控方面具有生物学功能，能有效减少肝脏中的脂肪累积。油酸可降低血液总胆固醇和有害胆固醇，却不降低有益胆固醇。反式角鲨烯对于治疗高、低血压，贫血，糖尿病，肝硬化，癌症等有较好的疗效。

3 小结

通过对比研究不同溶剂、不同提取方法的金线兰挥发油化学成分，结果表明，石油醚索氏提取法效果最佳，共检出了4种成分，鉴定出26种化合物，其结果有望为进一步优化金线兰活性成分提取工艺提供理论依据。

参考文献：

[1] 蔡文艳，肖华山，范季珍.金线莲的研究进展[J].亚热带植物科学，2003，32（3）：68-72.

[2] 肖诏玮.金线莲口服液治疗小儿抽动-秽语综合征49例[J].西北药学杂志，2005，20（2）：81-82.

[3] 陈学香，夏向南，肖志刚.老年人高尿酸血症及金线莲胶囊治疗疗效观察[J].中国美容医学，2011，20（4）：17-19.

[4] 余 杰，李 伟，张晓辉.金线莲多糖抗糖尿病作用的研究[J].海峡药学，2013，25（11）：37-40.

[5] 林秀钦，杨 菁，陈新峰.金线莲挥发油抗人肺癌细胞NCI-H446作用研究[J].医药前沿，2013（27）：33-34.

[6] 李 芹，周 文，刘 路.金线莲喷雾剂治疗手足口病口腔疱疹临床观察[J].福建中医药，2012，42（3）：9-10.

[7] 颜耀斌.奥美拉唑联合金线莲治疗Hp感染60例临床观察[J].福建中医药，2008，39（2）：11-12.