老年高血压患者颈动脉粥样硬化与血管内皮生长因子关系的研究

陈爱芳 韩卫红 张伟 黄曼维

老年高血压患者颈动脉粥样硬化与血管内皮生长因子关系的研究

陈爱芳 韩卫红 张伟 黄曼维

作者单位：266011 山东省青岛市，青岛市立医疗集团超声科（陈爱芳、韩卫红）；煤炭总医院超声科（张伟、黄曼维）

目的 评价老年高血压脑梗死患者颈动脉粥样硬化和血管内皮生长因子（VEGF）水平的相关关系及意义。方法 选取2011年5月至2013年6月在青岛市市立医院神经内科和保健科住院的老年高血压患者66例，其中男性42例，女性24例，年龄64～88（73.4±5.7）岁，设无心脑血管并发症的老年高血压患者（32例）为B组，老年高血压并脑梗死患者（34例）为C组；从同期在青岛市市立医院查体中心进行健康体检的人群中选取性别、年龄相匹配的30人为对照组（A组）。采用高分辨率超声检测三组人群的颈动脉内膜-中层厚度（IMT）、内径（r）、IMT/r比值及血流动力学参数，ELASA法检测血清VEGF，比较各组VEGF水平。按颈动脉平均IMT分为内膜正常组、内膜增厚组、斑块形成组和管腔狭窄组，比较各组VEGF水平。结果 三组 IMT 及 IMT/r比值分别为：A 组（0.89±0.12）mm，（12.81±2.0）%；B 组（1.12±0.15）mm，（16.7±2.32）%；C 组（1.35±0.18）mm，（18.44±3.54）%。B组和 C组患者IMT及 IMT/r比值比 A组增大（P＜0.05）。C组颈动脉收缩期峰值流速（SPV）为（0.43±0.10）m/s，舒张末期流速（EDV）为（0.11±0.04）m/s，血管搏动指数（PI）为（2.05±0.3 2），阻力指数（RI）为（0.89±0.08），显著高于 B 组和 A 组（P＜0.05）。三组血清 VEGF 水平分别为 52.46 pg/ml、168.95 pg/ml、294.66 pg/ml，B组和C组患者血清VEGF水平比A组升高（P＜0.05），尤以C组改变更明显，两组之间比较差异有统计学意义（P＜0.01）。结论 老年高血压尤其并发脑梗死患者存在明显的颈动脉粥样硬化，其血清VEGF水平明显升高。高分辨率超声检测颈动脉IMT及血流动力学参数结合血清VEGF水平的变化，对高血压脑梗死的预测有一定参考价值。

高血压；脑梗死；颈动脉；血管内皮生长因子

动脉粥样硬化是一种全身性血管疾病,是缺血性脑血管疾病的危险因素之一，常引起脑梗死、心肌梗死及猝死[1]。血管内皮生长因子（VEGF）的主要功能是形成新的血管，在血管堵塞情况下，血管内皮生长因子可以促进新血管的生成来绕过阻塞的血管。本研究意在评价老年高血压脑梗死患者颈动脉粥样硬化和血管内皮生长因子水平的相关关系及意义。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选取2011年5月至2013年6月在青岛市市立医院神经内科和保健科住院的老年高血压患者66例，其中男性42例，女性24例，年龄 64～88（73.4±5.7）岁，均经详细询问病史、体格检查、X线胸片、心电图、肝肾功能、血糖和血脂等检查，符合《中国高血压防治指南2010》[2]制定的高血压诊断标准。除外继发性高血压、糖尿病。研究对象中设无心脑血管并发症的老年高血压患者（32例）为B组；老年高血压并脑梗死患者（34例）为C组，均经头颅CT或磁共振证实。从同期在青岛市市立医院查体中心进行健康体检的人群中选取性别、年龄相匹配的30人为对照组（A组），其中男性18例，女性 12 例，年龄 63～85（73.8±5.3）岁，均无高血压、糖尿病、出血性疾病、肝肾功能损害等。三组间年龄及性别未见统计学差异（P＞0.05）。研究对象均提前了解本研究情况并获得其有效同意。

1.2 试验材料 试剂盒采用美国MARKET INC公司生产的血管内皮生长因子（VEGF）含量测定试剂盒。主要仪器设备有：LOGIQ9彩色超声诊断仪（美国GE公司），PHILIP IU22彩色超声诊断仪（美国PHILIP公司）。

1.3 研究方法

1.3.1 标本采集 所有研究对象均禁食10 h以上，于次日清晨空腹抽取肘静脉血3 ml，置于干净试管中，2000 r/min，离心半径12 cm，离心10 min，取上层血清统一编号，置于-80℃的超低温冰箱中，用于检测VEGF。

1.3.2 颈动脉超声检查 本研究按照中国医师协会超声医师分会《血管和浅表器官超声检查指南》[3]推荐的检查方法，患者取仰卧位，颈部垫枕，头转向检查对侧，充分暴露检查侧的颈部。沿血管走向纵行扫查颈动脉。从颈总动脉近心端向头侧移动，依次显示颈总动脉（CCA）、颈总动脉分叉处（CAB）和颈内动脉（ICA），尽量能探到颈部最高位置。于心室舒张末期测定血管内径（r）和颈动脉内膜－中层厚度（IMT）（管腔内膜交界面至中膜与外膜交界面之间的回声距离即为IMT），并计算IMT/r比值。多普勒检测颈动脉收缩期峰值流速（SPV）和舒张末期流速（EDV），并计算血管搏动指数（PI）和血管阻力指数（RI）。同时观察颈总动脉分叉处、颈内动脉IMT和动脉粥样硬化斑块形状、大小、类型及斑块所致管腔狭窄程度。观察彩色多普勒血流充盈情况。颈动脉粥样硬化斑块评价标准：①动脉内膜－中层厚度（IMT）＜1.0 mm为正常颈动脉（图1）。②动脉内膜－中层厚度（IMT）≥1.0 mm为内中膜增厚（图2）。③动脉内膜－中层局限性增厚≥1.5 mm为斑块形成（图3）。

1.3.3 VEGF的测定 ①原理：本试剂盒采用双抗夹心ELISA法。人血清中的VEGF与生物素化的抗人VEGF单抗结合，并且生物素化的抗人VEGF单抗上的生物素与酶标板上Streptavidin结合；加入辣根过氧化物酶标记的抗人VEGF，它将与人VEGF结合而形成免疫复合物。加入TMB显色。人VEGF的浓度与OD（450 nm）呈正比。②操作方法严格按照说明书操作。以OD值为纵坐标，以标准品浓度为横坐标，绘制标准曲线。根据血清样品的OD值可在标准曲线上查出其浓度。

1.4 统计学方法 使用SPSS 10.0统计软件进行分析。所有数据均以±s表示，应用q检验进行两两比较。数据分布不符合方差齐性的要求，用t检验进行比较。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 颈动脉超声检测 与A组比较，B组和C组颈动脉IMT增加，IMT/r比值增大（均P＜0.05），斑块检出率增高，尤以 C组增加明显（P＜0.01），B、C两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。C组高血压患者的SPV、EDV、PI、RI与B组患者比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。B组高血压患者SPV、EDV、RI、PI与 C 组比较，未见统计学差异（P＞0.05）。见表1。

表1 各组颈动脉超声检测结果（±s）

表1 各组颈动脉超声检测结果（±s）

注：A组：对照组，B组：无心脑血管并发症的老年高血压患者，C组：老年高血压并脑梗死患者。与A组比较，aP＜0.05；与B组比较，bP＜0.05

组别 例数 TMI（mm）血管阻力指数RI A 组 30 0.89±0.12 6.95±0.11 12.81±2.01 4 26 13 0.65±0.12 0.18±0.13 1.29±0.58 0.71±0.15 B 组 32 1.12±0.15a 7.18±0.23a 16.70±2.32a 18 14 56a 0.50±0.14 0.15±0.03 1.39±0.37 0.74±0.09 C 组 34 1.35±0.18ab 7.32±0.25ab 18.44±3.54ab 26 8 76ab 0.43±0.10a 0.11±0.04a 2.05±0.32a 0.89±0.08a血管内径（r）（mm）TMI/r（%）有斑块的动脉数（条）无斑块的动脉数（条）检出率（%）收缩期流速SPV（m/s）舒张末流速EDV（m/s）血管搏动指数PI

2.2 各组之间VEGF水平比较 A组VEGF水平为 52.46 pg/ml，B 组 VEGF 水平为 168.95 pg/ml，C组VEGF水平为294.66 pg/ml。与A组相比较，B组和C组VEGF水平明显增高（P＜0.05），C组与B组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.3 IMT与VEGF水平的关系 将研究对象以内中膜厚度＜1.0 mm、动脉内膜－中层厚度（IMT）≥1.0 mm、动脉内膜－中层局限性增厚≥1.5 mm及动脉内径缩小30%为标准分为内膜正常、内膜增厚、斑块形成及管腔狭窄四组。随着IMT的增厚，VEGF水平增高，各组之间两两比较差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 IMT 与VEGF水平比较（±s）

表2 IMT 与VEGF水平比较（±s）

注：与内膜正常组比较，aP＜0.05；与内膜增厚组比较，bP＜0.05；与斑块形成组比较，cP＜0.05

组别 例数 VEGF（pg/ml）内膜正常组 28 30.25内膜增厚组 20 136.45斑块形成组 30 267.78ab管腔狭窄组 18 302.69abc

3 讨论

高血压是当前最常见的心血管疾病之一，其主要并发症如脑梗死、心肌梗死等已严重危害我国人民的身心健康。高血压的内皮损害与动脉粥样硬化及其血栓性并发症的发生、发展关系密切。在保持血压稳定的同时，保护内皮功能完好无损，就有可能大幅度降低并发症的发生率。国内章志玲等[4]采用臂踝脉搏传导速度（baPWV）和踝臂血压指数（ABI）作为动脉硬化评价指标，研究心血管疾病发生与危险因素的关系。许多研究[5,6]已证明，高血压与动脉粥样硬化有关。本研究结果显示，高血压是颈动脉粥样硬化的危险因素。本研究选取了反映内皮细胞受损的分子标志物VEGF，结合彩色多普勒超声检测颈动脉内膜中层厚度的变化，判断高血压患者发生脑梗死的可能性及脑梗死并发症患者的预后、复发的可能性。

3.1 颈动脉粥样硬化与脑梗死 颈动脉粥样硬化发病机制的研究发展较快，但目前尚未完全清楚，它可能是遗传素质、血小板、平滑肌细胞、内皮细胞、胆固醇和脂蛋白等多种因素综合作用的结果。国内彭清等[7]对高血压患者血清chemerin与颈动脉粥样硬化的关系进行了研究，认为chemerin是高血压患者发生颈动脉粥样硬化的危险因素之一。李振洲等[8]报道了颈动脉粥样硬化与同型半胱氨酸及MTHFR基因多态性的相关性。徐丽倩等[9]将老年高血压患者按颈动脉IMT分组进行研究，结果表明其颈动脉IMT与超敏C反应蛋白及尿酸密切相关，IMT增厚组及IMT斑块形成组血尿酸及超敏C反应蛋白异常率比IMT正常组明显升高。

国外文献[10]报道，在发生缺血性脑梗死的病因中，60%起因为颈动脉狭窄所致的血流动力学障碍。而颈动脉位置浅表易于观察，为检测颈动脉粥样硬化提供了一个良好窗口[11]。应用高分辨力、多功能超声检查，可以观察血管管径及内壁情况，并用脉冲多普勒观察血液动力学参数，为颈动脉粥样硬化提供可靠的信息。目前比较常用的无创检测周围动脉粥样硬化主要是超声测量颈动脉IMT和粥样斑块。颈动脉增厚部位出现斑块的危险性明显增加，且颈动脉粥样硬化时IMT的改变早于斑块的发生，颈动脉IMT增加是颈动脉粥样硬化的早期标志，随着颈动脉IMT的增加，冠心病和脑梗死的发病率增高。本研究中血流参数值较文献中的偏低，可能与研究对象的年龄偏大有关。总之，彩色多普勒超声显像作为无创性的动脉血管诊断技术，与动脉造影有很好的一致性，它能从二维、脉冲多普勒及彩色多个角度综合判断颈动脉颅外段的血流情况，为早期诊断、判定疗效及决定手术与否等提供非常有价值的临床资料，为缺血性脑血管患者诊断之必需。

3.2 血管内皮生长因子 VEGF是1989年Ferrara等首先从牛垂体的滤泡星状细胞中纯化的同源二聚体糖蛋白[12]，是一种特异性作用于血管内皮细胞的生长因子。VEGF具有以下特征：①是由血管内皮细胞邻近的细胞所产生，促血管形成是一种旁分泌机制；②通过与细胞受体结合直接发挥作用；③表达受缺氧高度调节；④促血管形成作用较强，在脑缺血研究中，为建立有效侧支循环，寻找脑缺血治疗新途径，近年VEGF在缺血脑组织中变化与作用颇受关注。目前国外已有报道，实验鼠脑缺血后，VEGF对缺血脑组织DNA损害与修复具有重要影响[13]。

本研究结果显示，高血压合并脑梗死组及单纯高血压组与对照组比较血清中的VEGF水平明显增高。VEGF有强烈的促血管生成功能，提示VEGF可以促进脑缺血区的血管增生，改善该区微循环的血流供应，减少梗死面积。本研究结果表明，VEGF可能是梗死灶大小的标志。国外Slevin等[14]报道，急性脑梗死患者血清中VEGF水平与梗死灶面积呈正比，但VEGF含量明显高于本试验结果，可能是由于个体差异或所用试剂不同所致。单纯高血压组的VEGF水平增高可能与高血压患者存在血管内皮损伤、动脉粥样硬化及不同程度的小动脉硬化引起的心肌和脑缺血有关。本研究显示，血清VEGF水平随高血压程度加重和病史延长而增高。因此检测高血压患者血清VEGF水平可预测高血压患者心脑血管并发症的可能性，进行早期预防，可降低高血压心脑血管并发症的发病率。

综上所述，可得出如下结论：①老年高血压患者由于存在血管内皮的损伤，其颈动脉粥样硬化发生率明显增高，而颈动脉粥样硬化与脑梗死密切相关。②老年高血压及高血压并脑梗死患者IMT和斑块发生率明显增加。老年高血压合并脑梗死患者颈动脉血流参数也发生了明显改变：收缩期血流速度降低，阻力指数（RI）、搏动指数（PI）增高。③老年高血压患者及颈动脉粥样硬化患者血清中VEGF明显增高。VEGF水平与颈动脉粥样硬化程度呈正相关。④用彩色高频超声诊断仪对老年高血压患者颈动脉进行检测，方便、准确、经济、重复性强，可以早期预测脑梗死的发生情况，结合VEGF水平，预防脑梗死的发生，对于合并脑梗死的患者可以预测脑梗死的预后及复发的可能性，从而为临床的治疗和预防提供帮助。

图1 正常颈动脉

图2 颈动脉内-中膜增厚

图3 颈动脉斑块

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The relationship between the variations of VEGF and atherosclerosis of the carotid artery in elderly patients with hypertension

CHEN Ai-fang＊，HAN Wei-hong，ZHANG Wei，et al.＊Department of Utrosound，Qingdao Medical Group，Qingdao 266011，China

HUANG Man-wei，E-mail：Hmanwei@sina.com

ObjectiveTo assess the relationship between the process of atherosclerosis in carotid arteries and serum levels of vascular endotherial growth factor（VEGF）in elderly patients with hypertension and carebral infaction.MethodsSelection in May 2011 to June 2013 in Qingdao municipal hospital neurology and care of elderly patients with high blood pressure in hospital 66 cases，42 cases of men，age from 64 to 88，the average age was（73.4±5.7）years.All patents divided into group B（32 cases）or group C（34 cases）according to whether combined with cardiovascular or cerebrovascular complications in elderly patients with hypertension.At the same period，30 healthy people in the Qingdao municipal hospital physical examination center for health check who matched the gender and the age were selected as control group（group A）-up crowd.The inner-media thickness（IMT），radius，the dynamic parameters and the ratio of IMT/r of carotid arteries were measured by using of high-resolution ultrasonic equipment.All patients were compared with 30 controls.All subjects were classified in control group，inner-media thickened group，thrombogenesis group and lumina stenosis group according to the mean IMT of carotid arteries，then the serum levels of VEGF among different groups were compared.ResultsThe IMT/r and serum levels of VEGF of patients with hypertension were higher than those of control group and have statistical significance（P＜0.05）.In patients with cerebral infarction，the levels of VEGF and systolic peak velocity（SPV），enddiastolic velocity（EDV），pulse index（PI），resistance index（RI） were significantly higher than patient without secondary compliments（P＜0.05）.The IMT of carotid infarction was directly correlated with VEGF （P＜0.05）.ConclusionThe process of scleratheroma in carotid arteries are exist in elderly patients with hypertension and secondary cerebral infarction，and the serum levels of VEGF of them are also increased.Measure the IMT and the dynamic parameters of carotid artery by using high-resolution ultrasonic equipment and measured the plasma levels change of VEGF may be helpful in anticipating cerebral infarction secondary to hypertension.

Hypertension；Cerebral infarction；Carotid artery；Vascular endothelial growth factor

黄曼维，E-mail：Hmanwei@sina.com

10.3969/j.issn.1672－5301.2015.01.011

R544.1

A

1672-5301（2015）01-0039－04

2014-08-18）