Sirt-1和Hif-1α在慢性阻塞性肺疾病患者外周血单个核细胞中的表达及其意义

李　芳，关文霞，任　飞，仝雪霞，孙玉宁

(1.宁夏医科大学总医院呼吸与危重医学科，宁夏 银川 750004；2.宁夏医科大学研究生院，宁夏 银川 750004；3.宁夏医科大学生物化学与分子生物学系，宁夏 银川 750004)

Sirt-1和Hif-1α在慢性阻塞性肺疾病患者外周血单个核细胞中的表达及其意义

李芳1，关文霞2，任飞2，仝雪霞2，孙玉宁3

(1.宁夏医科大学总医院呼吸与危重医学科，宁夏 银川 750004；2.宁夏医科大学研究生院，宁夏 银川 750004；3.宁夏医科大学生物化学与分子生物学系，宁夏 银川 750004)

目的： 检测慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中沉默信息调节子(Sirt-1)和缺氧诱导因子1α(Hif-1α)的表达，探讨Sirt-1和Hif-1α的表达在COPD发生发展中的作用。方法： 应用肺功能仪对COPD急性加重期组(n=20)、COPD稳定期组(n=22)和对照组(n=20)的研究对象进行肺功能指标测定，采用Real-time PCR和Western blotting法检测3组研究对象PBMCs中Sirt-1和Hif-1α mRNA和蛋白表达，并分析Sirt-1和Hif-1α表达水平与肺功能的关系。结果： 与对照组比较，COPD急性加重期组、COPD稳定期组患者第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%)、第1秒用力呼气容积与用力肺活量的比值(FEV1/FVC%)均降低(P<0.05)；与COPD稳定期组比较，COPD急性加重期组患者FEV1%和FEV1/FVC%降低(P<0.05)。COPD急性加重期组、COPD稳定期组患者PBMCs中Sirt-1 mRNA和蛋白表达水平均低于对照组(P<0.05或P<0.01)；与COPD稳定期组比较，COPD急性加重期患者PBMCs中Sirt-1 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.01)；与对照组比较，COPD患者Hif-1α mRNA及蛋白表达水平均明显升高(P<0.05或P<0.01)，COPD急性加重期患者其表达水平升高更明显(P<0.01)；与COPD稳定期组比较，COPD急性加重期组患者PBMSCs中Hif-1α mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05)。Pearson直线相关法分析，Sirt-1 mRNA(蛋白)表达水平与患者FEV1%(rmRNA=0.61，r蛋白=0.545)和FEV1/FVC% (rmRNA=0.513，r蛋白=0.491)呈正相关关系，Hif-1α mRNA(蛋白)表达水平与FEV1%(rmRNA=-0.812，r蛋白=-0.781)和FEV1/FVC% (rmRNA=-0.661，r蛋白=-0.674)呈负相关关系(P<0.05)。结论： COPD患者PBMCs中Sirt-1基因表达水平下降，Hif-1α基因表达水平上调，二者的表达变化可能与COPD的发生发展密切相关。

沉默信息调节子；缺氧诱导因子1 ；慢性阻塞性肺疾病；外周血单个核细胞

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是一种常见、多发的慢性呼吸系统疾病，是一组以进行性、可逆气流受限为特征的肺部疾病。COPD的不断发展最终可引起肺源性心脏病和呼吸衰竭，死亡率较高。COPD的发生发展将使患者处于不同程度的慢性缺氧状态,同时又使患者处于长期全身慢性炎症状态。目前研究[1]认为：COPD的发生涉及细胞、体液介质和分子遗传等多个途径，而且与血管内皮细胞、平滑肌细胞和单核细胞等细胞的异常及相关基因的表达有关。沉默信息调节子(silent information regulator，Sirt-1)属于Sir2基因家族成员，是一种保守的从古细菌到哺乳动物中都存在的NAD+依赖的组蛋白/非组蛋白去乙酰化酶。Sirt-1对细胞的生存、凋亡和衰老等生理活动起十分重要的调节作用[2]。缺氧诱导因子1α (hypoxia-inducible factor-1α，Hif-1α) 是哺乳动物细胞中存在的随细胞中氧浓度变化而介导低氧适应性反应的转录因子，是低氧条件下维持氧稳态的关键性物质。既往研究[3-4]报道：COPD患者肺组织Sirt-l的表达呈下降趋势，Sirt-l能够调节烟雾所致的肺内皮细胞、纤维细胞和巨噬细胞的吞噬功能。在体外培养的细胞中，Sirt-l能够与Hif-1 和Hif-2 相互作用，使后者去乙酰化并激活，调节细胞对缺氧的反应[5-6]。基于单核细胞在COPD发病中的功能[1]、Sirt-l和Hif-1 基因与COPD的研究报道，本课题组采用荧光定量PCR、Western blotting法观察COPD稳定期和急性加重期患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中Sirt-1和Hif-1α表达水平的变化,以期阐明PBMCs中Sirt-1和Hif-1α表达水平是否与COPD严重程度相关,为深入研究PBMCs、Sirt-1和Hif-1α在COPD疾病发生中的作用提供实验依据，同时也为COPD的干预治疗提供新思路。

1　资料与方法

1.1研究对象 选择2012年10月—2013年4月宁夏医科大学总医院呼吸内科收治的20例COPD急性加重期患者，其中男性13例，女性7例，年龄为48～74 岁，平均年龄(67.6±8.3)岁；COPD稳定期患者选择相同医院相同科室门诊患者22例，男性14例，女性8例，年龄为50～75岁，平均年龄(65.6±7.3)岁。COPD患者的诊断分期、分级均符合中华医学会呼吸病学分会制订的COPD诊治标准[7]，患者均不伴有肿瘤、糖尿病、自身免疫性疾病、结核病、肝肾疾患、消化系统和泌尿系统等感染及左心衰的临床表现。另外选取同期于该院进行体检的健康成年人 20名作为对照组，其中男性13名，女性7名，年龄为50～73岁，平均年龄(66.5±7.6)岁。3组观察对象年龄、性别等基线资料比较差异无统计学意义，组间具有可比性(P>0.05)。

1.2主要试剂 Ficoll-Pague淋巴细胞分离液(美国Life公司)；Trizon试剂和反转录试剂盒(美国Invitron公司)；SYBR Premix Ex TaqⅡ(Takara 大连宝生物生物工程有限公司)；总蛋白提取试剂盒和BCA法蛋白浓度测定试剂盒(上海贝博生物科技有限公司)；Sirt-1和Hif-1α(美国Santa Cruz公司)；Sirt-1、Hif-1和β-Actin 引物由上海生工生物工程有限公司合成。

1.3研究对象肺功能的测试采用德国耶格公司生产的MSPET肺功能仪进行检测,质控达到ATS标准。测定前24 h患者不使用支气管舒张剂。肺容量测定用氦气法。记录第 1 秒用力呼气容积(forced expiration volume in one second,FEV1)占预计值百分比(FEV1%)、第 1 秒用力呼气容积与用力肺活量(forced vital capacity,FVC)的比值(FEV1/FVC%)。

1.4研究对象PBMCs提取所有血标本均取自受试者的肘静脉,其中COPD急性加重期组标本于患者住院当天采集。取10 mL EDTA-K2抗凝的全血，加入等体积Hank’s液中稀释，沿试管壁轻轻倒入预先装有10 mL Ficoll-Pague淋巴细胞分离液，2 000 r·min-1离心30 min，收集血浆层与Ficoll-Pague层之间的单个核细胞层，用3 mL PBS缓冲液1 200 r·min-1离心10 min，洗涤细胞2次，收集细胞沉淀，即为PBMCs。细胞分为两部分，分别用于提取RNA和细胞蛋白。

1.5Real-time PCR法检测研究对象PBMCs中Sirt-1和Hif-1 mRNA表达水平 采用Trizol试剂提取各组细胞总RNA，核酸蛋白分析仪测定260和280 nm处的吸光度(A)值及总RNA浓度。各组分别取 2 μg总RNA，按照常规方法进行反转录反应后，cDNA产物置于-20℃保存。qPCR反应体系包括：cDNA 4 μL、2×SYBR Master Mix 12.5 μL、引物各 1 μL、Tap酶0.15 μL、三蒸水6.35 μL。反应条件为：95℃预变性 3 min，95℃变性 20 s、60℃退火 30 s、72℃延伸 20 s，循环 35 次。实验重复 3 次，阈值循环(threshold cycle,Ct)值取平均值，采用2-△△Ct法计算研究对象的PBMCs中Sirt-1、Hif-1α mRNA相对表达水平。各组Sirt-1和Hif-1α mRNA 的相对表达量:ΔCT =CT目的基因-CTGAPDH，ΔΔCT =CTCOPD-CT对照组，基因相对表达差异量= 2-ΔΔCT。Sirt-1和Hif-1 基因 Real-time PCR引物序列见表1。

表1Sirt-1和Hif-1α 基因Real-time PCR引物序列

Tab.1Real-time PCR primer sequences of Sirt-1 and Hif-1 gene

GenePrimersequenceSirt-1Forword:5'-CAAAGGAGCAGATTAGTAGGCG-3'Revise:5'-CTCTGGCATGTCCCACTATCAC-3'Hif-1Forword:5'-TTGCTCATCAGTTGCCACTTCC-3'Revise:5'-AGCAATTCATCTGTGCTTTCATGTC-3'β-ActinForword:5'-TGACGTGGACATCCGCAAAG-3'Revise:5'-CTGGAAGGTGGACAGCGAGG-3'

1.6Western blotting法检测研究对象PBMCs中Sirt-1和Hif-1 蛋白表达水平收集的各组细胞，用蛋白裂解液(加入蛋白酶抑制剂)于冰上裂解 30 min后，4℃、12 000 r·min-1离心 15 min，吸取上清，用Bradford 法进行蛋白定量，根据蛋白浓度，每组取80 μg蛋白，加入5×SDS 上样缓冲液，95℃煮沸10 min使蛋白变性，于-80℃保存备用。取各组蛋白进行十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)，然后电转移至 0.22 μm 的PVDF膜上。5% BSA封闭2 h，采用 1∶1 000 稀释的 Sirt-1、Hif-1 一抗4℃孵育过夜，用TBST振摇洗膜10 min×3次，以1∶5 000 稀释的羊抗兔生物素标记二抗，室温孵育1 h后，再次用TBST振摇洗膜10 min×3次。ECL底物化学发光显色。采用Image lab 软件进行条带分析，以目的条带面积灰度值与β-actin条带面积的比值作为目的蛋白的相对表达水平。

2　结　果

2.13 组研究对象的肺功能指标对照组、COPD急性加重期组和COPD稳定期组研究对象的性别、年龄、吸烟指数等比较差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较，COPD急性加重期和COPD稳定期组患者FEV1%和FEV1/FVC%明显降低(P<0.05或P<0.01)。与COPD稳定期组比较，COPD急性重期组患者FEV1%和FEV1/FVC%降低(P<0.05)。3 组研究对象的肺功能指标见表2。

表2各组研究对象的肺功能指标

GroupnFEV1%FEV1/FVC%Control20105.1±2.184.6±0.8StablestageofCOPD2266.2±3.0*61.1±1.1*Acuteexacerbation stageofCOPD2046.6±3.2**△47.2±1.3**△

*P<0.05,**P<0.01 compared with control group;△P<0.05 compared with stable stage of COPD group.

2.23 组研究对象PBMCs中Sirt-1和Hif-1α mRNA表达水平与对照组比较，COPD稳定期和急性加重期患者PBMCs中Sirt-1 mRNA的表达水平均下调，差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)，COPD急性加重期患者PBMCs中Sirt-1的下调更加明显(P<0.01)；与对照组比较，COPD患者PBMCs中Hif-1α mRNA表达水平上调(P<0.05或P<0.01)，COPD急性加重期患者PBMCs中Hif-1α mRNA表达水平上调更加明显(P<0.01)。与COPD稳定期组比较，COPD急性加重期组患者PBMCs中Sirt-1 mRNA表达水平降低，Hif-1α mRNA表达水平升高(P<0.05)。见表 3。

2.33 组研究对象PBMCs中Sirt-1和Hif-1α 蛋白表达水平与对照组比较，COPD稳定期和急性加重期患者PBMCs中Sirt-1蛋白表达水平均下调(P<0.05或P<0.01)，COPD急性加重期患者表达水平下调更加明显(P<0.01)；与对照组比较，COPD稳定期和急性加重期患者PBMCs中Hif-1α 蛋白表达水平均上调(P<0.05或P<0.01)，COPD急性加重期患者上调更加明显(P<0.01)。与COPD稳定期组比较，COPD急性加重期组患者PBMSC ss中Sirt-1蛋白表达水平降低，Hif-1α 蛋白表达水平升高(P<0.05)。见图1和表4。

表3各组研究对象PBMCs中Sirt-1和Hif-1α mRNA表达水平

GroupnSirt-1mRNAHif-1mRNAControl201.00±0.061.00±0.08StablestageofCOPD220.70±0.11*1.36±0.18*Acuteexacerbation stageofCOPD200.50±0.07**△1.89±0.13**△

*P<0.05,**P<0.01 compared with control group；△P<0.05 compared with stable stege of COPD group.

2.4Sirt-1和Hif-1α 表达水平与肺功能指标的相关性分析 经 Pearson直线相关法分析，Sirt-1 mRNA(蛋白)表达水平与患者肺功能指标FEV1%和FEV1/FVC%呈正相关关系；Hif-1α mRNA(蛋白)表达水平与患者肺功能指标FEV1%和FEV1/FVC%呈显著负相关关系。见表5。

Lane 1,2: Control group;Lane 3,4: Stable stage of COPD group;Lane 5,6: Acute exacerbation stage of COPD group.

图1Western blotting法检测各组研究对象PBMCs中Sirt-1和Hif-1α 蛋白表达电泳图

Fig.1Electrophoregram of expressions of Sirt-1 and Hif-1α proteins in PBMCs of objects in various groups detected by Western blotting method

3　讨　论

COPD是一种以不完全可逆的气流受限为特征的肺部慢性疾病，是以产生低氧血症为后果的常见病、多发病。COPD的发生涉及多种病因、多种因素。近年来关于机体中一些炎性介质、细胞因子、血液和血管内皮细胞功能异常等在COPD发生发展过程中的作用逐渐引起研究者的重视[1-8]。

表4各组研究对象PBMCs中Sirt-1和Hif-1α 蛋白表达水平

GroupnSirt-1proteinHif-1proteinControl200.352±0.0670.147±0.072StablestageofCOPD220.236±0.085*0.241±0.057*Acuteexacerbation stageofCOPD200.137±0.038**△0.461±0.084**△

*P<0.05,**P<0.01 compared with control group;△P<0.05 compared with stable stage of COPD group.

表5Sirt-1和Hif-1α mRNA(蛋白)表达水平与FEV1%及 FEV1/FVC%的相关性

Tab.5Correlations between expression levels of Sirt-1,Hif-1α mRNA (protein) and FEV1% and FEV1/FVC%

LungfunctionrSirt-1mRNA(protein)rHif-1αmRNA(protein)FEV1%0.611(0.545)-0.812(-0.781)FEV1/FVC%0.513(0.491)-0.661(-0.674)

Sirt-1作为一种NAD+依赖的组蛋白/非组蛋白去乙酞化酶，在酵母中，Sirt-1连同与其相互作用的几个蛋白质在基因沉默、基因组稳定性、细胞寿命和代谢调节方面起不可缺少的作用。研究[2]显示：Sirt-1与代谢综合征(如糖尿病)、基因稳定性(DNA损伤)、肿瘤发生和神经退行性疾病(阿尔茨海默氏病、帕金森病)的发生有关联。研究[9]显示：在胰岛组织中，在氧化应激条件下，Sirt-1与叉头转录因子(FOXO)蛋白结合加强抗氧化应激作用。Sirt-1与FOXO蛋白、P53蛋白相互作用，对抗多种DNA 损伤，维持基因稳定性[2]。在心血管方面，有研究[10-11]显示：Sirt-1可上调血管内皮细胞一氧化氮合酶(eNOS)表达和活性，调节内皮细胞的功能，还可通过影响肝脏和巨噬细胞中胆固醇代谢，进而影响动脉粥样硬化的发生。Sirt-1与呼吸系统疾病的关系方面，Rajendrasozhan等[3]发现：COPD患者肺组织中Sirt-1表达水平呈下降趋势。Hwang等[4]发现：Sirt-1通过PARP-1作用调节烟雾所致的肺内皮细胞、纤维细胞和巨噬细胞的吞噬功能。

Hif由Hif-1 和Hif-2 2个亚基组成，其中Hif-1 作为功能亚基发挥作用[13]。Hif-1是一种转录因子蛋白，能够调节炎症、缺氧和肿瘤相关等近百种靶基因的表达[14-15]，关于Hif-1 与肺血管重塑、肺动脉高压形成及COPD产生的关系，已有较多的文献报道[16-19]。

宁夏回族自治区地处我国的西北高原地区，此处COPD是一种常见病、多发病。本研究以COPD稳定期和急性加重期患者为对象，提取其PBMCs，观察研究对象PBMCs中Sirt-1和Hif-1α 的表达水平，结果显示：COPD患者中Sirt-1的表达水平下调，尤其在急性加重期患者中下调更明显；而COPD患者Hif-1α 的表达水平上升，而且也是在急性加重期患者中上升更明显，这一结果与国内王宗强等[20]研究结果一致。

综上所述，本文作者认为：Sirt-1和Hif-1α 基因在COPD的产生及其病理改变中发挥了一定的作用，二者的表达水平与COPD的病情程度存在密切的关联。研究[6,9,12]显示：Sirt-1能够影响Hif-1 、Hif-2 和金属蛋白酶9(MMP-9)的表达，而且在体外培养的细胞中，Sirt-1能够与Hif-1和Hif-2 相互作用，使后者去乙酰化并激活，调节细胞对缺氧的反应。因此本文作者推测：在缺氧的条件下，Sirt-1的表达水平下调，减弱了其对Hif-1α的活性或表达抑制作用，促进了Hif-1α的表达及其活性变化。关于Sirt-1是否真正参与调节Hif-1α表达及活性、Sirt-1和Hif-1α二者表达水平的变化与COPD形成及病变程度的具体机制，有待于进一步深入探索。

[1]Barnes PJ.Cellular and molecular mechanisms of chronic obstructive pulmonary disease[J].Clin Chest Med,2014,35(1):71-86.

[2]Haigis MC,Sinclair DA.Mammalian sirtuins: biological insights and disease relevance[J].Annu Rev Pathol,2010,5(3): 253-295.

[3]Rajendrasozhan S,Yang SR,Kinnula VL,et al.SIRT1,an antiinflammatory and antiaging protein,is decreased in lungs of patients with chronic obstructive pulmonary disease[J].Am J Respir Crit Care Med,2008,177(8): 861-870.

[4]Hwang JW,Chung S,Sundar IK,et al.Cigarette smoke-induced autophagy is regulated by SIRT1-PARP-1-dependent mechanism: implication in pathogenesis of COPD[J].Arch Biochem Biophys,2010,500(2): 203-209.

[5]Lim JH,Lee YM,Chun YS,et al.Sirtuin 1 modulates cellular responses to hypoxia by deacetylating hypoxia-inducible factor 1alpha[J].Mol Cell,2010,38(6): 864-878.

[6]Dioum EM,Chen R,Alexander MS,et al.Regulation of hypoxia-inducible factor 2alpha signaling by the stress-responsive deacetylase sirtuin 1[J].Science,2009,324(5932): 1289-1293.

[7]中华医学会呼吸病学分会慢性阻塞性肺疾病学组．慢性阻塞性肺疾病诊治指南(2007年修订版)[J].中华结核和呼吸杂志,2007,30(1): 8-17.

[8]张振芳,王在义.COPD基因研究进展[J].临床肺科杂志,2014,19(1):124-127.

[9]Moynihan KA,Grimm AA,Plueger MM,et al.Increased dosage of mammalian Sir2 in panereatic beta cells enhances glucose-stimulated insulin secretion in mice[J].Cell Metab,2005,2(2): 105-117.

[10]Ota H,Eto M,Ogawa S,et al.Sirt1/eNOS axis as a potential target against vascular senescence,dysfunction and atherosclerosis[J].J Atheroscler Thromb,2010,17 (5): 431-435.

[11]Li X,Zhang S,Blander G,et al.SIRT1 deacetylates and positively regulates the nuclear receptor LXR[J].Mol Cell,2007,28(1): 91-106.

[12]Nakamaru Y,Vuppusetty C,Wada H,et al.A protein deacetylase SIRT1 is a negative regulator of metalloproteinase-9[J].FASEB J,2009,23(9): 2810-2819.

[13]Fong GH.Mechanisms of adaptive angiogenesis to tissue hypoxia[J].Angiogenesis,2008,11(2): 121-140.

[14]Adams JM,Difazio LT,Rolandelli RH,et al.HIF-1: a key mediator in hypoxia[J].Acta Physiol Hung,2009,96 (1): 19-28.

[15]Schumacker PT.Hypoxia-inducible factor-1 (HIF-1) [J].Crit Care Med,2005,33(12 Suppl): S423-S425.

[16]魏文婷,李冰,贾晔然,等.慢性阻塞性肺疾病患者肺组织中缺氧诱导因子1α的表达变化[J].中国病理生理杂志,2013,29(9):1700-1703.

[17]徐永芳,孙维罗,孙燕.ET-1、VEGF、HIF-1α在COPD合并肺动脉高压形成中的意义[J].心脑血管病防治,2010,10(5):339-340.

[18]Mizuno S,Bogaard HJ,Gomez-Arroyo J,et al.MicroRNA-199a-5p is associated with hypoxia-inducible factor-1α expression in lungs from patients with COPD[J].Chest,2012,142(3): 663-672.

[19]Putra AC,Tanimoto K,Arifin M,et al.Genetic variations in detoxification enzymes and HIF-1α in Japanese patients with COPD[J].Clin Respir J,2013,7(1):7-15.

[20]王宗强,于荣秀,吴健红,等.缺氧诱导因子-1 在COPD患者外周血单个核细胞中的表达[J].广东医学,2011,32(1):64-66.

Expressions of Sirt-1 and Hif-1α in peripheral blood mononuclear cells of patients with chronic obstructive pulmonary disease and their significances

LI Fang1,GUAN Wenxia2,REN Fei2,TONG Xuexia2,SUN Yuning3

(1. Department of Respiratory and Critical Care Medicine,General Hospital, Ningxia Medical University,Yinchuan 750004,China;2.Graduate School，Ningxia Medical University, Yinchuan 750004,China; 3. Department of Biochemistry and Molecular Biology, Ningxia Medical University,Yinchuan 750004,China)

ObjectiveTo investigate the expressions of silent information regulator 1 (Sirt-1) and hypoxia-inducible factor 1α (Hif-1α) in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) of the chronic obstructive pulmonary disease (COPD) patients,and to clarify their potential roles in the occurrence and development of COPD.Methods42 patients with COPD in acute exacerbation stage (n=20) and in stable stage (n=22) and 20 healthy people were chosen.The lung function indexes of all cases were examined by lung function machine.The expressions of Sirt-1 and Hif-1α mRNA and protein in PBMCs of the objects in various groups were measured by Real-time PCR and Western blotting method． The relationships between the expression levels of Sirt-1 and Hif-1α and lung function were analyzed.Results Compared with control group,the calculated ratios of forced expiration volume in one second to predicted volume (FEV1%) and the the calculated ratios of forced expiration volume in one second to forced vital capacity (FEV1/FVC%) of the patients with COPD in stable stage and acute exacerbation stage were significantly decreased (P<0.05);compared with the patients in stable stage of COPD group,the FEV1and FEV1/FVC% of the patients with COPD in acute exacerbation stage group were decreased (P<0.05).The expression levels of Sirt-1 mRNA and protein of the patients with COPD in acute exacerbation stage and stable stage were significantly lower than those in control group (P<0.05 orP<0.01);compared with the patients in stable stage of COPD group,the expressions of Sirt-1 mRNA and protein in PBMCs of the patients with COPD in acute exacerbation stage group were decreased(P<0.05);meanwhile,the expression levels of Hif-1α mRNA and protein of COPD patients were significantly higher than those in control group (P<0.05,P<0.01),especially in acute exacerbation stage(P<0.01);compared with the patients in stable stage of COPD group,the expressions of Hif-1α mRNA and protein in PBMSCs of the patients with COPD in acute exacerbation stage group were increased(P<0.05).The Pearson correlation analysis results showed that there were positive correlations between the expression levels of Sirt-1 mRNA (protein) and the FEV1%(rmRNA=0.661，rprotein=0.545) and FEV1/FVC (rmRNA=0.513，rprotein=0.491)(P<0.05),and there were negative correlations between the expression of Hif-1α mRNA (pretein) and FEV1%(rmRNA=-0.812，rprotein=-0.781) and FEV1/FVC(rmRNA=-0.661，rprotein=-0.674) (P<0.05).ConclusionThe expression level of Sirt-1 gene is decreased and the expression level of Hif-1α gene is increased in the patients with COPD,which may be associated with the incidence and pathogenesis of COPD.

silent information regulator 1;hypoxia-inducible factor 1α;chronic obstructive pulmonary disease;peripheral blood mononuclear cells

1671-587Ⅹ(2015)02-0356-06

10.13481/j.1671-587x.20150230

2014-06-10

国家自然科学基金资助课题(81160007)；宁夏回族自治区科技厅自然科学基金资助课题(NZ11204)

李芳(1972-)，女，宁夏回族自治区银川市人，副主任医师，医学硕士，主要从事缺氧性肺病与呼吸道感染方面的研究。

孙玉宁，教授，硕士研究生导师(Tel:0951-6980113,E-mail：sunraining2008@hotmail.com)

R563

A