尿沉渣细菌定量检查与尿培养检测结果的相关性分析

李静芳，文 丽，周友全，郭凤丽，杨 丽△

（1.云南省肿瘤医院／昆明医科大学第三附属医院检验科，云南昆明650118；2.会泽县人民医院检验科，云南曲靖654200）

成年人最常见的感染性疾病是尿路感染，也是泌尿系统常见的疾病之一。男女比例约为1∶9［1］，尿路感染如果不及时治疗常会变成慢性感染，严重地影响患者的生活质量。尿路感染实验室诊断的金标准是中段尿细菌培养［2］，对泌尿系统感染的诊断有着非常重要的价值，但是尿液的细菌定量培养从标本的采集、培养到出具报告，耗时比较长，常超过48h，一般是3 d，不能及时地为临床提供诊疗依据。而尿沉渣细菌定量计数检查耗时较短，当天可作出诊断。UF－1000i尿有形成分分析仪采用红色半导体激光、核酸荧光染色、流式细胞等技术进行尿的有形成分分析，通过测定其前向散射光、侧向散射光、荧光强度和电阻抗的变化可报告12个参数，对白细胞、细菌等5种尿有形成分进行定量分析［3］。若尿沉渣细菌定量计数可作为筛选尿路感染的一项指标，就会为临床缩短确诊时间，及时为患者治疗尿路感染。

1 资料和方法

1.1 一般资料 2013年9月至2013年12月临床疑似尿路感染患者191例，其中女97例，男94例。在带塞的无菌试管中留取清洁的中段尿10mL 立即送检，同时进行尿细菌定量培养和UF－1000i尿有形成分分析。

1.2 仪器与试剂 UF－1000i全自动尿有形成分分析仪（日本Sysmex公司产品和配套试剂），哥伦比亚血琼脂平皿、MAC 平皿和沙保弱平皿（郑州安图生物工程股份有限公司）、细菌鉴定使用法国梅里埃公司的Vtike－2 Compact全自动微生物分析仪。

1.3 方法

1.3.1 尿细菌定量培养和菌种鉴定 用1μL 定量接种环按SOP文件取充分混匀的清洁中段尿一环接种在哥伦比亚血平皿上，再用相同的方法分别接种MAC 平皿和沙保弱平皿，置于35 ℃孵育箱培养18～24h，用于细菌菌落计数。若革兰阳性球菌菌落计数104CFU／mL 或是革兰阴性菌菌落计数105CFU／mL则判断为尿细菌培养阳性［4］。（当尿中有2 种致病菌生长时，选择其菌落的计数接近或者104CFU／mL 的细菌为阳性统计菌，如果有两种以上的杂菌生长则视为污染）［3］，并对尿培养为阳性的菌落进行进一步的菌种鉴定。

1.3.2 UF－1000i尿有形成分分析 将接种后剩余的尿液在2 h内用UF－1000i全自动尿有形成分分析仪进行检测，记录白细胞和细菌定量计数结果。

1.4 统计学处理 将尿细菌培养的结果和尿沉渣分析的结果用SPSS 17.0统计学软件进行分析，以细菌培养结果阳性为标准，绘制受试者工作特征曲线（ROC）曲线、计算和分析曲线下面积（AUC），求出尿沉渣白细胞和细菌定量计数的诊断阈值。

2 结 果

2.1 尿液细菌培养结果 191例尿液标本中有12例培养出3种菌，疑似污染，视为不合格标本。余下179例合格标本中培养阳性为71例，阳性率为39.7%，其中男性标本27 例，女性标本44例。培养结果为：革兰阴性杆菌50 株，占70.4%（其中大肠埃希菌有41 株，占57.8%），革兰阳性球菌21 株，占29.6%（其中肠球菌有15株，占21.1%）。

2.2 UF－1000i尿沉渣分析仪检测白细胞计数和细菌计数的ROC曲线 用UF－1000i检测179例尿标本，白细胞计数和细菌计数结果用SPSS17.0统计软件绘制筛选尿路感染的ROC曲线。见图1。以ROC 曲线的左上角距离最近点，即约登（Youden）指数最大者作为最佳阳性的判断值。UF－1000i尿沉渣分析仪用于诊断尿路感染的阈值，细菌计数为1 024.5个／微升，白细胞计数为135.8个／微升，细菌和白细胞的AUC 分别为0.946和0.713。见表1。

图1 UF－1000i检测尿液白细胞和细菌的ROC曲线

表1 白细胞和细菌定量的ROC曲线指标

2.3 UF－1000i尿沉渣分析仪结果 以细菌计数1 024.5个／微升和白细胞计数135.8个／微升为诊断阈值。179例标本检出细菌阳性59例，白细胞阳性45例。两者与尿细菌定量培养之间的关系详见表2。根据上述的检测结果制作三线表，可计算出在该诊断阈值下的细菌和白细胞计数及其联合应用于诊断尿路感染的评价数据，结果见表3。

表2 UF－1000i检测白细胞数、细菌和与尿定量细菌培养的关系（n）

表3 细菌、白细胞单独或联合在筛选尿路感染中的价值（%）

3 讨 论

实验室诊断尿路感染的金标准一直以来都是中段尿尿细菌定量培养，但是从培养到出具报告，时间均在2d以上，耗时长，费用高。本试验按照尿中革兰阳性球菌菌落计数104CFU／mL，或是革兰阴性菌菌落计数105CFU／mL判断为尿细菌培养阳性，作为尿路感染的诊断标准。在179份尿标本中有71份标本细菌培养为阳性，阳性率为39.7%，其中革兰阴性杆菌占70.4%，尤以大肠埃希菌多见（57.8%）；革兰阳性球菌21株，占29.6%，以肠球菌多见（21.1%）。因为尿细菌培养可直接查到患病的病原，所以在本试验中作为标准。

UF－1000i全自动尿有形成分分析仪采用红色半导体激光、核酸荧光染色技术、流式细胞等技术，对尿液有形成分进行多角度散射光、多级别荧光和电子基团的检测，而且UF－1000i的检测通道是双通道，分别为沉渣通道和细菌通道，单独的细菌通道可以对细菌进行特异性的核酸荧光染色，有效地避免了其他成分的干扰，使UF－1000i对细菌的检出和定量更为准确［5］。有文献报道，对尿液细菌计数UF－1000i具有良好的重复性和线性［6］。

根据尿沉渣分析和尿培养结果绘制ROC曲线得出诊断尿路感染的阈值，细菌计数为1 024.5 个／微升，白细胞计数为135.8个／微升，细菌和白细胞的AUC分别为0.946和0.713。AUC越接近1，说明诊断效果越好。AUC在0.5～0.7时有一定的准确性；AUC在0.9以上有较高的准确性。

从表3 可以看出，作为独立的检测项目，细菌计数（1 024.5个／微升）要比白细胞计数（135.8个／微升）的诊断性能更好。单独以细菌作为筛查指标时，其灵敏度为78.9%，特异度为97.2%，阳性预测值为94.9%，阴性预测值为87.5%，假阳性率为2.8%，假阴性率为21.1%，准确性为89.9%。UF－1000i细菌计数在临床使用中存在21.1%假阴性，分析其病原菌时发现有6株肠球菌和4株牛链球菌，此类细菌在同类研究假阴性标本中也有发现［7］。在感染早期，肠球菌类细菌因为生长的营养要求比较高会造成尿标本细菌计数结果偏低而呈假阴性。其中存在2.8%的假阳性，笔者分析其原因可能是：（1）仪器将其他有形成分误认为是细菌。（2）患者已服用过抗菌类药物，菌量过少或被抑制不能培养出来。单独以白细胞为筛查指标时，其灵敏度为44.9%，特异度为87.0%，阳性预测值为68.9%，阴性预测值为71.2%，假阳性率为13.0%，假阴性率为55.1%，准确性为69.8%。所以白细胞计数对尿路感染的诊断起到了一定的作用，但假阴性率较高。当白细胞发生变性、崩解或聚集成团时，易被仪器误认，从而导致前向散射光和荧光强度的改变，使检测结果为假阴性，可致尿白细胞漏检［8］。当两者联合检测，以满足其中任一条件作为尿路感染的筛查指标时，虽然灵敏度有所提高，但假阳性也跟着上升，阳性患者不能被及时有效地诊断。当以同时满足两者的条件作为筛查尿路感染的指标时，可得到较好的诊断效果，特异度达98.1%，准确度达83.8%，阳性预测值达95.7%，阴性预测值为79.6%，但假阴性也高达37.5%，表明在临床使用中漏检的概率也很高。

本试验中得出诊断尿路感染的阈值为细菌计数1 024.5个／微升和白细胞计数135.8个／微升，和文献报道中所得阈值细菌计数2 944.5个／微升和白细胞计数91.5个／微升有所差异［3］。笔者分析其原因可能是：（1）收集的尿液总样本量较少，采集的标本以住院患者为主，细菌计数的数据主要集中在0～5 000个／微升，白细胞计数主要集中在0～100个／微升，得到的数据不呈正态分布。（2）不同细菌的营养要求和生长速度有差异。（3）尿培养和尿细菌定量的测定存在有时间差，会对结果造成一定的影响。

综上所述，对临床疑似尿路感染的标本，UF－1000i全自动尿有形成分分析仪能够快速有效地进行检测，细菌和白细胞计数的联合分析可筛除大部分阴性结果，对尿细菌培养的阳性预测性高，可降低检验成本和减轻工作负担，但存在一定的假阴性，故不可替代尿细菌培养。

［1］赖利华，夏云，马朦朦，等.尿液的4种检测方法在尿路感染诊断中的有效性比较［J］.重庆医学，2010，39（24）：3350－3352.

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［4］刘成玉，罗春丽.临床检验基础［M］.北京：科学技术文献出版社，2005：182－183.

［5］吴华军，吕青山，侯史文，等.UF－1000尿液分析仪在尿路感染诊断中的应用［J］.浙江实用医学，2010，15（4）：324－326.

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