气相色谱－质谱法结合保留指数分析鸭儿芹不同部位挥发油成分

胡思一，包箐箐，韩安榜，向 铮，林崇良（.温州医科大学附属第一医院，浙江 温州 35035；.温州医科大学药学院，浙江 温州 35035）

鸭儿芹（Cryptotaenia japonica Hassk）为伞形 科植物，主要分布于河北、甘肃、浙江、广西、云南等16个省区，夏、秋间采收。有关鸭儿芹入药多见于地方中草药手册，《中药大辞典》则将其茎叶、根、果实分别以鸭儿芹、鸭儿芹根、鸭儿芹果分列，2010年版《中华人民共和国药典》未曾收载，属于民间习用尚无标准的草药。鸭儿芹具有消炎、解毒、活血、消肿的功效，主治肺炎、肺脓肿、淋病、疝气、风火牙痛、痈疽疔肿、带状疱疹、皮肤瘙痒；鸭儿芹根发表散寒、止咳化痰，治风寒感冒、水呛咳嗽、跌打损伤。鸭儿芹果实消积顺气，治食积［1］；全草有特殊香气，含挥发油。瞿万云等［2］对湖北恩施鸭儿芹根、茎、叶，李娟等［3］对广西鸭儿芹根、茎、叶挥发油成分进行分析，但均未见利用GC－MS并结合Kovats保留指数对鸭儿芹根、茎、叶及果实的挥发油成分分析的报道。为了深入了解鸭儿芹不同部位所含挥发油化学成分，本研究采用水蒸气蒸馏法分别提取鸭儿芹根、茎、叶、果实挥发油成分，利用GC－MS并结合Kovats保留指数对其主要成分进行分析。

1 实验

1.1 仪器与材料 挥发油提取装置，旋转蒸发仪BUCH1－CH－0230（瑞士 BUCHI公司），美国 Agilent6890N型气相色谱与Agilent5975B质谱仪联用及工作站。样品2011年8月4日采自浙江省文成县铜铃山国家森林公园，经温州医学院附属第一医院林崇良副主任中药师鉴定为伞形科植物鸭儿芹全草；无水硫酸钠（AR）；正构烷烃混合对照品C8～C40（美国Accu Standard公司）。

1.2 挥发油的提取 将鲜鸭儿芹全草分为根、茎、叶、果实4部分，分别洗净剪碎，各取200g置于1 000ml的圆底烧瓶中，加入适量沸石和800ml蒸馏水，连续缓慢蒸馏提取5h。取上层精油，经无水硫酸钠干燥过滤，所得精油用乙酸乙酯稀释后进样。

1.3 GC－MS分析 将提取的鸭儿芹各部位挥发油用GC－MS仪分析，色谱条件：色谱柱为 HP－5MS 5%Phenyl Methyl Siloxane （30m×0.25mm，0.25μm）；载气为高纯He，载气流速为1.0ml／min，分流比20∶1；升温程序为：柱起始温度45℃，保持2min，以5℃／min升温到300℃，保持2min；进样口温度为250℃，进样量1μl。质谱条件：离子源EI源，电子能量70eV，离子源温度为280℃，四级杆温度为150℃，溶剂延迟为5.0min，扫描质量范围50～550amu，扫描方式：全扫描。GC－MS定性基于NIST05质谱库。

1.4 Kovats保留指数（KI值）计算 采用文献介绍保留指数法进行挥发性成分定性分析是可靠的方法，它是将正构烷烃的保留指数定为它的碳数乘以100，待测物的保留指数则用适当的正构烷烃的保留值来表示，通常测定某组分X的保留指数时，选取两个相邻的正构烷烃作为标准物，其中一个碳数为Z，另一个为（Z＋1），其净保留时间为tR（Z），tR（Z＋1），待测物的调整保留时间为tR（x），其恰处于两者之间，即：tR（Z）≤tR（X）≤tR（Z＋1）。取正构烷烃混合对照品按“1.3”项下条件进样1μl分析，用于挥发油中各组分的KI值计算；记录不同条件下各正构烷烃保留时间，采用线性升温公式计算各组分的KI值，由下式可计算组分的保留指数：

2 结果与讨论

2.1 定性分析结果 按“1.3”项下分析条件，分别对鸭儿芹根、茎、叶、果实的挥发性成分进行GC－MS分析。鸭儿芹挥发油总离子流图见图1。对总离子流图中各峰的质谱图进行NIST05质谱库检索，选取质谱匹配度高的前10个可能物质，计算其 KI值，并与NIST05质谱库KI值检索结果相比较，以质谱和KI值匹配度最高的化学结构为最佳鉴定结果。从鸭儿芹根鉴定出28个化合物，占总离子峰的86.66%；从鸭儿芹茎鉴定出27个化合物，占总离子峰的88.01%；从鸭儿芹叶鉴定出27个化合物，占总离子峰的94.03%；从鸭儿芹果实鉴定出26个化合物，占总离子峰的88.32%。

图1 鸭儿芹不同部位GC－MS总离子流图

2.2 化学成分的百分比含量分析 通过HP MSD化学工作站数据处理系统，按离子流色谱峰面积归一化法，求得挥发油中各化学成分的相对百分含量列于表1。

3 讨论

3.1 本次实验从鸭儿芹各部位共分析出35种挥发性化合物，其中22种化合物是各部位共有，化合物19、23只存在鸭儿芹根挥发油，香树烯、化合物25、红没药醇只存在鸭儿芹果实挥发油，各部位所含化合物种类及相同化合物的含量有一定差异。鸭儿芹根倍半萜类化合物占总挥发油的81.53%，单萜类化合物占总挥发油的5.14%；鸭儿芹茎倍半萜类化合物占总挥发油的81.71%，单萜类化合物占总挥发油的6.30%；鸭儿芹叶倍半萜类化合物占总挥发油的86.91%，单萜类化合物占总挥发油的5.575%；鸭儿芹果实倍半萜类化合物占总挥发油的80.90%，单萜类化合物占总挥发油的7.429%。

表1 鸭儿芹各部位挥发油的化学成分

3.2 本实验数据表明，鸭儿芹挥发油含有多种生理活性物质，单萜类成分β－蒎烯、α－蒎烯、β－月桂烯有镇咳祛痰、抗真菌作用；D－柠檬烯有抗癌作用且能抑制胆固醇合成［4］；倍半萜类成分β－榄香烯有抗肿瘤作用［5］；石竹素具抗肿瘤、解痉、抗疟疾、抗菌等作用；α－石竹烯、α－细辛脑具有平喘作用，后者又能止咳、祛痰、镇静、解痉、抗惊厥、抗癫痫［6］；单环不饱和倍半萜醇类红没药醇具有消炎作用。鸭儿芹具特殊香气，其诺卡酮、β－石竹烯、β－蒎烯、α－蒎烯、β－月桂烯、金合欢烯、反式－橙花叔醇等是其主要香气成分，常作为香料和香料中间体。

3.3 将本实验研究用鸭儿芹与广西产鸭儿芹及湖北恩施产鸭儿芹的挥发性成分进行比较［2，3］，发现3个产地鸭儿芹挥发油成分种类及含量有较大差异，如瞿万云等对湖北恩施鸭儿芹根、茎、叶挥发性化学成分的研究鉴定出17种化合物，李娟等对广西鸭儿芹根、茎、叶挥发油的化学成分分析鉴定出根11种、茎25种、叶18种化合物，根、叶主要成分为倍半萜，单萜含量很低，茎中主要成分为单萜。分析可能有以下原因：首先，采收季节不同；其次产地不同，生长环境差异。

［1］江苏新医学院.中药大辞典（下册）［M］.上海：上海科学技术出版社，1986：1842－1843.

［2］瞿万云，杨春海，余爱农，等.鸭儿芹挥发性化学成分的研究［J］.精细化工，2003，20（7）：416－418.

［3］李 娟，蒋小华，谢运昌，等.鸭儿芹根、茎、叶挥发油的化学成分［J］.广西植物，2011，31（6）：853－856.

［4］徐耀庭，李劲松，顾 炜，等.D－柠檬烯诱导人膀胱癌细胞周期阻滞及凋亡的研究［J］.中国医学工程，2010，18（3）：6－9.

［5］项 峰.榄香烯乳药理作用及临床应用［J］.张家口医学院学报，1998，15（3）：104－107.

［6］韩 琳，汤道权.α－细辛脑的抗惊厥、抗癫 作用研究［J］.井冈山医专学报，2009，16（6）：9－10.